2026年病毒检验检测人员试题及答案

2026年病毒检验检测人员试题及答案一、单项选择题（每题1分，共20分）1.关于病毒核酸组成的描述，正确的是A.所有病毒均只含DNAB.所有病毒均只含RNAC.所有病毒只含一种类型的核酸D.所有病毒同时含有DNA和RNA2.目前临床及科研中进行病毒分离培养，最常用的细胞类型是A.原代细胞B.二倍体细胞C.传代细胞系D.鸡胚原代细胞3.根据我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》定义，高致病性病原微生物是指A.仅第一类病原微生物B.第一类和第二类病原微生物C.第二类病原微生物D.第二类和第三类病原微生物4.实时荧光反转录PCR（RT-qPCR）检测RNA病毒核酸过程中，催化反转录反应的酶是A.TaqDNA聚合酶B.依赖RNA的DNA聚合酶C.依赖DNA的RNA聚合酶D.限制性核酸内切酶5.诺如病毒暴发疫情调查中，最常用的临床检测标本类型是A.鼻咽拭子B.血液C.粪便D.脑脊液6.目前我国常规开展猴痘病毒核酸检测，最常用的保守靶标基因是A.ORF1ab基因B.F3L基因C.S蛋白基因D.G蛋白基因7.下列哪种特性提示病毒含有脂质包膜A.对紫外线抵抗力强B.对乙醚敏感C.耐酸环境D.耐反复冻融8.PCR检测实验中，阴性对照的核心作用是A.验证扩增体系的有效性B.排除标本核酸提取失败导致的假阴性C.排除扩增产物或试剂污染导致的假阳性D.验证引物的特异性9.病毒中和试验的核心原理是A.中和抗体与病毒结合后可使病毒失去感染性B.中和抗体介导病毒发生凝集反应C.中和抗体可以固定补体产生显色反应D.中和抗体可以抑制病毒血凝特性10.甲型流感病毒根据表面抗原分亚型的依据是A.核蛋白和基质蛋白B.核酸序列类型C.血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)D.包膜脂质成分11.开展高致病性病原微生物样本操作，必须使用Ⅱ级生物安全柜的实验室级别最低为A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-412.我国儿童手足口病暴发最常见的致病病原体组合是A.EV71和柯萨奇病毒A16B.诺如病毒和轮状病毒C.单纯疱疹病毒和腺病毒D.水痘-带状疱疹病毒和EV7113.临床常用福尔马林灭活病毒标本，用于固定和灭活的福尔马林常用浓度是A.0.1%~0.5%B.1%~4%C.10%~15%D.20%~40%14.病毒核酸提取过程中，裂解液中加入异硫氰酸胍的核心作用是A.沉淀核酸B.裂解细胞、灭活核酸酶，保护核酸完整性C.去除蛋白质杂质D.洗脱RNA分离柱杂质15.下列病毒中，主要经消化道传播的是A.甲型肝炎病毒B.乙型肝炎病毒C.流感病毒D.人类免疫缺陷病毒16.负染电镜观察病毒形态结构，最常用的负染剂是A.苏木素B.伊红C.磷钨酸D.结晶紫17.常规PCR反应体系中，引物退火步骤的温度范围一般是A.90~95℃B.70~72℃C.40~60℃D.10~15℃16.根据我国病原微生物分类标准，能够引起人类严重疾病，且我国尚未发现或已经宣布消灭的病原微生物属于A.第一类病原微生物B.第二类病原微生物C.第三类病原微生物D.第四类病原微生物19.实时荧光PCR检测中，假阴性结果产生的原因不包括下列哪项A.标本采集不规范，未采集到病变部位样本B.核酸提取效率低，样本中靶核酸浓度不足C.样本中存在PCR扩增抑制剂D.实验室扩增产物气溶胶污染20.下列哪种灭活方式对大多数有包膜病毒灭活效果最差A.56℃30分钟加热B.75%乙醇浸泡C.紫外线照射30分钟D.4℃冷藏24小时二、多项选择题（每题2分，共20分，多选、少选、错选均不得分）1.病毒包膜的主要化学成分包括A.