基因工程细胞工程胚胎工程

1、1、研究案例基因工程和克隆技术的核心术语(记忆、书写、理解、把握内涵和外延)1。基因工程(限制性内切酶、DNA连接酶、载体、靶基因、基因表达载体、农杆菌转化法、显微注射法、感受态细胞)2。蛋白质工程(预期功能、分子设计、DNA合成)3。植物细胞工程植物组织培养(去分化、再分化、愈伤组织、丛生芽)、植物体细胞杂交、杂交植物)4。动物细胞工程动物细胞培养(原代培养，传代培养，细胞系，细胞系)，动物细胞核移植，动物细胞融合(杂交细胞，单克隆抗体)，2。整合基因工程的相关知识，概述基因工程和蛋白质工程的基本操作流程，并思考以下问题。基因工程的基本操作过程：获得目标基因，构建基因表达载体，将目标基因导入

2、受体细胞，检测和鉴定目标基因。蛋白质工程的基本操作过程：蛋白质预期功能的三维结构、氨基酸序列的多肽链基因(DNA)、分子设计、DNA合成、3、(2)在基因工程的基本操作步骤中使用了哪些限制酶，它们的特点和来源是什么？还有哪些地方涉及互补碱基配对？限制性内切酶用于步骤1和2，需要相同的酶，以便产生相同的粘性末端；限制性内切酶主要是从原核生物中分离和纯化的，它能识别特定的核苷酸序列，并切断两个核苷酸之间的磷酸二酯键，产生粘性末端和平端；只有第三步是在没有碱基互补配对的情况下将目标基因导入受体细胞，其他三步包括碱基互补配对。如何构建基因表达载体？答案，5，(4)将目标基因导入受体细胞的常用方法？回答

3、植物细胞：农杆菌转化法；动物细胞：显微注射法；微生物：Ca2处理。(5)如何检测和鉴定目标基因的导入和表达？答：分子水平检测。插入检测：脱氧核糖核酸分子杂交技术，即使用放射性同位素标记的含有靶基因的脱氧核糖核酸片段作为探针进行检测。b、表达检测和个体生物学水平鉴定：对转基因生物进行抗昆虫或疾病的接种实验。转录检测：分子杂交，即靶基因与mRNA的杂交和翻译检测：抗原抗体杂交，6。(沈阳质检)转基因植物油是由转基因植物经压榨或浸出制成，因其出油率高而被广泛使用。中国是植物油的消费大国，每年从国外进口大量转基因植物油。(1)在培育转基因油料植物的过程中，基因操作所需的工具酶有。在基因表达载体中，目标

4、基因的头端必须包含识别和结合位点。(2)请写一个可以用来将目标基因导入油料植物细胞的方法。如果受体细胞是植物体细胞，转基因植物可以通过技术获得，这是基于。限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶、启动子、核糖核酸聚合酶、农杆菌转化(或基因枪、花粉管、陶)方法、植物群、组织培养、植物细胞全能性、7。(3)如果(2)中获得的植物细胞的染色体含有目的基因，可以采用技术。如果我想知道上述植物是否真的有高油产量，我应该怎么做？(4)如果用蛋白质工程来不断提高油料作物的出油率，设计过程应该从预期出发，设计预期的结构，推断出合适的序列，然后找到相应的序列，再用转基因技术来改变其现有的性状。DNA分子杂交，称量并比较

5、该植物产生的植物油和具有相同质量、蛋白质功能、蛋白质、氨基酸和脱氧核苷酸的非转基因植物产生的植物油。植物组织培养和植物体细胞杂交，说明植物组织培养和植物体细胞杂交的过程，并思考以下问题。上述两个过程所基于的原则是什么？植物组织培养：细胞全能性；植物体细胞杂交：细胞膜的流动性和细胞的全能性。(2)在植物体细胞杂交过程中，用诱导剂处理原生质体后，会有多少种细胞类型？有五个答案：A，B，A，B，A，B，B，10。野生马铃薯品种对疾病、昆虫、盐碱和寒冷有很强的抵抗力，但块茎不可食用。来自俄罗斯、德国和芬兰的专家共同进行了实验研究，将野生马铃薯与马铃薯的体细胞杂交，培育出具有较强生活能力的杂交马铃薯。根

