病理技术(中级)历2026年真题解析专项试卷

病理技术(中级)历2026年真题解析专项试卷一、A1型题（单句型最佳选择题）1.在常规石蜡切片HE染色中，苏木精染液的主要作用是使细胞核着色，其属于何种性质的染料？A.酸性染料B.碱性染料C.中性染料D.两性染料E.复合染料2.病理技术中常用的10%中性缓冲福尔马林（NBF）固定液，其甲醛的浓度通常指的是体积百分比，而实际配制时，若使用37%-40%的市售甲醛溶液（福尔马林），配制1000ml10%中性缓冲福尔马林，需要加入市售甲醛的量是？A.100mlB.200mlC.250mlD.400mlE.50ml3.在脱水过程中，组织块从低浓度酒精向高浓度酒精移动时，若直接跳过中间浓度，会导致组织出现什么样的不良后果？A.脱水不彻底B.组织收缩过度C.组织硬化D.产生人为裂隙或收缩不均E.染色变淡4.下列关于免疫组化染色中抗原修复的叙述，错误的是？A.甲醛固定会导致抗原交联，影响抗体结合B.热诱导抗原修复（HIER）常用的缓冲液是柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）C.蛋白酶诱导抗原修复（PIER）主要用于细胞间质抗原的修复D.修复温度越高、时间越长，修复效果一定越好E.过度修复可能导致组织形态破坏或背景染色增加5.在常规石蜡包埋中，石蜡的熔点通常选择在多少度之间最为适宜？A.42℃-48℃B.52℃-58℃C.60℃-62℃D.65℃-70℃E.36℃-40℃6.下列哪种特殊染色主要用于显示基底膜，从而辅助诊断肿瘤的浸润程度？A.Masson三色染色法B.PAS染色法C.刚果红染色法D.网状纤维染色法E.维多利亚蓝染色法7.在病理显微镜检查中，物镜与盖玻片之间的介质通常是？A.空气B.水C.香柏油D.二甲苯E.甘油8.下列关于冷冻切片技术的描述，正确的是？A.冷冻切片主要适用于所有常规病理标本B.恒冷箱切片机的温度通常设定在-20℃至-25℃左右C.冷冻切片的厚度通常比石蜡切片厚，一般为8-10μmD.冷冻切片的细胞核染色效果通常优于石蜡切片E.冷冻切片不需要固定即可直接染色9.在细胞病理学涂片制作中，巴氏染色（Papanicolaoustain）主要用于？A.显示细胞内的糖原B.显示细胞内的脂质C.显示细胞核和细胞质的细微结构，用于宫颈癌筛查D.显示细菌和真菌E.显示结缔组织纤维10.病理技术中，为了防止组织在脱水过程中产生沉淀或硬化，组织块的大小应严格控制在？A.1.0cm×1.0cm×0.5cmB.1.5cm×1.5cm×0.3cmC.2.0cm×2.0cm×0.5cmD.3.0cm×3.0cm×1.0cmE.大小无严格要求，只要固定液足够即可11.下列哪种试剂在HE染色中作为“分化液”使用，用于去除细胞质中过多的苏木精？A.伊红YB.盐酸酒精C.氨水D.二甲苯E.乙醇12.在免疫组化非生物素法（如EnVision法）中，第二步孵育的通常是？A.一抗B.二抗C.三抗D.标记有HRP的多聚体抗抗体E.DAB显色液13.网状纤维染色常用的金属盐媒染剂是？A.硫酸铝钾B.硝酸银C.醋酸铀D.氯化金E.硫酸铜14.计算显微镜的总放大倍数，公式为？A.目镜放大倍数×物镜放大倍数B.目镜放大倍数+物镜放大倍数C.目镜放大倍数×物镜放大倍数×镜筒系数D.物镜放大倍数/目镜放大倍数E.目镜放大倍数×数值孔径15.下列关于脱钙的描述，错误的是？A.脱钙前必须将组织固定好B.常用的脱钙剂有硝酸、盐酸、EDTA等C.EDTA脱钙虽然慢，但对组织形态和抗原保存最好D.脱钙终点判断可以通过针刺法或化学法E.