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文档简介
第3章第4节蛋白质工程的原理和应用
A级必备知识基础练
1.合成天然不存在的蛋白质最终需要改造的核心是()
A.基因结构
B.RNA结构
C.氨基酸咛列
D.蛋白质结构
2.蛋白质工程的主要流程顺序正确的是()
①蛋白质分子结构设计②DNA改造或合成③预期蛋白质功能④据氨基酸序列推出脱氧核首
酸序列
A.①一②③—④
B.④1②—①一③
C.③—►①—>(4)―►②
D.③—►④—►①―►②
3.科学家为提高玉米中赖氨酸的含量,计划将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异痉氨酸,将二
氢毗咤二粉酸合成酶中第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸。为此,下列操作正确的是()
A.直接改造这两种酶的空间结构
B.对指导这两种酶合成的mRNA进行改造
C.利用诱变育种技术促使控制这两种酶合成的基因突变
D.利用蛋白质工程技术,对控制这两种酶合成的基因进行改造
4.下图为蛋白质工程的流程图,下列说法正确的是(
设
期
-顶
H计
能
-功
的一改造或合成氨基酸M蛋白质
物
生
在序列(三维
一
能
功
国mRNA
rlhr(多肽链)龌结构)
A.利用蛋白质工程制造出的蛋白质都是自然界本来就有的
B.蛋白质工程是一项完全摆脱基因工程技术的全新的生物工程技术
C.过程a、b分别是转录、翻译
D.蛋白质工程不可能构建出一种新的基因
5.基因工程和蛋白质工程技术有很大的应用价值,可用于医药及其他工农业生产中。下列大于基因
工程和蛋白质工程的叙述,正确的是()
A.蛋白质工程的操作对象是蛋白质,不需要酹和载体作为工具
B.目的基因的检测与鉴定是培育转基因生物过程中的核心环节
C.基因工程操作中所用质粒都是来自细菌细胞中天然的质粒
D.PCR扩增相关目的基因时,子链的合成方向是5端到3端
642023浙江杭州高二期中]下列关于蛋白质工程及其应用的叙述,正确的是()
A.能定向改造蛋白质分子结构,使之更加符合人类需要
B.实质是通过改变氨基酸的结构改变蛋白质的功能
C.核心操作是DNA上的基因进行增添、替换、删除
D.蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术
7.科研人员以伊甘露葡萄糖酶为核心研究材料,在其N端找到了两个关键的氨基酸位点,将这两个位
点的组氨酸和肺氨酸分别替换为酪氨酸后,其热稳定性得到了显著提高。下列说法正确的是()
A.细胞内合成改造后的热稳定性蛋白质的过程不遵循中心法则
B.替换蛋白质中的氨基酸实际可通过改造基因中的碱基序列实现
C.在分子水平上,可利用PCR等技术检测细胞内足否合成新的日的蛋白质
D.制备过程中应先获得目标蛋白质的三维结构,再预期其生物学功能
8.己知生物体内有一种转运蛋白Y,如果将蛋白Y中某一个氨基酸替换,改变后的蛋白质Yi不但保留
了蛋白Y原有的功能,而且具备了酶的催化功能。下列说法正确的是()
A.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B.可以通过对蛋白Y基因改造或人工合成获得蛋白Yi基因
C.蛋白质工程操作过程中,不需要酶和载体
D.细胞内合成蛋白Yi与蛋白Y的过程中,遗传信息的流向是相反的
9.科研人员利用不同算法,可依据蛋白质结构预测其功能。下列有关说法错误的是()
A.将未知蛋白质与已知蛋白质的氨基酸序列进行对比分析可以预测蛋白质的功能
B.通过三维结构对比可以判断两个蛋白质是否有相似的功能
C.核甘酸序列发生突变,其编码的蛋白质功能就会发生改变
D.可根据蛋白质结构相似程度判断物种间亲缘关系的远近
10.胰岛素可用于治疗糖尿病,但胰岛素注射后易在皮下堆积,需较长时间才能进入血液,进入血液后
乂易被分解,因此治疗效果受到影响.下图是新的速效胰岛素的生产过程,回答下列问题。
生化制备与重折叠J胰岛索结时X射线晶体衍射
*的胰岛索||一级结.