6、据图表分析，回答以下问题：11、(1)聚乙二醇(PEG)可用于该工艺，其目的是。(2)请用文字和箭头表示工艺过程的实验流程：从这个过程可以看出，植物细胞有可能形成完整的个体。(3)在培养基上培养一段时间后，原生质体将再生为细细胞壁。可以通过实验取样来确定细胞壁是否已经再生。诱导原生质体和原质体的融合，融合细胞愈伤组织幼苗，去分化和再分化，显示全能性的植物和细胞，分离和恢复植物细胞的质壁，12，(5)请解释使用植物体细胞杂交的最大优点：是的，克服了不同生物间的不相容的远缘杂交的障碍，13、说明了动物细胞培养、核移植和单克隆抗体制备的过程，并思考了以下问题。整合动物细胞工程技术的相关知识，14，1

7、5，16，(1)上述过程的原理是什么？回答动物细胞培养：细胞增殖；核转移的核全能性：单克隆抗体的制备原理：a .免疫原理：免疫B淋巴细胞产生特异性抗体。增殖原理：骨髓瘤细胞可以在体外大量增殖。融合原理：细胞膜的流动性和病毒对宿主细胞的渗透。(2)区分原代培养和继代培养、细胞系和细胞系。答：初级文化可以用两种方式表达。a .细胞悬液首次在瓶中培养，分离瓶培养前无细胞培养；第一代细胞培养和10代以内的细胞培养统称为原代培养。这两种表达方式没有本质区别。17、亚文化：也有两种表达方式。a .将细胞悬液培养一段时间，然后在单独的瓶中培养细胞；b细胞培养10代后，统称为继代培养。细胞株：一般来说，原代培

8、养的细胞经过10代后会停滞生长并因衰老而死亡，少数已经度过“危机”的细胞可以经过4050代形成细胞株。细胞系的遗传物质没有改变。细胞系：在细胞系被传递到50代后，将会有第二次危机，一些已经通过第二次危机的细胞可以被无限期地传递以形成细胞系。细胞系的遗传物质发生了变化，具有癌细胞的特征。18，(3)制备单克隆抗体的两种筛选方法是什么？答：第一步筛选是通过选择性培养基去除未融合的B细胞、骨髓瘤细胞、BB融合细胞和肿瘤融合细胞，并筛选出B肿瘤融合细胞。在第二次筛选中，通过细胞培养和相应的抗原检测筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞。由于从体内获得了多种免疫的B淋巴细胞，并且形成了多种杂交瘤细胞，因此有必

9、要筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。19、(潍坊质检)人CD20单克隆抗体是目前主要通过培养哺乳动物细胞生产的治疗某些恶性肿瘤的特异性药物。中国科学家培育出了世界上第一只转基因抗CD20抗体基因奶牛，它可以直接从牛奶中提取抗CD20抗体。技术成熟后，预计这种特定药物的生产成本将降至目前的1/10。请回答：(1)单克隆抗体的制备需要先进行融合。这一过程的诱导方法不同于植物体细胞杂交。(2)动物细胞培养需要在含有混合气体的培养箱中进行，通常在培养液中加入一些天然成分。用灭活病毒、血清、血浆、95%空气加5%CO2诱导免疫B淋巴细胞、Ba细胞和骨髓瘤细胞。在这个过程中使用的工具酶是和。基因表达载体

10、的构建、限制性内切酶(限制性内切酶)、DNA连接酶、基于单克隆抗体的知识、植物体细胞杂交、动物细胞培养、转基因完全分析单克隆抗体的制备首先将免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，其诱导方法不同于植物精细胞与灭活病毒杂交。动物体细胞培养需要满足以下条件：无菌无毒环境、营养、温度、21、酸碱度和气体环境。气体环境必须包含95%的空气和5%的CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2是维持培养液的酸碱度所必需的。当使用合成培养基培养动物细胞时，人们还没有完全了解一些细胞所需的营养，所以通常需要添加一些天然成分，如血清和血浆。转基因技术的核心是基因表达载体的构建，所用的工具酶是限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶

11、。22，1。将目标基因导入受体细胞，23，2。动物细胞融合和植物体细胞杂交的区别，24。学习胚胎工程，核心术语(准确记忆，准确书写，透彻理解，把握内涵和外延)1。胚胎工程(胚胎移植、体外受精、胚胎分裂、胚胎干细胞培养技术)。2.受精卵、卵裂、桑椹胚、胚泡(内细胞团、滋养层细胞)和原肠胚的胚胎发育。3.同期发情、超数排卵和冲卵。4.转基因生物、生殖性克隆、治疗性克隆和生物武器。25，整合胚胎工程的基础知识，概述精子发生和卵子发生的过程以及胚胎发育的流程图，并思考以下问题。26，27，(1)受精的标志和受精完成的标志是什么？回答受精的标志是在卵黄膜和透明带之间的间隙中有两个极体；受精完成的标志是雄

