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文档简介
2026年实验动物疫病筛查试题附答案1.单项选择题,每题2分,共30分(1)根据GB14926-2023《实验动物微生物学等级及监测》最新标准,我国普通级大鼠、小鼠繁育群体应当强制筛查排除的病原不包含下列哪一项()A.鼠伤寒沙门菌B.刚地弓形虫C.仙台病毒D.淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒答案:C。解析:GB14926-2023中明确规定,普通级大鼠、小鼠的必筛病原包含细菌类的鼠伤寒沙门菌、单核细胞增生李斯特菌等,寄生虫类的刚地弓形虫,病毒类的淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒;仙台病毒属于清洁级及以上等级大鼠小鼠需要额外筛查排除的病原,普通级无强制要求,因此选C。(2)实验动物疫病群体筛查时,按照95%置信水平的要求,当群体总规模N大于100只时,最低抽样数量应当为()A.不少于5只B.不少于10只C.不少于20只D.不少于50只答案:C。解析:我国实验动物疫病监测抽样规范明确,当群体规模N≤10只时全抽,10<N≤100只时抽样不少于10只,N>100只时抽样不少于20只,可满足95%置信水平下检出阳性群体的要求,因此选C。(3)下列哪一种病原属于我国规定的实验动物一类疫病病原,也是非人灵长类实验动物引种时必须筛查的首要病原()A.结核分枝杆菌B.猴B病毒C.志贺菌D.贝氏等孢球虫答案:B。解析:猴B病毒属于人兽共患一类实验动物疫病,对人类致死率极高,所有引进的非人灵长类都必须逐只筛查猴B病毒,阳性个体必须扑杀无害化处理,因此选B。(4)实验动物繁育场所的核心种用群体,疫病筛查的最低频率要求为()A.每季度1次B.每半年1次C.每年1次D.每2年1次答案:B。解析:根据《实验动物许可证管理办法》2024年修订版要求,核心种用群体每半年至少开展一次全项目疫病筛查,生产群每年至少筛查一次,因此选B。(5)针对大规模群体血清学筛查,哪种方法兼具灵敏度高、操作简便、成本低廉的特点,适合批量样本的初筛()A.酶联免疫吸附试验(ELISA)B.病毒分离鉴定C.全基因组测序D.病理组织切片观察答案:A。解析:ELISA法可实现自动化操作,对设备要求较低,一次可处理上百份样本,检测成本低,灵敏度和特异性满足筛查要求,是血清学初筛的首选方法;病毒分离、全基因组测序成本高、周期长,病理观察无法用于早期筛查,因此选A。(6)下列哪种实验动物疫病属于人兽共患病,且普通级兔必须强制筛查排除()A.兔出血症病毒B.多杀性巴氏杆菌C.弓形虫D.球虫答案:C。解析:弓形虫是典型的人兽共患寄生虫病,可通过接触实验动物传播给人类,GB14926-2023明确要求普通级兔必须筛查弓形虫,阳性群体不得留用;兔出血症、多杀性巴氏杆菌、球虫不属于强制要求普通级兔排除的人兽共患病,因此选C。(7)屏障环境内SPF级动物群体开展疫病筛查采样时,不符合生物安全和操作规范的是()A.采样人员按照屏障系统进入流程更衣消毒B.采样器械提前高压灭菌,一鼠一换避免交叉污染C.采样后残留样本带出屏障后直接丢弃入生活垃圾D.采样结束后对采样区域进行彻底喷雾消毒答案:C。解析:SPF屏障系统内采集的动物样本可能携带未知病原,带出屏障后必须按照感染性样本处理要求进行高压灭菌或者消毒销毁,不得直接混入生活垃圾,因此选C。(8)犬源实验动物中,普通级犬必须强制筛查,阳性必须扑杀无害化处理的疫病是()A.犬细小病毒B.狂犬病病毒C.犬瘟热病毒D.弓形虫答案:B。