脂质B.核酸C.蛋白质D.多糖E.无机离子2.临床开展RT-qPCR检测RNA病毒核酸，必须设置的对照类型包括A.空白对照B.阴性对照C.阳性对照D.内参对照E.阳性患者对照3.下列病毒中，可通过性接触途径传播的有A.人类免疫缺陷病毒(HIV)B.人乳头瘤病毒(HPV)C.乙型肝炎病毒(HBV)D.单纯疱疹病毒2型(HSV-2)E.轮状病毒4.病毒实验室操作中，下列操作可产生生物性气溶胶的有A.打开离心后的病毒样本离心管盖B.用加样枪反复吹打病毒悬液C.高速离心未密封的病毒样本D.接种环划线接种病毒培养物E.在生物安全柜内开盖处理阳性样本5.病毒分离培养的常用方法包括A.细胞培养法B.鸡胚培养法C.动物接种法D.固体培养基分离培养法E.生化反应培养法6.影响实时荧光PCR检测结果准确性的因素包括A.标本采集、运输和保存条件B.核酸提取的纯度和回收率C.引物和探针的特异性D.扩增反应的循环参数设置E.实验室是否存在气溶胶污染7.下列病毒中，属于无包膜病毒的有A.甲型肝炎病毒B.诺如病毒GII型C.腺病毒D.甲型流感病毒E.人类免疫缺陷病毒8.病毒实验室一级生物防护的要求包括下列哪几项A.穿戴一次性医用口罩B.佩戴一次性乳胶手套C.穿戴医用工作服D.佩戴护目镜E.穿戴防水隔离衣9.下列检验方法中，属于病毒血清学检测方法的有A.酶联免疫吸附试验(ELISA)B.中和试验C.血凝抑制试验D.直接免疫荧光法E.实时荧光PCR法10.感染性病毒样本跨机构运输的要求包括A.采用三层包装系统B.根据病毒稳定性选择2~8℃冷藏或干冰冷冻运输C.符合病原微生物运输包装国家标准D.包装表面清晰标注样本信息、生物危害标识E.任何具备运输资质的车辆均可承运三、判断题（每题1分，共10分，正确打√，错误打×）1.所有病毒都必须在活宿主细胞内才能完成增殖。2.PCR扩增实验中，阳性对照未出现扩增信号，说明扩增体系存在异常，该批次结果不可信。3.诺如病毒无包膜，耐乙醚、耐酸性环境，抵抗力较强。4.二级生物安全实验室可以操作所有类型的病原微生物。5.核酸提取过程中加入蛋白酶K的作用是降解样本中的蛋白质，灭活核酸酶，保护核酸完整性。6.中和试验只能检测病毒中和抗体，无法用于病毒的分型鉴定。7.扩增产物气溶胶污染是PCR检测假阳性结果最主要的原因。8.甲型流感病毒的抗原性变异主要发生在血凝素和神经氨酸酶。9.所有病毒标本都可以在室温放置24小时后检测，不会影响检测结果。10.HIV抗体初筛试验阳性即可确诊受检者为艾滋病病毒感染者。四、计算题（共10分）病毒实验室需配制1000mL0.5%有效氯的次氯酸钠消毒液，用于消毒新冠病毒污染的实验台面，现有有效氯浓度为10%的次氯酸钠原液，请计算需要量取原液的体积和需要加入蒸馏水的体积，写出计算过程。五、简答题（每题5分，共20分）1.简述病毒核酸检测前，临床标本处理的基本原则。2.简述二级生物安全实验室处理感染性病毒样本的个人防护要点。3.简述PCR检测实验室常见的污染类型和来源。4.简述病毒分离培养的基本操作流程。六、案例分析题（每题10分，共20分）1.某街道社区卫生服务中心接诊12名某小学学生患者，集中发病，临床表现为发热、咽痛、畏光流泪、眼结膜充血，部分患者颈部及躯干出现淡红色斑丘疹，初步诊断为急性呼吸道病毒感染，拟送区疾控中心做病毒核酸检测。请回答下列问题：(1)根据流行病学和临床表现，最可能的常见致病病毒有哪些？(2)针对该疾病，应当采集哪些类型的检测标本？(3)采用实时荧光RT-PCR检测，实验中需要设置哪些对照？分别说明各对照的作用。2.某区疾控中心在处理一起诺如病毒胃肠炎暴发疫情时，共采集28份粪便标本和6份环境涂抹样本，采用商品化实时荧光PCR试剂盒检测诺如病毒GII型，扩增结束后发现，阴性对照孔出现了弱扩增信号，Ct值为37.8。