实验室生物安全知识培训考试试题及答案

实验室生物安全知识培训考试试题及答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.在BSL-2实验室中，下列哪项操作必须在生物安全柜（BSC）内完成？A.打开含菌冻干管的安瓿瓶B.用酒精灯灼烧接种环C.给实验小鼠腹腔注射D.用高压灭菌器处理废弃培养基答案：A解析：打开含菌冻干管易产生气溶胶，BSL-2要求在有外排功能的BSC内操作；B、C、D均可在开放台面或专用设备内完成。2.依据WHO《实验室生物安全手册》第四版，BSL-3实验室核心压差应维持：A.ΔB.ΔC.ΔD.Δ答案：B解析：WHO规定BSL-3核心工作区对相邻区域最小负压差为12.5

3.关于“锐器盒”的使用，下列说法错误的是：A.材质需耐穿刺、耐高压B.装至容积时应封口C.可暂存于4℃冰箱等待灭菌D.封口后应标识生物危害符号答案：C解析：锐器盒禁止冷藏，因低温易使塑料变脆导致穿刺泄漏；其余均符合GB19489-2008。4.含乙肝病毒（HBV）血清溢洒≥10mL，首选消毒剂为：A.0.1%新洁尔灭B.5%过氧化氢C.5000mg/L有效氯次氯酸钠D.75%乙醇答案：C解析：高浓度有效氯可快速灭活HBV，5%过氧化氢虽有效但作用慢，乙醇对包膜病毒效果有限。5.实验室获得性感染（LAI）最常见途径为：A.食入B.锐器伤C.动物抓咬D.呼吸道暴露答案：B解析：WHO统计锐器伤占LAI30%–40%，远高于其他单一途径。6.下列哪项不是BSL-4实验室“生命支持系统”的组成部分？A.正压防护服供气软管B.化学淋浴装置C.高效过滤单元（HEPA）D.双门高压灭菌器答案：D解析：双门高压灭菌器属于污染废弃物处理设备，不属于人员生命支持系统。7.关于“生物安全柜”分类，正确的是：A.A1型柜允许外接排风B.A2型柜工作区下降气流为单向非循环C.B2型柜排风比例100%D.B1型柜可处理微量放射性核素答案：C解析：B2型柜无循环风，全部外排；A1、A2均允许循环；B1仅30%外排，不可用于挥发性放射物。8.运输UN2814A类感染性物质，下列包装顺序正确的是：A.主容器→吸水材料→辅助容器→刚性外包装B.主容器→辅助容器→吸水材料→刚性外包装C.主容器→吸水材料→刚性外包装→辅助容器D.主容器→辅助容器→刚性外包装→吸水材料答案：A解析：UN2814要求“三层包装”，吸水材料须包裹主容器并置于辅助容器内，再整体放入刚性外包装。9.实验室小鼠感染鼠痘病毒（ECTV）后，最安全的安乐死方法是：A.颈椎脱臼B.CO₂窒息C.过量巴比妥腹腔注射D.冷冻后断头答案：B解析：CO₂窒息可减少血液飞溅；断头与脱臼均易形成气溶胶；腹腔注射需抓取固定，增加暴露风险。10.关于“生物安全等级”与“动物实验设施”对应关系，正确的是：A.ABSL-1可饲养SPF级动物B.ABSL-2适用于登革病毒小鼠模型C.ABSL-3需设置气锁缓冲间D.ABSL-4必须采用单向流洁净走廊答案：C解析：ABSL-3要求气锁缓冲；ABSL-1仅适用于不引起人疾病的微生物；登革病毒动物模型需ABSL-3；ABSL-4采用生命支持正压服，走廊可为负压。11.高压灭菌器生物监测指示菌为：A.枯草芽孢杆菌5230B.嗜热脂肪地芽孢杆菌7953C.大肠杆菌8099D.金黄色葡萄球菌6538答案：B解析：嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢耐热性最强，用于121℃灭菌效果验证。12.