CN116606285B 一种基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针及其制备方法和应用 （河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所）

Wood,ChristopherJ.等.Red-AbsCationicAcceptorDyesforPhot一种基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探本发明属于化学检测领域，涉及荧光探针，特别是指一种基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针及其制备方法和应用。其具有如下结构光探针能够在两种不同的激发波长下分别对二体中二氧化硫和粘度成像的能力。探针BDI能够实现线粒体功能障碍和凋亡过程中对细胞内SO22。3.根据权利要求2所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针的制备方法，其特征4.根据权利要求2或3所述的基于三苯胺基和吲哚衍生5.根据权利要求4所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针的制备方法，其特征6.根据权利要求5所述的基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针的制备方法，其特征7.根据权利要求2、3、5或6中的任一项所8.权利要求1所述的荧光探针在制备二氧化硫和粘度双识别9.权利要求1所述的荧光探针在特异性识别酒水10.权利要求1所述的荧光探针在非疾病诊断和治疗为目的识别二氧化硫和粘度的应3[0002]二氧化硫(SO2)是一种广泛存在于空气中的有毒环境污染物，主要由石化燃料燃硫或者粘度的荧光探针被报道，粘度探针主要是基于分子转子如菁(Cy)、硼二吡咯烷的荧光探针，该探针在检测粘度和检测SO2应用中采用的激发波长均为405nm检测波长范4。。[0013]本申请制备的荧光探针能够在两种不同的激发波长下分别对二氧化硫和粘度进探针结构中的双键发生迈克尔加成反应生成新的产物BDI_SO2实现了对二氧化硫的专一性5度诱导线粒体功能障碍期间引发的内源性SO2浓度[0023]1、本申请的荧光探针能够在两种不同的激发波长下分别对二氧化硫和粘度进行增大，探针BDI在730nm处的荧光发射强度也不断增强，且二者关系完美符合Forster_迈克尔加成反应生成新的产物BDI_SO2实现了对二氧化硫的专一性选择，其识别机理通过[0025]3、本发明提出的一种基于三苯胺基和吲哚衍生物的荧光探针与粘度响应后其发功能障碍和凋亡过程中对细胞内SO2和粘度的可视化成像，可被视为一种快速响应的显色6[0030]图4为本发明的荧光探针BDI识别二氧化硫的荧光选择性曲线图，激发波长360[0031]图5为本发明的荧光探针BDI识别二氧化硫的荧光抗干扰性图，[0040]图14为本发明的荧光探针BDI在低粘度溶液中不同温度下荧光图，激发波长585[0041]图15为本发明的荧光探针BDI在高粘度溶液中不同温度下荧光图，激发波长585[0043]图17为本发明的荧光探针BDI识别二氧化硫前后的溶液365nm荧光灯下颜色变化[0044]图18为本发明的荧光探针BDI识别二氧化硫后的机理验证高分辨质谱图（负离子[0045]图19为本发明的荧光探针BDI在生物活细胞中与商业化绿色线粒体染料共定位成[0046]图20为本发明的荧光探针BDI在生物活细胞中对外源性和内源性二氧化硫及生物7自阿拉丁试剂有限公司和阿达玛斯试剂有限公司。在荧光探针BDI的结构确证和分析性能[0056]高分辨质谱测定：HR一ESI一MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found8[0064]高分辨质谱测定：HR一ESI一MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found9[0072]高分辨质谱测定：HR_ESI_MScalcdforC41H34BrN2S+:587.2515,found[0076]荧光探针要能实现对被检测物种的单一识别，因此需要测试探针BDI对不同活性入Na2SO3_4322CO33_[0078]为了考察探针BDI在复杂环境中响应二氧化硫时的抗干扰能力，用荧光发射光谱测试了其他活性小分子。探针BDI荧光干扰性实验测试溶液为Tris_CH3CN（10mM,pH=_410当量的nm处荧光发射强度增强幅度较小，这主要是由于在水溶液体系中S2_易与SO32_发生归中反_针BDI浓度固定为10μM，调整溶液中Na2SO3浓度（0μM探针BDI对二氧化硫的荧光动力学。探针BDI最低检出限实验测试溶液为Tris一CH3CN（10Na2SO3[0086]为了考察不同极性对于探针BDI对于粘度识别的影响，采用荧光发射光谱对不同[0088]由于探针BDI分子中具有典型的粘度响应转子（三苯胺基团因此考察了其粘度具有清除过量ROS以维持细胞氧化还原平衡的功能，并最终导致SO2水平随粘度增加而增加。在此开展了探针BDI应用于外源性和内源性SO2以及粘度成像实验（附图20具体实验实验结果表明探针BDI能够实现线粒体功能障碍和凋亡过程中对细胞内SO2和粘度的可视