请回答下列问题：(1)该结果提示实验过程中存在什么问题？可能的污染来源有哪些？(2)该批次实验结果应当如何处理？重新实验时需要采取哪些措施避免该问题再次发生？参考答案与解析一、单项选择题1.C解析：病毒属于非细胞型微生物，核心仅含一种类型的核酸，DNA或RNA，据此可分为DNA病毒和RNA病毒两大类，因此C正确。2.C解析：原代细胞制备难度大，难以多次传代；二倍体细胞来源有限，无法长期传代保存；传代细胞系可无限传代，生物学性状稳定，易于培养保存，是目前病毒分离培养最常用的细胞类型，因此C正确。3.B解析：我国《病原微生物实验室生物安全管理条例》明确规定，高致病性病原微生物为第一类和第二类病原微生物，因此B正确。4.B解析：反转录酶的本质是依赖RNA的DNA聚合酶，催化以RNA为模板合成cDNA的反转录过程，因此B正确。5.C解析：诺如病毒主要感染肠道，粪便中病毒载量高，排毒时间长，是最常用的检测标本，因此C正确。6.B解析：猴痘病毒核酸检测的常用保守靶标为F3L和B6R基因，因此B正确。7.B解析：病毒包膜的主要成分是脂质，乙醚可溶解脂质包膜，因此对乙醚敏感是病毒含包膜的标志，B正确。8.C解析：阴性对照不含靶核酸，若阴性对照出现扩增信号说明存在污染，因此阴性对照的核心作用是排除污染导致的假阳性，C正确。9.A解析：中和试验的核心原理是特异性中和抗体与病毒结合后，可阻断病毒对宿主细胞的吸附和侵入，使病毒失去感染性，因此A正确。10.C解析：甲型流感病毒的表面抗原HA和NA是分亚型的依据，核蛋白和基质蛋白是分型（甲、乙、丙、丁）的依据，因此C正确。11.B解析：二级生物安全实验室（BSL-2）操作高致病性病原微生物样本时，必须使用Ⅱ级生物安全柜，因此最低级别为BSL-2，B正确。12.A解析：我国手足口病的主要病原体为EV71和柯萨奇病毒A16，其中EV71是导致重症手足口病的主要病原体，因此A正确。13.B解析：临床病毒标本固定和灭活常用1%~4%福尔马林，40%为商品福尔马林原液浓度，因此B正确。14.B解析：异硫氰酸胍是强变性剂，可裂解细胞，使蛋白质变性，灭活核酸酶，避免核酸降解，因此B正确。15.A解析：甲肝病毒和戊肝病毒为消化道传播，乙肝、HIV主要经血液和性传播，流感经呼吸道传播，因此A正确。16.C解析：负染电镜观察病毒形态最常用的负染剂为2%磷钨酸，苏木素、伊红为常规组织染色剂，因此C正确。17.C解析：PCR反应分为三步：变性（90~95℃）、退火（40~60℃）、延伸（70~72℃），因此C正确。18.A解析：我国病原微生物分类中，第一类病原微生物定义为能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物，因此A正确。19.D解析：气溶胶污染是导致假阳性的主要原因，假阴性原因包括标本采集不当、提取效率低、扩增抑制剂存在等，因此D符合题意。20.D解析：大多数有包膜病毒对热、乙醇、紫外线敏感，4℃冷藏仅能短期保存，不会灭活病毒，因此灭活效果最差，D正确。二、多项选择题1.ACD解析：病毒包膜来源于宿主细胞膜，主要成分为脂质、糖蛋白和多糖，不含病毒核酸，因此正确选项为ACD。2.ABCD解析：RT-qPCR必须设置空白对照、阴性对照、阳性对照、内参对照四类对照，保证结果可靠，因此正确选项为ABCD。3.ABCD解析：HIV、HPV、HBV、HSV-2均可通过性接触传播，轮状病毒主要经消化道传播，因此正确选项为ABCD。4.ABCDE解析：所有涉及病毒样本的开盖、吹打、离心、划线操作都可能产生气溶胶，即使在生物安全柜操作也会产生，只是不会扩散到外环境，因此正确选项为ABCDE。5.ABC解析：病毒必须在活细胞内增殖，不能用无生命的培养基分离培养，因此常用方法为细胞培养、鸡胚培养、动物接种，正确选项为ABC。