实验室发生结核分枝杆菌溢洒，下列处置顺序正确的是：①疏散人员②穿戴N95+防水围裙③覆盖吸附材料④5000mg/L有效氯消毒30min⑤清水擦拭A.①②③④⑤B.②①③④⑤C.①③②④⑤D.②③④①⑤答案：A解析：先疏散再防护，避免未防护人员进入；消毒后需清水去残留。13.关于“实验室门禁系统”，BSL-3要求：A.刷卡进入即可B.双门互锁，进出需身份记录C.仅限制非授权人员进入D.出口无需门禁答案：B解析：GB19489-2008规定BSL-3设双门互锁，进出均记录，确保污染区负压稳定。14.下列哪项属于“生物安全三废”？A.过期的NaCl溶液B.被HBV污染的吸头C.破损的玻璃烧杯D.含有EB的琼脂糖凝胶答案：B解析：生物性废弃物特指被病原体污染的物品；EB凝胶属化学危害；NaCl溶液无毒；玻璃为物理危害。15.实验室人员血清检测抗-HBs<10mIU/mL，应：A.立即接种乙肝免疫球蛋白B.停止一切实验操作C.按0-1-6月程序再接种乙肝疫苗D.每月复查直至>100mIU/mL答案：C解析：抗体低于保护阈值需全程再免疫；无需停职或注射HBIG，除非明确暴露。二、多项选择题（每题3分，共30分；每题至少两个正确答案，多选少选均不得分）16.关于“生物安全柜”使用，正确的是：A.操作前紫外灯照射30min即可开始实验B.双臂应垂直缓慢伸入，避免扰动气流C.柜内可明火灼烧接种环D.操作结束后应风机运行5min再关答案：B、D解析：紫外仅表面消毒，不能代替气流稳定；明火破坏层流；结束后自净5min可清除污染气溶胶。17.下列哪些属于BSL-3实验室“必备”设备？A.Ⅲ级生物安全柜B.独立供氧正压服C.双扉高压灭菌器D.自动监测压差报警系统答案：C、D解析：BSL-3可用Ⅱ型BSC；正压服仅BSL-4；双扉灭菌器与压差报警为BSL-3强制要求。18.关于“实验室生物安保”（biosecurity），正确的是：A.病原体库存应双人双锁B.门禁卡可借给同组人员C.高致病性菌株需建立“双人复核”领用制度D.实验结束后立即销毁所有菌株答案：A、C解析：安保强调防盗窃、防滥用；门禁卡不得转借；标准菌株可保存，无需立即销毁。19.运输UN3373B类感染性物质，包装要求包括：A.主容器可真空密封B.辅助容器耐95kPa压差C.外包装标识“BIOLOGICALSUBSTANCE,CATEGORYB”D.需附托运人声明（Shipper’sDeclaration）答案：A、B、C解析：UN3373无需托运人声明，仅需包装标识；主容器真空密封防泄漏；辅助容器需通过95kPa压差测试。20.实验室发生HIV血液溅眼，应立即：A.用大量生理盐水冲洗15minB.报告实验室负责人C.口服拉米夫定+替诺福韦+多替拉韦28天D.2小时内开始暴露后预防（PEP）答案：A、B、D解析：HIV-PEP推荐三联，但需经专业医师评估后开具；冲洗与报告为现场第一要务。21.下列哪些操作会产生“感染性气溶胶”？A.高速离心含菌试管未加盖B.用巴斯德吸管吹打混悬液C.涡旋震荡含菌液体D.打开高压后的菌液试管答案：A、B、C解析：高压后菌液已灭活，无感染性；其余均可产生<5µm气溶胶颗粒。22.关于“实验室动物福利”，正确的是：A.小鼠麻醉深度以夹趾无反射为准B.实验结束后可立即放血致死C.需经伦理委员会批准D.非人灵长类需环境丰富化答案：A、C、D解析：放血致死需麻醉后实施，禁止清醒放血；伦理审批与福利为强制要求。23.下列哪些属于“生物安全柜”性能验证指标？A.下降气流速度B.高效过滤器完整性（DOP/PAO测试）C.噪声≤65dBD.