解析:狂犬病属于致死率100%的人兽共患一类传染病,所有用于实验的犬只必须逐只筛查狂犬病病毒,任何个体检测阳性都必须扑杀无害化处理,不得留用,因此选B。(9)核酸扩增技术(PCR)用于实验动物疫病筛查时,假阳性结果最主要的来源是()A.样本核酸降解B.扩增产物交叉污染C.引物特异性差D.退火温度过高答案:B。解析:PCR检测灵敏度极高,即使微量的扩增产物交叉污染到新的反应体系中,也会被扩增出阳性结果,是日常筛查中假阳性最主要的来源,因此操作中要求分区处理样本、配置反应体系和扩增产物,因此选B。(10)当实验动物群体中发现疑似一类疫病阳性个体时,首先应当采取的措施是()A.立即扑杀所有群体成员,无害化处理B.将阳性个体隔离,对同群个体限制移动,上报当地实验动物管理部门和兽医主管部门C.立即对场地消毒,继续开展实验D.将阳性个体淘汰,同群正常使用答案:B。解析:发现疑似一类实验动物疫病后,第一时间应当隔离阳性个体,限制同群动物移动,上报主管部门开展确诊和流行病学调查,不得擅自处理,因此选B。(11)SPF级猪作为实验动物,必须筛查排除的重要人兽共患病病原是()A.猪瘟病毒B.猪繁殖与呼吸综合征病毒C.布鲁菌D.猪圆环病毒答案:C。解析:布鲁菌是典型的人兽共患病病原,可通过接触实验猪传播给实验人员,所有等级的实验用猪都必须筛查布鲁菌,阳性个体必须扑杀,因此选C。(12)近交系实验动物封闭群引种,为保障种群不携带疫病,最合理的筛查策略是()A.只筛查引入的第一窝幼崽B.只筛查引入的成年种鼠C.引入后隔离,间隔21天两次采样全筛,确认阴性后留种D.看供应商提供的报告,不用再次筛查答案:C。解析:近交系种源价值高,引入后必须隔离检疫,间隔一个潜伏期的两次筛查都阴性才能确认安全,供应商报告仅作参考,必须自行复检,因此选C。(13)下列哪种样本最适合用于实验动物病毒病的核酸筛查()A.粪便拭子B.血清或者脾脏组织C.皮毛样本D.粪便沉淀物答案:B。解析:病毒在感染动物体内主要存在于血液、脾脏等淋巴组织中,病毒载量高,因此血清和脾脏组织是病毒病核酸筛查最理想的样本,因此选B。(14)实验动物疫病筛查中,外源性病原污染细胞导致的动物感染,最常见的情况是()A.小鼠白血病病毒污染肿瘤细胞,接种后感染小鼠B.沙门菌污染细胞导致猪感染C.弓形虫污染细胞导致猴感染D.结核分枝杆菌污染细胞导致犬感染答案:A。解析:小鼠白血病病毒可通过肿瘤细胞传代长期潜伏,接种到实验小鼠后导致感染,是肿瘤学实验中最常见的外源性病原污染情况,也是实验小鼠疫病筛查中需要重点关注的输入性风险,因此选A。(15)根据我国生物安全法要求,高致病性病原微生物实验用感染动物筛查后的阳性样本处理要求是()A.常温保存备用B.高压灭菌后无害化处理C.冷藏保存,实验结束后丢弃D.邮寄给研究机构保存答案:B。解析:高致病性病原微生物阳性样本属于感染性废物,必须经过高压灭菌灭活后才能进行无害化处理,不得随意丢弃或者保存,因此选B。2.多项选择题,每题4分,共20分,多选、少选、错选均不得分(1)下列哪些情况必须对实验动物开展应急疫病筛查()A.从外地引入新种源进入繁育场前B.实验动物群体出现不明原因死亡、流产等异常发病情况时C.实验动物调运出本单位,供其他机构使用前D.屏障系统设施消毒灭菌后,引入第一批动物前答案:ABCD。解析:上述四种情况都存在疫病传播风险,引入新种源、出现异常发病、跨单位调运、新设施启用引入第一批动物,都必须开展疫病筛查排除风险,因此四项全选。(2)SPF级实验动物的疫病筛查必检项目包含下列哪些类别()A.人兽共患病病原B.对动物自身致病性强、影响实验结果的病原C.所有外源性病病原D.垂直传播的病原答案:ABD。