盐酸脱钙液对组织损伤最小，适用于所有免疫组化检测16.在病理实验室质量控制中，HE染色切片细胞核应呈现的颜色是？A.红色B.蓝色C.黄色D.紫色E.绿色17.为了消除内源性过氧化物酶对免疫组化染色的干扰，通常使用哪种溶液处理切片？A.甲醇-双氧水B.正常山羊血清C.TritonX-100D.柠檬酸盐缓冲液E.PBS缓冲液18.刚果红染色用于显示淀粉样物质，在偏振光显微镜下观察，淀粉样物质呈现？A.红色B.绿色C.蓝色D.苹果绿双折射E.黄色19.在石蜡切片制作过程中，透明步骤使用的试剂通常是？A.乙醇B.甲醛C.二甲苯D.丙酮E.苯20.下列哪种情况通常会导致切片出现“气泡”？A.蜡块温度过低B.蜡块温度过高C.展片水温过低D.展片水温过高E.切片刀过钝21.免疫荧光技术中，常用的荧光素FITC激发后产生的荧光颜色是？A.红色B.绿色C.蓝色D.黄色E.紫色22.在常规病理技术中，为了加速脱水过程，有时会加入？A.苯B.氯仿C.正丁醇D.丙酮E.冰醋酸23.Masson三色染色结果中，胶原纤维通常被染成？A.红色B.蓝色C.绿色D.黄色E.黑色24.关于病理切片档案管理，下列说法不正确的是？A.切片应按编号顺序归档B.借阅切片必须办理登记手续C.蜡块可以永久保存，无需特殊条件D.陈旧蜡块重新切片前应先软化E.数字化病理切片是未来的发展趋势25.下列哪项不是引起HE染色切片“脱片”的常见原因？A.载玻片未清洗干净B.载玻片未涂粘片剂C.烤片温度过低或时间过短D.二甲苯透明时间过长E.组织脱水过度二、A2型题（病历摘要型最佳选择题）26.一名技术员在处理一组淋巴结活检标本时，发现脱水机内的95%酒精溶液变得浑浊，且有异味。这提示最可能发生了什么情况，以及如何处理？A.酒精挥发，应补充新酒精B.酒精被水污染，应更换酒精C.组织块过大，导致脂肪溶解，应更换酒精并修剪组织D.酒精氧化，应加入抗氧化剂E.机器故障，应立即停机维修27.某病理实验室在进行乳腺癌ER（雌激素受体）免疫组化染色时，阳性对照细胞核着色清晰，但患者切片细胞核完全不着色，仅背景较深。下列哪项是最可能的原因？A.一抗浓度过高B.抗原修复时间不足C.封闭血清未加D.DAB显色时间过长E.二抗种属错误28.一位新入职的技术员在制作肝脏穿刺切片时，镜下发现肝细胞内出现大量大小不一的圆形空泡，苏木精着色浅。经询问，他在固定时使用了高浓度的甲醛。这种人为改变最可能是？A.脂肪变性B.糖原溶解C.固定假象（福尔马林色素）D.固定过度导致的人工空泡E.水肿29.在进行胃黏膜活检标本的HE染色中，发现切片上有大量黑色细微颗粒沉着，遮盖了组织结构，影响诊断。这种污染物最可能是？A.苏木精沉淀B.福尔马林色素C.汞色素D.伊红沉淀E.切片刀碎屑30.某实验室收到一例骨肿瘤标本，需要进行脱钙处理。为了后续进行多种免疫组化标记（如CK、Vimentin等），应首选哪种脱钙方法？A.10%硝酸脱钙B.5%盐酸脱钙C.10%盐酸甲酸脱钙D.10%-14%EDTA脱钙（pH7.2-7.4）E.5%三氯乙酸脱钙31.技术员在冷冻切片术中，切片卷曲成筒状，无法展平。下列哪项不是导致此现象的常见原因？A.切片刀角度过大B.组织块冷冻过度C.切片刀钝了D.抗冻板温度过低E.组织块内部有钙化32.在进行PAS（过碘酸-雪夫）染色显示糖原时，阳性物质应呈红色。但某次实验中，切片全片呈弥漫性红色，无法区分组织结构。最可能的原因是？A.氧化剂过碘酸作用时间过长B.Schiff试剂失效C.脱水不彻底D.组织内糖原含量过高E.透明时间过长33.一位病理医生在显微镜下观察一张HE切片，发现细胞核呈红色，细胞质呈蓝色。