②在大肠杆菌或其计算机设&
颐胞中表达用DNA合成计及作图⑤
京的胰岛素基因仪人”成_।新的胰岛素模?
(1)新的胰岛素生产过程属于工程,该工程的操作步骤为(用图示序号表
示)。
(2)获取新的胰岛素基因除图示方法外,还可以通过获得;在体外利用PCR技术对人工合
成的新的胰岛素基因进行扩增时,需向反应体系中加入TaqDNA聚合酶,该酶的作用
是.作用的
温度为。
(3)在大肠杆菌细胞中合成的新的胰岛素,需通过生化制备与重折叠才具备预期的功能,原因
是
B级能力素养提升练
11.T4溶菌旃来源于T4噬菌体,是重:要的工业用酶。科学家通过一定技术使T4溶菌酶的第3位异亮
氨酸变为半胱氨酸(异亮氨酸的密码子是AUU、AUC、AUA,半胱氨酸的密码子是UGU、UGC),于
是在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成一个二硫健,从而使T4溶菌前的耐热性得到了提
高。下列叙述正确的是()
A.对T4溶菌酶的改造属于发酵工程的范畴
B.参与新的T4溶菌能合成的[RNA种类一定会发生改变
C.改造后的T4溶菌酶中的二硫键的作用类似于DNA中的氢键
D.上述改造通过替换T4溶菌酶DNA上的1个碱基对即可实现
12.基因定点突变的目的是通过定向地改变基因内一个或少数几个碱基来改变多肽链上一个或几个
氨基酸。该技术是蛋白质工程的重要技术。下图为利用PCR技术进行定点突变的流程,相关叙述错
误的是()
5,拟突变位点3/
35/
5
3
5
I混合、变性后,杂交
'------^3,
3'»------5'
首先使用酪①使其延
伸,然后使用引物X
和引物Y进行PCR
?3,
-------------5'
注:引物1和引物3的突起处代袅与槎板不能互补
的突变位点,而这两条引物有部分碱基(包括突
变位点)是可以互补的.、
A.由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造或合成基因来完
成
B.酶①应为耐高温DNA聚合酶,引物X和Y应该为引物2和4
C.可以将引物1、引物2、引物3和引物4置于同一个反应系统中同时进行第一个阶段的反应,进而
缩短实验时间
D.利用图示流程技术可以将两个不同的基因拼接到一起
13.枯草杆菌蛋白酶应用于洗涤剂、制革及丝绸工业.某研究小组利用蛋白质工程将该蛋白酶中第
188位丙氨酸替换为腑氨酸、笫239位谷氨酰胺替换为精氨酸、第262位缀氨酸替换为亮氨酸,结果
发现该酶的催化活性大幅度提高。下列叙述不正确的是()
A.对枯草杆菌蛋白能进行改造通过直接改造蛋白酶的分子结构来实现
B.通过基因工程和蛋白质工程生产的枯草杆菌蛋白酶的氨基酸序列不同
C.改造后的枯草杆菌蛋白酶空间结构可能发生改变导致其催化活性提高
D.对枯草杆菌蛋白酶进行分子设计必须从预期蛋白酶的功能特点入手
14.蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究,获得有关蛋白质理化
特性和分子特性的信息,在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造,通过基因工程技
术获得可以表达蛋白质的转基因生物。中华解是一种濒危野生动物,研究者试图通过蛋白质工程改
造中华婚体内的某些蛋白质,使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是()
A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构
B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现
C.改造后的中华鲍和现有中华绢仍是同一物种
D.改造后的中华鲍的后代不具有改造的蛋白质
15.(2023河南南阳高二期中]纤维素的包括葡聚糖酶和葡萄糖甘酶,前者能将纤维素分解成纤维二
糖。研究发现,在催化纤维素分解的过程中,葡聚糖酶的活性会下降,研究人员发现产物纤维二糖与葡
聚糖酶的第248位精氨酸和第385位酪氨酸的侧链基团发生相对作用,形成封闭结构,阻碍了纤维二
糖的释放,继而抑制酶的活性。请回答下列问题。
(1)根据题干信息,可利用蛋白质工程来提高前聚糖酶的活性。蛋白质工程的基本思路