照度≥1000lux答案：A、B、C解析：照度仅需≥650lux；其余为NSF/ANSI49必检项目。24.关于“实验室个人防护装备（PPE）”，正确的是：A.N95口罩可替代外科口罩B.乳胶手套可接触丙酮C.防护面屏可防止溅射D.实验服袖口需扎入橡胶手套内答案：A、C、D解析：乳胶不耐丙酮，应选丁腈手套；其余均符合规范。25.下列哪些情况需启动“实验室生物安全应急预案”？A.离心管破裂未造成人员暴露B.停电导致BSC停机5minC.高致病性菌株丢失2小时未找到D.火灾触发喷淋系统答案：C、D解析：菌株丢失属安保事件，必须启动预案；火灾无论大小均启动；短暂停电未暴露可内部处理。三、判断题（每题1分，共10分；正确打“√”，错误打“×”）26.BSL-2实验室地面可用普通PVC卷材，无需焊接。答案：×解析：GB19489-2008要求BSL-2地面防渗、耐酸碱，焊接型PVC或环氧自流平为佳，普通卷材接缝易渗漏。27.Ⅲ级生物安全柜操作手套破损，应立即停止实验，更换手套并消毒。答案：√解析：Ⅲ级柜为完全密闭，手套破损构成暴露，必须停机更换。28.运输高致病性微生物菌株，必须随车配备“生物安全运输箱”及“护送人员”。答案：√解析：国务院《病原微生物实验室生物安全管理条例》规定陆路运输须双人护送。29.实验室可自备“甲醛熏蒸”对BSC进行日常消毒。答案：×解析：甲醛致癌，仅限特殊情况下由专业人员操作；日常用5000mg/L有效氯或75%乙醇擦拭即可。30.实验动物设施“屏障环境”对人员流向要求“单向”：清洁区→污染区→半污染区。答案：×解析：正确流向为清洁区→半污染区→污染区，退出经缓冲淋浴返回清洁区，避免交叉。31.高压灭菌器物理监测（温度-压力曲线图）可替代生物指示剂监测。答案：×解析：物理监测仅证明设备运行正常，生物指示剂才能直接证明灭菌效果，二者不可替代。32.实验室人员怀孕后可拒绝参加含风疹病毒实验。答案：√解析：孕妇为风疹高危人群，依据《女职工劳动保护特别规定》可调岗。33.生物安全柜内可暂时存放未密封的菌液试管，但需标注警示。答案：×解析：BSC内禁止存放非必要物品，未密封菌液增加污染与泼溅风险。34.实验室发生布鲁氏菌暴露，需联合使用多西环素+利福平进行暴露后预防。答案：√解析：WHO推荐布鲁氏菌PEP方案为多西环素100mgbid+利福平600mgqd，连用21天。35.生物安全实验室的“风险评估”只需在新建时进行一次。答案：×解析：风险评估为动态过程，任何实验流程、病原体、设备变更均需重新评估。四、填空题（每空2分，共20分）36.BSL-3实验室核心工作区对相邻区域最小负压差为________Pa，气流方向应为________。答案：12.5；自清洁区流向污染区解析：GB19489-2008规定数值与流向，确保气溶胶不外逸。37.高压灭菌器常规灭菌参数为温度________℃，时间________min，压力________kPa。答案：121；15；103解析：饱和蒸汽121℃对应压力约103kPa（1.05kg/cm²），维持15min可杀灭芽孢。38.运输UN2814A类感染性物质，外包装需标注________标志，最小尺寸为________mm。答案：UN2814InfectiousSubstance；100×100解析：IATADGR规定菱形标识边长不小于100mm，背景白色，文字黑色。39.生物安全柜Ⅱ级A2型，下降气流速度范围为________m/s，排风比例________%。答案：0.25–0.5；30解析：NSF/ANSI49规定A2型30%外排，70%循环。