这说明染色过程中出现了什么错误？A.苏木精染色时间过短B.分化过度C.蓝化不足D.伊红浓度过低E.脱水透明不当34.某实验室在进行免疫组化批量染色时，发现所有切片的边缘区域均呈现深褐色环，而中心区域染色正常。这种“边缘效应”最可能的原因是？A.孵育盒未加盖，导致边缘液体蒸发B.显色不均匀C.抗体浓度过高D.组织边缘抗原丰富E.洗涤不充分35.在制备细胞学涂片时，如果涂片过厚，固定不及时，最可能导致的人工假象是？A.细胞重叠，结构不清B.细胞退化变性C.染色过深D.细胞肿胀E.出现假阳性三、B型题（共用备选答案单选题）（36-40题共用备选答案）A.甲醇B.冰醋酸C.苦味酸D.锇酸E.戊二醛36.常用于固定电镜超微结构标本，能良好保存微细结构的固定剂是？37.属于强氧化剂，固定效果好且能固定脂肪，但价格昂贵且有毒的固定剂是？38.在Bouin固定液中，起到收缩组织作用的成分是？39.在Carnoy固定液中，起到渗透作用强、能沉淀核酸和糖原的成分是？40.常用于血液涂片固定的挥发性溶剂是？（41-45题共用备选答案）A.苏木精B.伊红C.丽春红D.苯胺蓝E.苏丹III41.HE染色中，使细胞质和肌纤维等成分着红色的染料是？42.Masson三色染色中，使胶原纤维着蓝色的染料是？43.属于脂肪染色染料，能将中性脂肪染成橘黄色的是？44.HE染色中，属于碱性染料，使细胞核着蓝色的染料是？45.Ponceaude染色（如改良Masson）中，常用于显示肌纤维和红细胞红色的染料是？四、X型题（多项选择题）46.下列关于病理技术中常用封固剂的叙述，正确的有？A.中性树胶是石蜡切片最常用的封固剂B.水溶性封固剂用于荧光染色或不耐有机溶剂的染色C.甘油明胶常用于冷冻切片的封固D.加拿大树胶折光率与玻璃相近，封固效果清晰E.封固剂折射率越高，分辨率越好47.造成石蜡切片出现“碎裂”或“断裂”的原因包括？A.组织脱水不彻底B.组织透明不彻底C.蜡块过硬或过软D.切片刀有缺口E.室温过低48.免疫组化染色中出现“非特异性背景染色”的常见原因有？A.内源性生物素活性未阻断B.一抗或二抗浓度过高C.孵育时间过长D.血清封闭不充分E.PBS洗涤不充分49.下列哪些染色属于“结缔组织染色”范畴？A.VanGieson染色法B.Mallory三色染色法C.普鲁士蓝染色法D.Movat五色染色法E.抗酸染色法50.病理实验室的生物安全防护措施主要包括？A.所有标本均视为潜在感染源B.处理标本时必须佩戴手套、口罩和实验服C.废弃标本和试剂需按医疗废物分类处理D.福尔马林固定液挥发的气体对人体无害，无需特殊通风E.发生标本液喷溅时，应立即冲洗并消毒51.关于苏木精染液的配制和成熟，正确的说法是？A.苏木精是氧化染料，必须氧化成熟后才能使用B.自然氧化成熟需要较长时间（数周至数月）C.可以加入氧化剂（如氧化汞、过氧化钠）促使其快速成熟D.成熟的苏木精染液表面应有金属光泽的氧化膜E.苏木精染液配制后即可立即使用，无需氧化52.在常规HE染色中，导致细胞核着色过浅（淡染）的可能原因有？A.苏木精染液使用时间过长，效力减弱B.分化液（盐酸酒精）作用时间过长C.蓝化液（氨水）作用时间不足D.组织固定时间过短，固定不良E.脱水透明过程中酒精浓度过高53.下列关于病理大体标本取材的注意事项，正确的有？A.取材时应详细描述标本的大小、形状、颜色、质地等B.切取组织块应包括病变区域及周围正常的交界组织C.有包膜的肿瘤应尽量保持包膜完整D.切取组织块时，应避免挤压组织，以免造成人为假象E.所有标本取材后均可直接丢弃，无需保留54.数字病理扫描仪的优点包括？A.便于远程会诊和教学B.