解析:SPF级实验动物是指不存在特定的病原,即排除人兽共患病、影响动物健康和实验结果、可垂直传播的指定病原,并非排除所有外源性病原体,自然界中很多低致病性非特定病原不影响实验,不需要全部排除,因此C错误,选ABD。(3)下列哪些采样方法不符合现行实验动物福利相关要求,属于疫病筛查中禁止使用的方法()A.未对实验动物实施局部麻醉,直接进行摘眼球采血采样B.对体重小于15g的未成年小鼠,一次性采集超过总血量20%的血样C.对需要安乐死的动物,实施二氧化碳吸入安乐死后再采样D.麻醉状态下经尾静脉采集符合量要求的血样答案:AB。解析:根据2024年我国发布的《实验动物福利伦理审查指南》,不经麻醉直接摘眼球采血属于伤害性采样,被明令禁止;未成年小鼠自身血量少,一次性采集超过15%总血量就会导致动物死亡或者严重痛苦,因此AB均不符合要求,选AB。(4)非人灵长类实验动物引种时必须逐只筛查的人兽共患病病原包括()A.猴B病毒B.猴痘病毒C.结核分枝杆菌D.登革病毒答案:ABCD。解析:上述四种病原均为人兽共患病,其中猴B病毒、猴痘病毒致死率高,结核分枝杆菌、登革病毒也可感染人类,近年来输入性非人灵长类携带上述病原的风险较高,因此引种时必须逐只全部筛查,四项全选。(5)下列关于实验动物疫病筛查结果的处理,正确的有()A.一类疫病阳性,全群扑杀无害化处理B.二类疫病阳性,可根据实际情况隔离处理,阴性个体继续留用C.普通级动物检出普通级要求排除的病原阳性,必须淘汰阳性个体D.SPF级动物检出指定病原阳性,必须彻底消毒设施,重新引种答案:ABCD。解析:上述四种处理方式均符合我国实验动物疫病防控相关规范,一类疫病危害极大,必须全群扑杀;二类疫病可分区处理,普通级和SPF级检出对应必须排除的病原,都必须按照规定淘汰阳性或者重新引种,因此四项全选。3.判断题,每题2分,共10分,正确打√,错误打×(1)普通级豚鼠必须筛查淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒,阳性群体不得用于实验。()答案:√。解析:淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒是人兽共患病,所有啮齿类实验动物普通级都必须排除,因此该说法正确。(2)SPF级实验动物只要引入前供应商提供了合格的疫病筛查报告,本单位不需要再次筛查就可以直接混群。()答案:×。解析:运输过程中可能存在污染风险,供应商报告仅作参考,引入单位必须隔离复检,确认阴性后才能混群,因此说法错误。(3)实验动物疫病筛查过程中,为了避免交叉感染,应当遵循先采样健康群体,后采样发病群体的顺序。()答案:√。解析:先健康后发病的采样顺序可以避免器械或者人员接触导致的健康群体被污染,因此说法正确。(4)PCR检测结果为阳性,就说明动物当前一定是活病毒感染,具有传染性。()答案:×。解析:PCR可以检出动物体内死亡病毒的核酸片段,无法区分活毒和死毒,因此阳性结果需要进一步通过病毒分离或者重复采样确认,不能直接判定为活毒感染,因此说法错误。(5)人兽共患病病原在实验动物中多呈隐性感染,不发病,但会感染实验人员,因此必须筛查。()答案:√。解析:多数实验动物携带的人兽共患病病原都呈隐性感染,动物本身不发病,但人类接触后会发病,因此必须强制筛查,说法正确。4.简答题,每题10分,共30分(1)简述实验动物疫病筛查中抽样的基本原则。答案:第一,随机抽样原则,抽样过程中应当避免主观选择,保证群体中每一个个体都有相同的概率被抽中,避免只挑健康个体不挑发病个体导致的漏检。