(2)如果要了解改造第248位精氨酸或改造第385位酪氨酸对葡聚糖酶活性所产生的作用的大小,该
如何设计实验?简要写出实验设计的思
路:
(3)利用PCR技术扩增改造后的葡聚糖酹基因,其扩增过程一股分为三步。扩增产
物常通过来鉴定,若实验结果发现出现非特异性扩增条带,可能的原因是
(答出一点即可)。
16J2022沏南卷,22]水蛭是我国的传统中药材,主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一,具有
良好的抗凝血作用。拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构,提高其抗凝血活性。回答下列问题。
(1)蛋白质工程流程如图所示,物质a是,物质b是o在生产过程中,物质b可能
不同,合成的蛋白质空间构象却相同,原因是0
基因
DNA
(2)蛋白质工程是基因工程的延伸,基因工程中获取目的基因的常用方法有、
和利用PCR技术扩增。PCR技术遵循的基本原理是
(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酣水解后,分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性,结果如
图所示。推测两种处理后的解产物的抗凝血活性差异主要与肽的(填“种类”或“含量”)有
关,导致其活性不同的原因是0
7
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耳
*海甲处理。醉乙史理
(4)若要比较蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素的抗凝血活性差异,
简要写出实验设计思
路:
第4节蛋白质工程的原理和应用
1.A合成自然界不存在的蛋白质属于蛋白质工程,应根据蛋白质功能,从设计蛋白质结构入手,
然后通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造出一种新的蛋白质,因此合成天然
不存在的蛋白质,最终需要改造的核心是基因结构。
2.C蛋白质工程的基本流程:③预期蛋白质功能t①蛋白质分子结构设计一④据氨基酸序列推
出脱氧核甘酸序列一②DNA改造或合成。
3.D及白质工程的操作对象是基因,应对控制这两种酶合成的基因进行改造,D项正确。
4.C基因工程原则上只能生产自然界已经存在的蛋白质,蛋白质工程可以生产自然界中不存在
的蛋白质,A项错误;蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程,B项错误;据
图可知,过程a、b分别是转录、翻译,C项正确;蛋白质工程中可根据预期蛋白质的结构构建出
一种全新的基因,D项错误。
5.D蛋白质工程操作对象是基因,需要酶和载体作为工具,A项错误;基因表达载体的构建是培
育转基因生物过程中的核心环节,B项错误;基因工程操作中所用质粒是经人工改造后的质粒,C
项错误;PCR扩增目的基因时,合成DNA子链的方向是从5'端到3'端,D项正确。
6.A蛋白质工程能按照人们的意愿定向改造蛋白质分子结构,使之更加符合人类需要,A项正
确;蛋白质工程的实质是通过改变基因来改变蛋白质的结构和功能,B项错误;对DNA上的基因
进行增添、替换、删除是基因突变,而蛋白质工程是以基因工程为基础的,核心操作是对基因的
改造或合成,C项错误;蛋白质工程是第二代基因工程,蛋白质工程的实现离不开基因工程,D项错
*o
7天o
7.B细胞内蛋白质的合成过程都遵循中心法则,A项错误;蛋白质是DNA经过转录、翻译得到
的,所以替换蛋白质中的氨基酸实际可通过改造基因中的碱基序列实现.B项正确;PCR等技术能
检测a的基因是否导入细胞或是否转录,检测细胞内是否合成新的蛋白质可使用抗原一抗体杂交
法,C项错误;蛋白质工程的制备过程中要先预期目标蛋白质的生物学功能,再设计获得该蛋白质
的三维结构,D项错误。
8.B蛋白质工程和基因工程的根本区别是蛋白质工程可制造出自然界没有的蛋白质,A项错误;
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因
合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,因此可以通过对蛋白Y基因改造或人工合