12、性和雌性原核融合成受精卵。(2)卵裂期、桑椹胚和囊胚的细胞特征是什么？卵裂期的特征：有丝分裂增加细胞数量，但总胚胎体积不增加或略有减少，因此每个细胞的体积会随着分裂而减少，但细胞核中的遗传物质不会减少。桑椹胚前细胞未分化，全能性最高，是胚胎分裂的最佳时期。28，在从桑椹胚到囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但它们的全能性仍然很高，这也可用于胚胎分裂。其中，个体较大的细胞被称为内部细胞团，将来会发育成胎儿的各种组织；滋养层细胞将来会发育成胎膜和胎盘。(3)体外受精的操作步骤是什么？卵母细胞的收集和培养。精子的收集和获能。受精。(4)体外胚胎培养基的成分是什么？答案培养基成分，盐类：无机盐和有机盐类

13、营养素：氨基酸，核苷酸调节剂：维生素，激素特异性物质：动物血清，29。整合胚胎工程技术的相关知识，绘制牛胚胎移植流程图、牛胚胎性别鉴定和分割示意图，并回答以下问题。胚胎移植流程图：选择供体牛和受体牛，使发情与激素同步，超数排卵供体牛与促性腺激素同步，用优秀公牛繁殖或人工授精超数排卵牛，30，收集胚胎(冲洗卵)，检查胚胎质量。此时，胚胎处于桑椹胚或囊胚阶段，并被培养或保存。胚胎移植，检查受体牛是否怀孕，受体牛产下小牛进行胚胎移植。31。性别鉴定和胚胎分割示意图：32，(1)胚胎移植的本质是什么？胚胎移植本质上是在相同的生理环境下对早期胚胎空间位置的转移，而胚胎本身的遗传物质并不改变，因此各种性状

14、可以保持其原有的优良特性。(2)胚胎移植成功的保证是什么？首先，供体和受体生殖器官的生理变化是相同的。其次，在哺乳动物的早期胚胎形成后，它在一段时间内不会与母体子宫建立组织联系，而是处于一种第三，受体对移植入子宫的外源胚胎基本上没有免疫排斥反应，这为胚胎在受体体内存活提供了可能性。第四，供体胚胎可以与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但移植入受体的供体胚胎的遗传特征在妊娠过程中不受任何影响。33，(09深圳3月)牛胚胎移植的基本程序如图所示，请根据图回答：(1)图中的A、B、C过程分别指、(2)供体奶牛的主要功能是：受体奶牛必须具备。超数排卵、卵子冲洗和胚胎移植只能产生具有优良遗传特征、健康体

15、格和健康生殖能力的胚胎。34.(3)为了提高牛胚胎的利用率，常用的方法是：处理周期为；原因是。(4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺分离的细胞称为胚胎干细胞或胚胎干细胞。这些细胞的形态特征如下。(5)您认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义是什么？胚胎分割和移植时，处于桑椹胚或囊胚阶段，此时，没有细胞分化或分化程度低，体积小，细胞核大，核仁明显。胚胎移植技术可以加快优良种畜的培育，并快速推广新品种。35.试管婴儿和克隆技术，说明试管婴儿和克隆人的流程图，并思考以下问题。试管婴儿流程图：人类克隆流程图：36，(1)上述两个流程在技术基础、繁殖方式和遗传物质上有什么不同？回答37，(2)治疗性克隆和生

16、殖性克隆之间的区别和联系是什么？答：38、“体外受精”技术是将不育夫妇的精子和卵细胞取出放在试管中，在试管中培养受精卵发育成桑椹胚或囊胚期，然后将胚胎转移到女性子宫发育成胎儿，从而完成受精。它不仅给了一些不孕不育的男女再次生育的机会，而且为人类优生学开辟了一条新的途径。答案如下：(1)“试管婴儿”技术的生物学原理是(A)有性生殖(b)组织培养(c)克隆技术(d)基因工程(A)，39，(2)以下哪项技术用于“试管婴儿”的形成？(填写序列号)。体外培养、人工授精、胚胎移植和核移植(3)为了获得“同卵双胞胎”，所采用的技术是。双胞胎是同性吗？(4)“试管婴儿”技术诞生后，“试管婴儿设计技术”应运而生。这两种技术在人类行为上的区别在于。(5)目前，大多数人反对设计婴儿的性别。胚胎分割和移植是一样的，前者主要用于治疗不孕夫妇的不孕症；后者可用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植的疾病。胚胎在移植前需要进行基因诊