切片可永久数字化保存，避免物理切片褪色破损C.可以进行图像定量分析D.完全替代传统显微镜，无需人工复核E.标签管理更加高效55.遇到组织切片难以展平的情况，可以采取的措施有？A.提高展片水槽的水温B.在水槽中滴加少量乙醇C.使用无水乙醇作为展片介质D.调整切片刀的角度E.延长组织在脱水缸中的时间五、计算与综合分析题56.某病理实验室需要配制1000毫升的Harris苏木精染液，配方如下：苏木精5g，无水乙醇50ml，硫酸铝钾（钾明矾）100g，蒸馏水1000ml，氧化汞2.5g。(1)请计算该染液中钾明矾的质量体积百分比浓度（%）。(2)在配制过程中，苏木精先溶解于无水乙醇中，此步骤的目的是什么？(3)氧化汞在染液中的作用是什么？57.某技术员在脱水机中设置酒精梯度脱水，现有95%酒精500ml，想要将其配制成75%的酒精1000ml，请计算需要加入多少毫升的蒸馏水？（假设体积可加和，忽略混合体积微小变化，列出计算公式并计算结果）。58.病例分析：患者男性，55岁，因“右下腹疼痛3天”入院。行阑尾切除术，手术标本送病理检查。大体检查：阑尾一段，长6cm，直径0.8cm，表面充血肿胀，可见脓苔。切面：管壁增厚，腔内可见脓性渗出物。镜下观察：技术员制备的HE切片显示阑尾各层结构尚存，黏膜部分缺损，可见大量中性粒细胞浸润，肌层水肿，部分肌纤维断裂。毛细血管扩张充血。(1)请根据描述，该阑尾标本的固定首选哪种固定液？为什么？(2)在HE染色中，中性粒细胞的颗粒应呈现什么颜色？细胞核呈现什么颜色？(3)如果需要进一步显示阑尾壁内的胶原纤维破坏情况，建议采用哪种特殊染色法？并简述其原理。(4)若怀疑该病例有特殊病原体感染（如真菌），应采用什么染色方法进行初筛？59.某实验室在进行免疫组化质控时，使用乳腺癌组织芯片检测HER2（4B5）。(1)HER2阳性信号定位在细胞的什么部位？(2)若显微镜下观察到癌细胞膜呈现完整的、强棕黄色着色，且阳性细胞数>10%，根据ASCO/CAP指南，这通常判读为哪个等级（+、++、+++）？(3)在此实验中，如果使用多聚赖氨酸（Poly-L-Lysine）处理载玻片，其目的是什么？(4)简述EnVision二步法的基本原理。60.某技术员在制作冷冻切片时遇到困难，切片厚度设置为6μm，但切片总是呈白色粉末状，无法成片。(1)这种现象最可能的原因是什么？(2)应如何调整切片机温度或组织块温度来解决问题？(3)除了温度原因，还有哪些因素可能导致冷冻切片无法成片？（列举至少两点）答案与解析1.【答案】B【解析】苏木精是一种碱性染料（其阳离子部分有色），细胞核中的核酸（DNA、RNA）和蛋白质中含有酸性基团，两者结合形成盐，从而使细胞核着色。伊红是酸性染料，使细胞质着色。2.【答案】A【解析】“10%中性缓冲福尔马林”指的是甲醛终浓度为4%（注：病理学术语中常将4%甲醛溶液称为10%福尔马林，因为市售福尔马林约为37%-40%甲醛饱和溶液，取其1/10即约为4%甲醛浓度）。但在实际操作习惯中，配制“10%福尔马林”通常指取100ml市售福尔马林（37-40%）加900ml水（及缓冲盐）。若严格指代甲醛浓度，则应取约100ml-110ml。但在病理技术常规考试中，通常将“10%福尔马林”理解为体积比1:9稀释，即取100ml市售原液。题目问“10%中性缓冲福尔马林”，按常规配制比例，取100ml市售福尔马林加入900ml缓冲液中。3.【答案】D【解析】脱水必须遵循梯度原则。若浓度梯度过大，组织内部的水分与高浓度酒精交换过快，会导致组织表面迅速硬化而内部水分未脱除，引起组织收缩不均、内部产生裂隙或空洞。4.