成获得蛋白Yi基因,B项正确;蛋白质工程操作过程中,需要酶和载体作为工具,C项错误;细胞内
合成蛋白Yi与蛋白Y的过程中,遗传信息的流向是相同的,D项错误。
9.C蛋白质的功能主要由其三维结构决定,而其三维结构与氨基酸序列有关,所以将未知蛋白质
与已知蛋白质的氨基酸序列进行对比分析可以预测蛋白质的功能,A项正确;蛋白质的功能主要
由其三维结构决定,所以通过三维结构对比可以判断两个蛋白质是否有相似的功能,B项正确;由
于密码子具有简并性,核甘酸序列发生突变,其编码的蛋白质功能不一定发生改变,C项错误;蛋白
质结构相似程度越高,生物之间的相似性越大,亲缘关系越近,因此可根据蛋白质结构相似程度判
斯物种间亲缘关系的远近,D项正确。
10.答案(1)蛋白质④一⑤T①一②—③
(2)基因改造以DNA为模板,根据碱基互补配对原则,将脱氧核苜酸逐个加到引物上延伸DNA
分子,从而形成一条子链DNA72c左右
(3)大肠杆菌是原核生物,没有内质网和高尔基体,不能对蛋白质进行加工
解析(1)新的胰岛素生产过程属于蛋白质工程,图中所示该工程的操作步骤为④-⑤一①一>②T
③。(2)获取新的胰岛素基因除图示的人工合成方法外,还可以通过基因改造获得;在体外利用
PCR技术对人工合成的新的城岛素基因进行扩增时,需向反应体系中加入ThqDNA聚合酶,该酶
是耐高温的DNA聚合酶,其作用是以DNA为模板,根据碱基互补配对原则,将脱氧核苔酸逐个加
到引物上延伸DNA分子,从而形成一条子链DNAoTaqDNA聚合酶作用的温度为72℃左右。
(3)在大肠杆菌细胞中合成的新的胰岛素,需通过生化制备与重折叠才具备预期的功能,原因是大
肠杆菌是原核生物,没有内质网和高尔基体,不能对蛋白质进行加工,因此得到的人胰岛素需要体
外加工才具有生物活性。
11.C对蛋白质分子的设计后改造是通过蛋白质工程来实现的,故对T4溶菌酶的改造属于蛋白
质工程的范畴.A项错误;改造前组成T4溶菌酶的氨基酸中就含有异亮氨酸和半胱氨酸,改造后
组成T4溶菌酶的氨基酸中仍可能含有异亮氨酸和半胱氨酸,因此参与其合成的tRNA种类可能
不变,B项错误;改造后的T4溶菌酶多了一个二硫键,二硫键使T4溶菌酶的耐热性提高,DNA分
子中氢键越多,热稳定性越强,二者作用类似,C项正确;要将T4溶菌酶的异亮氨酸变为半胱氨酸,
只改变一个氨基酸,发生的是碱基的替换,两种氨基酸最接近的密码子是AUU和UGU,或AUC
和UGC,相差两个碱基,由于DNA是双链结构,故对应的D、A上的碱基至少要替换2个碱基
对,D项错误。
12.C基因控制蛋白质的合成,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造或合
成基因来完成,A项正确;酶①要在高温条件下延伸DNA,所以酶①为耐高温的DNA聚合酶,由图
可知,要得到两条链一样长的DNA单链,应选择弓I物2和弓物4,所以弓1物X和Y应该为引物2
和4,B项正确;由图可知,引物1和引物3存在互补配对片段,置于同一个反应系统时它他会发生
结合而失去作用,C项错误;图示的过程为重叠延伸PCR技术,利用重叠互补引物将两个不同的基
因拼接到一起,D项正确。
13.A对枯草杆菌蛋白酶进行改造通过基因来实现,A项错误;基因工程生产的蛋白质是自然界
已有的蛋白质,而蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子,两者的氨基酸序列不
同,B项正确;该蛋白酶中第188位丙氨酸替换为脯氨酸、第239位谷氮酰胺替换为精氨酸、第
262位缀氮酸替换为亮氨酸,结果发现该酶的催化活性大幅度提高,其原因可能是改变了蛋白酶
的空间结构,提高了酶与底物的亲和力,C项正确;对枯草杆菌蛋白酶进行分子设计应从预期的蛋
白酶功能出发,对蛋白酹的结构进行设计,D项正确。
14.D蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构,A项正确;因为基因指导蛋
白质的合成,所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现,B项正确;改造后的中华符具有新的性状,
但其和现有中华@孑之间没有生殖隔离,仍是同一物种C
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