第二,代表性原则,抽样应当覆盖群体中不同年龄段、不同笼位、不同批次的个体,不能仅抽样某一个区域的个体,保障样本能够反映整个群体的疫病感染情况。第三,符合置信水平的抽样量原则,根据群体规模大小确定抽样数量,满足95%置信水平下能够检出阳性群体的要求,不得随意减少抽样量。第四,分层抽样原则,对于不同风险等级的个体分层抽样,种用个体抽样比例高于生产用个体,引入的新群体抽样强度高于原有稳定群体,发病群体抽样比例高于健康群体。第五,可追溯原则,每一个被抽样的个体都应当做好标记,记录相关信息,方便阳性结果溯源和后续处理。(2)简述引入外地实验动物后疫病筛查与检疫的完整流程。答案:第一步,隔离准备,引入动物前提前准备好独立的隔离检疫区域,该区域与原有饲养区域完全物理隔离,有独立的通风系统和人员操作流程,避免交叉污染。第二步,进场隔离,引入动物进场后直接转入隔离区,不得进入原有饲养区域,啮齿类动物隔离检疫期为21天,犬猫兔为30天,非人灵长类为90天,隔离期间禁止随意转移动物。第三步,分阶段采样,隔离后第一周进行第一次采样,检测所有要求的筛查项目,隔离期满前一周(啮齿类为第21天左右)进行第二次采样,重复检测高风险病原;如果是批量引入的生产群,按照抽样规则抽样,种用引入则逐只采样。第四步,结果判定与处理,两次检测所有项目均为阴性的,方可解除隔离,转入生产或者实验区域;检出阳性的,按照疫病等级处理,一类阳性全群扑杀无害化处理,二类阳性扑杀阳性个体,同群阴性重复检测合格后方可留用。第五步,终末消毒,隔离检疫结束后,不管结果是否合格,都要对隔离区域和使用过的器械进行彻底消毒,无害化处理所有废弃物。(3)简述酶联免疫吸附试验(ELISA)用于实验动物疫病筛查的优缺点。答案:优点主要包括四个方面:第一,灵敏度高,最低可以检测到ng甚至pg级别的抗体或者抗原,能够检出早期感染和隐性感染的动物,满足筛查的灵敏度要求。第二,操作简便,适合大样本批量处理,目前已经实现自动化操作,一次可以处理96或者384个样本,适合大规模群体筛查,检测周期短,1-2天就可以出结果。第三,检测成本低,试剂价格低廉,对设备要求不高,仅需要酶标仪就可以读取结果,适合各类机构常规筛查使用。第四,特异性较好,针对常见实验动物疫病的商品化ELISA试剂盒特异性已经满足筛查要求,假阴性率较低。缺点主要包括三个方面:第一,存在一定的假阳性率,尤其是针对低流行率的病原,阳性预测值较低,阳性结果需要通过其他方法验证。第二,无法检测潜伏期早期的感染,感染后抗体转阳需要一周左右的窗口期,窗口期内检测会出现假阴性。第三,部分特殊病原没有商品化的ELISA试剂盒,无法开展检测,需要自行开发,适用性受限。5.案例分析题,共10分某省级新药评价机构2026年2月从外地某实验动物繁育中心引入120只SPF级C57BL/6J小鼠,用于抗肿瘤新药的长期毒性试验。机构为了赶试验进度,引入小鼠后仅核对了供应商提供的合格检测报告,没有隔离检疫就直接放入屏障系统内的饲养架,和原有100只留种种鼠放在同一个房间饲养。引入后第30天,原有种鼠群体中有22%的怀孕雌鼠发生流产,新生幼鼠死亡率达到35%,部分成年小鼠出现被毛粗乱、肝脏肿大、黄疸症状,剖检可见肝脏有多发性坏死病灶,试验动物死亡率持续上升,影响了试验进度。请结合上述案例回答以下问题:(1)推测最可能感染的疫病是什么,应当优先筛查哪些病原?(2)该机构的操作存在哪些违规问题?(3)简述后续正确的处理流程。答案:(1)根据发病症状,最可能是小鼠肝炎病毒感染,此外还需要优先筛查小鼠细小病毒(MVM)、仙台病毒、弓形虫四种病原。小鼠肝炎病毒是SPF级小鼠中最常见的输入
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