6.ABCDE解析：标本前处理、提取质量、引物特异性、参数设置、污染都会影响PCR结果准确性，因此全选项正确。7.ABC解析：甲肝、诺如、腺病毒都是无包膜病毒，流感和HIV为有包膜病毒，因此正确选项为ABC。8.ABC解析：一级防护适用于普通操作，要求穿戴工作服、一次性口罩、一次性手套，护目镜和隔离衣为二级防护要求，因此正确选项为ABC。9.ABCD解析：PCR属于核酸检测，不是血清学检测，其余选项均为血清学抗体或抗原检测方法，因此正确选项为ABCD。10.ABCD解析：感染性病毒样本运输必须由具备相应生物安全运输资质的单位和人员承运，不是任何车辆都可以，因此正确选项为ABCD。三、判断题1.√解析：病毒没有完整的代谢系统，必须依赖宿主细胞的细胞器和原料才能完成增殖，因此所有病毒都是专性活细胞内寄生。2.√解析：阳性对照含有已知的靶核酸，若阳性对照都不扩增，说明扩增体系或试剂存在问题，该批次结果全部不可信。3.√解析：诺如病毒无包膜，对乙醚、酸、热抵抗力较强，可在酸性环境下保持感染性，因此正确。4.×解析：第一类高致病性病原微生物必须在三级或四级生物安全实验室操作，二级实验室不能操作，因此错误。5.√解析：蛋白酶K可降解蛋白质，去除与核酸结合的组蛋白，同时灭活样本中的核酸酶，避免核酸降解，因此正确。6.×解析：中和试验的特异性很高，不仅可以检测中和抗体，还可以用于病毒的分型鉴定，因此错误。7.√解析：PCR扩增产物的拷贝数极高，微量的扩增产物形成气溶胶污染就会导致假阳性，是PCR实验室最常见的假阳性原因，因此正确。8.√解析：甲型流感病毒抗原漂移和抗原转换都发生在HA和NA基因，因此正确。9.×解析：大多数病毒对温度敏感，室温放置会导致病毒失活，核酸降解，影响检测结果，需要冷藏或冷冻保存，因此错误。10.×解析：HIV初筛阳性存在假阳性可能，必须经过蛋白印迹法等确证试验阳性才能确诊，因此错误。四、计算题根据溶液稀释前后溶质质量守恒定律，计算公式为：=其中=10为原液浓度，=0.5为目标浓度，=需要加入蒸馏水的体积为：=答案：需要量取50mL原液，加入950mL蒸馏水。五、简答题1.病毒核酸检测标本处理的基本原则：(1)尽快处理：标本采集后尽快处理，避免核酸降解，24小时内检测可2~8℃保存，超过24小时需-70℃冻存；(2)无菌操作：避免样本间交叉污染，避免外源核酸污染；(3)灭活处理：高致病性样本检测前需进行灭活处理，保证操作安全；(4)去除杂质：根据标本类型去除杂质（如粪便标本需离心去除食物残渣），避免抑制PCR扩增；(5)核酸提取后尽快扩增，避免核酸降解。2.二级生物安全实验室处理感染性病毒样本的个人防护要点：(1)进入实验室穿戴工作服、一次性帽子、医用防护口罩；(2)操作感染性样本时佩戴双层乳胶手套，必要时戴护目镜或面屏；(3)处理产生气溶胶的操作必须在生物安全柜内进行，穿隔离衣；(4)离开实验室前摘除防护用品，按医疗废物处理，进行手消毒；(5)若发生样本溅洒、针刺伤，立即按应急预案处理，上报实验室负责人。3.PCR常见污染类型和来源：(1)扩增产物污染：是最常见的污染来源，既往PCR扩增的产物形成气溶胶，污染实验室环境、移液器和耗材；(2)样本交叉污染：加样过程中样本间交叉污染，阳性样本污染阴性样本；(3)试剂污染：配制反应体系的试剂或耗材中混入外源靶核酸；(4)克隆质粒污染：实验室保存的阳性质粒标准品污染环境和试剂。4.病毒分离培养的基本流程：(1)标本前处理：临床标本接种前处理，除菌过滤去除细菌杂质，高致病性标本需做好生物防护；(2)接种：将处理后的标本接种到单层细胞、鸡胚或实验动物；(3)培养：放在合适温度和二氧化碳浓度的培养箱培养；(4)观察：逐日观察细胞病变、鸡胚死亡或动物发病情况；(5)鉴定：对阳性培养物通过中