【答案】D【解析】抗原修复是为了打破甲醛固定产生的亚甲基桥。热修复（HIER）常用柠檬酸或EDTA。酶修复（PIER）常用于细胞间质。修复并非时间越长越好，过度加热会导致组织结构破坏、抗原丢失或背景增加。5.【答案】B【解析】常规石蜡包埋使用的石蜡熔点一般在52℃-58℃之间。熔点过低，环境温度稍高时切片易粘连；熔点过高，组织易硬脆，切片易碎裂。6.【答案】B【解析】PAS染色（过碘酸-雪夫反应）能显示糖原、黏液、基底膜等含多糖的物质。在肿瘤病理中，常用于显示基底膜的完整性，以判断癌是否突破基底膜发生浸润。7.【答案】C【解析】使用油镜（100倍物镜）时，为了增加分辨率和数值孔径，需在物镜与盖玻片之间滴加香柏油，其折射率（n=1.515）与玻璃相近，减少了光线的折射。8.【答案】B【解析】冷冻切片主要用于术中快速诊断。恒冷箱温度通常设在-20℃至-25℃。冷冻切片厚度一般比石蜡厚，约4-8μm（常规石蜡3-5μm）。冷冻切片细胞核结构不如石蜡清晰，但能较好保存脂质和酶活性。冷冻切片通常需要固定（如丙酮或甲醛）后染色。9.【答案】C【解析】巴氏染色是宫颈涂片及脱落细胞学检查的金标准染色法，能清晰显示细胞核和细胞质的细微结构，区分角化前、角化及不全角化细胞。10.【答案】B【解析】组织块过大，固定液无法穿透中心，导致内部自溶，且脱水、透明剂也无法有效进入，造成处理不均。一般要求最大不超过1.5cm×1.5cm×0.3cm-0.4cm。11.【答案】B【解析】分化是利用酸酒精（盐酸+乙醇）或酸性溶液，去除组织吸附过多的苏木精，使核质着色分明。盐酸酒精是HE染色中最常用的分化液。12.【答案】D【解析】EnVision法（又称二步法或聚合物法）是在一抗孵育后，使用一种带有多个酶分子（HRP或AP）和二抗分子的聚合物复合物进行孵育，因此第二步即是这种多聚体抗抗体。13.【答案】B【解析】网状纤维染色（如Gordon-Sweets法）利用银离子与网状纤维结合，经还原后呈黑色。硝酸银是主要的银染液和媒染剂。14.【答案】A【解析】显微镜总放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数。镜筒系数通常为1，除非有特殊中间放大系统。15.【答案】E【解析】盐酸类脱钙剂（如盐酸、硝酸）对组织形态损伤大，且破坏抗原活性，不利于后续免疫组化。EDTA是螯合剂脱钙，对形态和抗原保存最好，虽然速度慢。16.【答案】B【解析】HE染色标准：细胞核呈蓝色，细胞质、肌肉、红细胞等呈红色。17.【答案】A【解析】大多数组织（尤其是红细胞、粒细胞）含有内源性过氧化物酶，能与DAB-H2O2反应产生沉淀，造成假阳性。使用甲醇-双氧水（0.3%-3%）孵育可破坏该酶活性。18.【答案】D【解析】刚果红染色淀粉样物质呈橙红色，但在偏振光显微镜下，由于淀粉样蛋白纤维的有序排列，呈现特征性的苹果绿色双折射。19.【答案】C【解析】透明是为了置换出组织中的酒精，并使组织透明，便于石蜡浸入。最常用的透明剂是二甲苯。二甲苯既能与酒精混溶，又能溶解石蜡。20.【答案】D【解析】切片出现气泡通常是因为展片水温过高，导致蜡片瞬间熔化过度或蜡片与玻片之间气体未排出。水温过低则蜡片无法展平，呈皱缩状。21.【答案】B【解析】FITC（异硫氰酸荧光素）是异硫氰酸荧光黄，在激发光激发下呈现黄绿色荧光。TRITC呈红色荧光。22.【答案】C【解析】正丁醇常被加入高浓度酒精或作为透明剂前的过渡试剂，因为它对组织的收缩作用较小，且能加速脱水过程，同时兼具一定的透明能力。23.【答案】B【解析】经典Masson三色染色结果：胶原纤维呈蓝色，肌纤维、红细胞及细胞质呈红色，细胞核呈蓝黑色。