40.实验室“三废”指________、________、________。答案：废水；废气；固体废弃物解析：生物安全三废需分别经消毒、过滤、高压灭菌处理达标排放。五、简答题（每题10分，共30分）41.简述实验室锐器伤“现场处置五步流程”，并说明每一步的生物学原理。答案：（1）挤血：立即从近心端向远心端轻柔挤压，使伤口出血，可机械性排出部分病原体，降低初始接种量。（2）冲洗：用大量流动清水或生理盐水持续冲洗15min，稀释并冲走残留病原体，减少局部浓度。（3）消毒：用75%乙醇或0.5%碘伏涂抹，乙醇使蛋白变性、破坏包膜病毒；碘伏氧化病原体巯基，广谱高效。（4）报告：向实验室负责人及生物安全官报告，启动暴露评估与随访，确保及时PEP与血清学监测。（5）记录：填写《职业暴露登记表》，包括锐器种类、病原体、暴露量、处理措施，为后续保险与改进提供数据。42.比较BSL-2与BSL-3实验室在“个人防护装备（PPE）”方面的差异，并说明理由。答案：BSL-2：要求实验服、乳胶/丁腈手套、外科口罩或N95、护目镜或面屏；若操作产生气溶胶，加穿防水围裙。BSL-3：在上述基础上，必须佩戴N95以上级别防护口罩或正压呼吸器、双层手套、一次性连体防护服、防护靴套、护目镜全面罩；长发需完全包裹。理由：BSL-3处理气溶胶传播或高致病性病原体，暴露剂量阈值低，需更高密闭性与过滤效率；双层手套降低穿孔概率；连体服避免皮肤裸露；正压呼吸器防止吸入<0.3µm颗粒。43.某BSL-3实验室进行SARS-CoV-2病毒培养，离心环节发生离心机转子破裂，疑似大量气溶胶泄漏。请写出“应急响应十步”，并指出关键风险控制点。答案：（1）立即按下离心机急停，保持盖子关闭30min，利用内部沉降减少气溶胶外逸。（2）通过内部通讯系统通知所有人员就地静止，避免走动产生气流。（3）启动事故排风，关闭空调回风，维持负压。（4）穿戴正压呼吸器、双层丁腈手套、连体防护服后进入。（5）用10%中性缓冲甲醛对离心腔喷雾消毒，静置30min。（6）小心取出转子，置于含5000mg/L有效氯的消毒桶浸泡60min。（7）用吸水材料吸附腔体内残留液体，同法消毒。（8）对实验室表面进行终末消毒，采用1000mg/L有效氯擦拭两遍。（9）收集所有废弃物至双层黄色医疗袋，封口后高压灭菌。（10）退出时化学淋浴，脱PPE顺序：外层手套→防护服→靴套→内层手套→口罩→面屏，逐层消毒。关键风险控制点：①离心机停机后静置时间不足导致气溶胶外逸；②正压呼吸器面部密封性检测；③甲醛消毒浓度与作用时间；④高压灭菌器生物指示剂验证；⑤人员退出时交叉污染。六、案例分析题（每题15分，共30分）44.案例：某高校BSL-2实验室，研究生A在提取HBV质粒时，使用高速离心机未配平，导致离心管破裂，含菌上清溅入右眼。A立即用洗眼器冲洗5min后自行到附属医院就诊。实验室未记录暴露剂量，也未报告学校生物安全委员会。三周后A出现黄疸，血清HBsAg阳性。问题：（1）指出本次事件暴露的5项违规；（2）给出正确处置流程；（3）计算暴露后乙肝感染概率，并说明依据。答案：（1）违规：①离心前未配平，违反SOP；②未佩戴护目镜；③洗眼时间不足（应≥15min）；④未现场报告负责人；⑤未在24h内注射HBIG和启动PEP。（2）正确流程：①立即停止实验，保持离心机关闭10min；②用大量生理盐水冲洗眼睛≥15min；③向实验室负责人报告，填写暴露表；④24h内采血检测HBsAg、抗-HBs、肝功；⑤若抗-HBs<10mIU/mL，注射HBIG