异基因造血干细胞移植后白血病复发患者临床及免疫细胞亚群特征分析

异基因造血干细胞移植后白血病复发患者临床及免疫细胞亚群特征分析探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSC回顾性队列研究。收集2021年4月1日至2023年12月31日北京陆道培医院收治的115例allo-HSCT白血病患者，其中复发患者26例，未复发患者89例。男性65例，女性50例，年龄为33(20,50)岁。采用流式细胞技术定期监测患者移植后外周血淋巴细胞亚群复发组患者中检测的意义。两组间比较采用x²检验。对单因素分析有统计学意义的指标再进行二元Logistic回归分析。结果与非复发组患者相比，复发组患者复发前外周血中总淋巴细胞 (458.5<1003个/μ1,U=1118.00,P=0.004)、B淋巴细胞(4<51个/μ1,U=687.00,P0.001)、T淋巴细胞(320.5<721个/μl,U=746.00,P=0.006)、CD4+T淋巴细胞(57<150个/μl,U=629.50,R0.001)、CD8+T淋巴细胞(240<468个/μ1,U=1150.00,P=0.017)、细胞计数(43<141个/μ1,U=245.50,P<0.001)、CD8+CD28+T细胞细胞占CD4+T细胞百分比(86.1<97.3%,U313.50,P=0.003)均更低，CD4+Treg细胞计数(2.5>8个/μl,U=635.00,P0.001)更高，显示AUC=0.724(>0.7,R0.01),临界值为66.89,敏感度0.733,特异度0.613。transplantation,allo-HSCT)供者来源T淋巴细胞及其它免疫细胞或免疫成分通过与肿瘤细胞表面抗原发生免疫应答而清除白血病¹。然而复发仍然是allo-HSCT后死亡的主要原因之一，根据国际骨髓移植登记组资料显示，非血缘和同胞全相合移植后复发相关死亡率高达40%~50%,我国单倍体一、对象回顾性队列研究，分析2021年4月1日至2023年12月31日期间在北京陆道培医院接受allo-HSCT白血病患者115例病历资料，其中移植后未复发患者89例，复发患者26例。包括急性髓系白血病95例，急性淋巴细胞白血病20例。男性65例，女性50例，年龄为33(20,50)岁。移植前病史328(67,729)d,随访时间184(227,651)d,移植后复发时间123(88,185)d,复发后死亡时间52(51,141)d。随访截至2024年3月31日，采用电话随访或查阅门诊/住二、入组标准及相关疾病诊断标准1.急性髓系白血病和急性淋分型标准定义4]。病专家共识(Ⅱ)——移植后白血病复发(2016年版)]定义，按主病(graft-versus-hostdisease,GVHD):根据2020年版美国国 的管理方法定义[5,分为急性移植物抗宿主病(acutegraftversus三、方法(一)仪器、试剂与软件3激光10色BDcantoplus流式细胞仪(美国碧迪公司);获取、分析软件为Diva8.0.2软件 (美国碧迪公司);抗体试剂均为美国碧迪公司产品，溶血素(10倍浓缩),绝对技术管(美国碧迪公司)。(二)流式细胞术淋巴细胞精细亚群检测方案入组患者在造血干细胞移植后6个月内至少每2周检测1次外周血淋巴细胞亚群，之后至少每4周检测1次外周血淋巴细胞亚群。对于连续监测免疫细胞亚群的(三)标本处理制备单细胞悬液：按照说明书推荐方法进行多荧绝对计数管：各试管加入100μl细胞，依照说明书加入荧光抗体，充分混匀后常温避光孵育15min,加入500μl稀释后的1×溶血素，混匀后室温避光孵育10min,上机检测。普通流试管：各试管加入1×10⁶个细胞数，再加入3~20μl不同荧光素标记的抗体，充分混匀后常温避光孵育15min,加入3ml稀释后的1×溶血素，混匀后室温避光孵育10min,300×g离心5min去上清，加入3ml磷酸盐缓冲液混匀，离心洗涤，加入0.5ml磷酸盐缓冲液重悬上机检测。最低收获10万个细胞。四、统计学分析用SPSS25.0统计软件进行数据分析。计量资料两组比较采用Mann-WhitneyU检验；计数资料以例(%)表示，两组间比较采用x²检验。对单因素分析有统计学意义的指标再进行二characteristic,ROC)曲线。不同结局下各单因素的生存曲线采用Kaplan-Meier法，Log-rank检验。双侧检验，结果一、临床资料入组115例allo-HSCT患者，非复发组患者随访时间87.6%(78/89),2年OS与随访终点OS均为87.6%(78/89),复发组患者随访时间176.75(74.5,314)d,1年OS为57.6%(15/26),2年0S与随访终点OS均为53.8%(14/26)。两组随访时间以及随访终点OS上差异均有统计学意义(x²=-3.结局-生存/死亡(例)移植前疾病状态(例，CR/NR)移植类型(例)同胞全合707预处理(例，BU/TBI)ATG(例，rATG/ATLG)aGVHD(轻度/重度)cGVHD(局限型/广泛型)回输移植物计数M(Q,Q₃)aGVHD为急性移植物抗宿主病，cGVHD为慢性移植物抗宿二、非复发组与复发组复发前外周血免疫细胞亚群分析将表2中两组间有组间差异的因素，纳入二元Logistic回归分析进行单因 0.99),P=0.046]为复发危险因素。再将单因素有意义的组别进一P=0.019]。将多因素Logistic回归分析有意义的组别进一步进行AUC=0.724,P0.01,决断值为66.89,灵敏度=0.733,特异性=0.613(图1)。表