24.【答案】C【解析】蜡块虽然可以长期保存，但并非无需条件。蜡块应避免高温（导致蜡熔化变形）和低温（导致蜡碎裂），且需防尘、防潮。C选项“无需特殊条件”说法错误。25.【答案】E【解析】脱片原因：玻片脏、无粘片剂、烤片不够（蜡未熔融粘附）、组织处理不好（脱水不佳）、水洗时水流过大等。脱水过度主要导致组织硬脆，切片碎裂，而非脱片。透明时间过长通常导致组织脆裂。26.【答案】C【解析】淋巴结、脂肪组织等富含脂质的组织，在95%酒精中，脂肪会被溶解出来，导致酒精变浑浊（呈乳白色）。这是正常现象，但若异味重，说明组织腐败或污染。常规处理是更换酒精并确保组织块不要过大，或者先处理脂肪。27.【答案】B【解析】阳性对照好，说明试剂系统和步骤基本正常。患者切片核不着色，最可能是抗原决定簇被掩盖未暴露。背景深，可能由非特异性吸附引起，但核不着色且背景深，也提示抗体浓度可能不匹配，但结合“阳性对照好”，最直接指向患者切片的抗原修复不足（修复不足导致抗体无法结合，但非特异性背景可能因二抗等原因存在）。此外，若一抗漏加也会导致此结果，但B选项中抗原修复不足是技术质控中常见原因。注意：若二抗种属错误，阳性对照通常也会失败。28.【答案】D【解析】高浓度甲醛导致组织表面迅速固定形成硬壳，内部固定液渗透慢，造成固定不均匀，加上渗透压变化，易在细胞内形成圆形空泡（人工假象），并非真正的脂肪变性（脂肪需用脂肪染色证实）或糖原溶解。29.【答案】B【解析】黑色细微颗粒沉着，常见于使用酸性福尔马林（未缓冲）或血液丰富的标本，产生福尔马林色素（甲醛与血红蛋白反应产物）。它不溶于酒精，溶于碱性酒精或苦味酸。30.【答案】D【解析】骨组织脱钙。酸类脱钙（硝酸、盐酸）对蛋白质和抗原破坏严重，影响免疫组化。EDTA脱钙虽慢，但属于温和螯合脱钙，最大程度保护抗原和组织形态，是首选。31.【答案】E【解析】冷冻切片卷曲原因：刀背与组织面角度不合适（过大或过小）、刀钝、组织块冷冻不均匀（表面软内部硬）或温度不当。钙化会导致切片破碎，而非卷曲。抗冻板温度过低可能导致组织块与刀粘附或碎裂。32.【答案】A【解析】PAS染色中，过碘酸氧化多糖中的乙二醇为醛基。若过碘酸作用过强或时间过长，会氧化非目标物质或产生过多醛基，导致背景过高，全片呈红色。33.【答案】C【解析】细胞核红、细胞质蓝，这是典型的“红蓝颠倒”。在HE染色中，苏木精（碱性）染核蓝，伊红（酸性）染质红。若核红质蓝，说明核没有被苏木精着色，反而被伊红着色，或者苏木精染色后分化过度被完全洗掉，只剩下伊红。但题目描述“细胞质呈蓝色”，说明细胞质染上了苏木精。这通常是因为蓝化不足（或未蓝化），苏木精在酸性分化液后处于红色离子状态，未返蓝恢复蓝色，且后续分化过度导致核褪色，而细胞质吸附少量苏木精未褪去且未蓝化，呈现红色/淡红色？不对，更准确的分析是：正常核蓝质红。若核红质蓝，极有可能是染料搞反了（误将核染料当质染料用，罕见）或者染色步骤颠倒。但在考试中，这种情况最常见的原因是蓝化不足。苏木精在酸性环境中是红色的，在碱性环境中是蓝色的。如果分化后没有在碱性水（弱氨水或自来水）中充分蓝化，细胞核会呈现红色或棕红色。至于细胞质呈蓝色，可能是由于某种原因（如苏木精浓度过高且未分化干净）细胞质吸附了苏木精且发生了蓝化，但这比较矛盾。最符合“核红”这一特征的直接原因是蓝化不足。34.【答案】A【解析】边缘效应通常是由于孵育盒未加盖或湿盒内水分蒸发，导致边缘的液体浓度升高（抗体浓度相对升高）或干涸，从而染色加深。35.【答案】A【解析】涂片过厚，细胞重叠，导致结构不清，影响观察。固定不及时主要导致细胞退化变形。36.【答案】E【解析】戊二醛是双醛基固定剂，交联能力强，能极好地保存超微结构和蛋白质，是电镜固定的首选（常与多聚甲醛混合使用）。37.【答案】D【解析】锇酸（四氧化锇）是强氧化剂，能固定脂类（使脂类不被有机溶剂溶解，呈黑色），是电镜观察脂滴和膜结构的优良固定剂，但昂贵且有毒。38.【答案】C【解析】Bouin液由甲醛、苦味酸、冰醋酸组成。苦味酸有收缩作用，防止组织过度膨胀；冰醋酸有膨胀作用，防止组织收缩；甲醛固定。三者互补。39.【答案】A【解析】Carnoy液由无水乙醇、冰醋酸、氯仿（或甲醇）组成。无水乙醇渗透力强，能沉淀糖原和核酸，用于固定糖原和核酸。40.【答案】A【解析】甲醇挥发性强，固定迅速，常用于血液涂片或细胞涂片的快速固定。41.【答案】B【解析】伊红是酸性染料，使细胞质、红细胞、肌纤维等嗜碱性物质（实际上是酸性物质易结合阳离子染料，但习惯称嗜伊红）着红色。42.【答案】D【解析】Masson三色中，苯胺蓝（或亮绿）将胶原纤维染成蓝色。43.【答案】E【解析】苏丹III是脂溶性染料，能将中性脂肪染成橘黄色。44.【答案】A【解析】苏木精是碱性染料，使细胞核（嗜碱性物质）着蓝色。45.【答案】C【解析】丽春红（Ponceau）在多种三色染色中用于使肌纤维、红细胞等呈现红色。46.【答案】ABCD【解析】封固剂用于封片。中性树胶最常用。水溶性封固剂用于荧光等。甘油明胶用于冷冻。加拿大树胶折射率好。E选项错误，折射率应与玻璃（1.52）接近才清晰，并非越高越好，过高可能导致全反射或清晰度下降。47.【答案】ABCDE【解析】切片碎裂与组织处理（脱水、透明、浸蜡）各环节及切片技术（刀、蜡硬度、环境温度）均有关系。48.【答案】ABCDE【解析】非特异性染色原因众多：内源性生物素、抗体浓度过高、孵育过长、封闭不足、洗涤不足、组织坏死等。49.【答案】ABD【解析】VG、Mallory、Movat均为结缔组织多色染色。普鲁士蓝是铁染色。抗酸是细菌染色。50.【答案】ABCE【解析】福尔马林气体有毒，致癌，必须通风橱操作。其他选项均为标准生物安全措施。51.【答案】ABCD【解析】苏木精必须氧化为氧化苏木精（苏木红）才有染色能力。自然氧化慢，加氧化剂快。成熟后表面有氧化膜。E错误，未氧化无染色力。52.【答案】ABCD【解析】核淡染原因：染液失效、分化过度、蓝化不足（核偏红）、固定不良（核不着色）。E选项脱水过度通常导致组织硬脆，不影响核着色深浅（除非导致切片脱落）。53.【答案】ABCD【解析】取材应详细、带交界、保包膜、防挤压。E错误，标本必须按规定保留。54.【答案】ABCE【解析】数字病理便于会诊、保存、定量、管理。D错误，目前不能完全替代显微镜，仍需病理医生复核，且金标准仍是玻片。55.【答案】ABCD【解析】难展平原因：水温低（蜡未展）、水温高（蜡熔）、刀角度、蜡块过硬、组织脱水不佳等。提高水温可帮助展平（在一定范围内）。滴加乙醇降低表面张力也有助于展平。E选项延长脱水时间与展片无关。56.【答案】(1)10%。解析：质量体积百分比浓度=(溶质质量/溶液体积)×100%。即(100g/1000ml)×100%=10%。(2)助溶及防止氧化。解析：苏木精难溶于水，易溶于酒精。先用酒精溶解可使其充分溶解，且酒精具有防腐作用，有助于配制初期染液的稳定。(3)氧化剂。解析：氧化汞作为强氧化剂，使苏木精氧化为具有染色能力的氧化苏木精（苏木红），促使染液快速成熟。57.【答案】计算公式与结果：设需加入蒸馏水体积为ml。根据稀释前后溶质（纯酒精）量相等的原则：×其中：====实际上，