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文档简介
1、探索:培养基中酵母种群的变化,探索:培养基中酵母种群的变化,客观要求1。学习用血细胞计数板2计数微生物的方法。通过实验3探索培养基中酵母种群的变化。注意样品方法4的应用。了解影响人口数量变化的因素。1.酵母的繁殖方式主要是:2.酵母的呼吸模式是:兼性厌氧(需氧呼吸和厌氧呼吸均可进行),出芽繁殖,3。酵母培养条件应注意哪些问题?例如,必须在合适的温度下培养,调节酸碱度,控制溶解氧。制作葡萄酒和面包需要酵母。这些酵母可以在液体培养基中培养。培养基中酵母种群的增长与发酵食品的生产密切相关。由于营养物质的消耗、有害代谢物的积累和酸碱度的变化,培养基中的酵母数量暂时呈“J”形增加,并呈“S”形增加。探讨
2、:培养基中酵母种群的变化;问:培养基中酵母的数量是如何随时间变化的?温度会影响酵母的生长吗?营养会影响酵母的生长吗?根据以前的知识做出假设,对这个问题做出假设:讨论询问的思路,以及菌种、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血细胞计数板(2mm见方)、滴管、显微镜等。询问所需的一切都由老师提供。在制定计划之前,你需要考虑以下问题,并和你的同学讨论它们。实验设计将9个试管分为三组,每组3个试管。a组为实验组,装有10毫升培养液、0.1毫升酵母母液,环境温度为28。b组培养基10毫升,酵母母液0.1毫升,环境温度5,与a组比较。c组不装培养基,只装无菌水10毫升,酵母母液0.1毫升,环境温度28,与
3、a组形成营养条件对照。实验操作:(1)配制无菌马铃薯培养液和酵母母液;(2)预先设计的子包装。首先,用10毫升刻度移液管将10毫升培养液吸入A组和B组试管,然后用另一个10毫升刻度移液管将10毫升无菌水吸入C组试管.分装后,塞住每个试管,捆住试管,然后用记号笔标记培养基的名称、组和日期。(3)用高压蒸汽灭菌器灭菌;(4)菌种接种:每次用灭菌的1毫升刻度吸管吸取0.1毫升酵母母液,加入每个试管中。(注意不要添加太多,避免过多的初始细菌。)(5)培养:将试管甲和试管丙置于28的培养箱中。将试管乙放入5的培养箱中。(对于某些类型的冰箱,可以通过将恒温器设置为5来更换恒温器5。(6)计数和记录:每天的
4、采样时间大致相同,每组按序号一次取一个试管。在计数过程中,我们必须遵守无菌操作规范,清洁和分离取样吸管,并在每次取样前摇动试管。显微镜下计数细胞后,立即将数据填入记录表。分析结果并得出结论用图表显示获得的值,并分析实验结果是否支持你的假设。酵母种群在营养有限的情况下呈S型增长,但随后会减少。温度和营养会影响酵母种群的变化。询问的结论:首先,如何计数酵母?在试管中逐个计数培养液(可设定为10毫升)中的酵母非常困难。取样方法可采用:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸出培养液,滴在盖玻片边缘,让培养液自行渗透,用滤纸吸出多余的培养液。等一会儿。当所有的酵母细胞沉淀到计数室的底部后,将计数板放在舞台中央
5、,在一个小正方形中计数。介绍了:血细胞计数板的结构。1.血细胞计数板是显微镜上的一个外部物体,可以用来测量细胞等一些微小物体的长度血细胞计数板由比普通载玻片厚的特殊载玻片制成。玻璃板上有四个凹槽,构成三个平台。中间的平台很宽,中间的平台被一个短的横向凹槽分成两半。每一半上都刻有方形网格。格子的组成:格子上刻有9个大方块,中间只有一个大方块是计数室,计数室通常有两种规格:一是大方块分为16个中间方块,每个中间方块分为25个小方块;另一个是大网格被分成25个中间网格,每个中间网格又被分成16个小网格。然而,无论计数室是什么样的结构,它们都有一个共同的特征,即每个大方块由1625=2516=400个
6、小方块组成。使用方法:用镜纸擦拭血细胞计数板,用专用盖玻片覆盖中心计数室,用吸管吸一滴稀释的酵母悬液,放在盖玻片边缘,使菌液缓慢渗透,多余的菌液用吸水纸吸走,等一会儿,使所有酵母在血细胞计数室内沉淀,盖上盖玻片。5,单位换算:以1毫米为例,大正方形的长宽为1毫米,深度为0.1毫米,体积为0.1毫米3。换算成1毫升:1000/0.1=104,即1毫升为104块0.1毫米3。计数室规格:计数室长1毫米,宽1毫米,宽2毫米,深3毫米,深0.1毫米。如果计数室有16个隔间和25个隔间,则左上角、右上角、左下角和右下角隔间(即100个小隔间)的酵母数量应对角取值。如果使用25格和16格的计数室,除了四个
7、对角线方向(五点取样法)之外,还需要在一个中间格(即80个小方块)中计数酵母的数量。当出芽酵母达到母细胞一半大时,它可以算作两个菌体。如何计数?规格是25个细胞和16个细胞计数室,五点取样法,7。盖玻片下培养液的厚度为0.1毫米,请计算将小方块中的酵母菌数换算成10毫升培养液中酵母菌总数的公式。每1毫升菌液中所含酵母数的计算公式(以1毫升菌液为例):(1)16个细胞和25个细胞的酵母细胞数/毫升的计算公式=(100个细胞/毫升的酵母细胞数=(100)400104稀释倍数,即小网格中的酵母数为4106稀释倍数。(2)25格x16格血细胞计数板酵母细胞数/毫升=(小格80个酵母细胞/80)4001
8、04稀释倍数的计算公式,即小格中酵母数为4106稀释倍数,教科书中大格的长、宽为2毫米,深为0.1毫米,体积为0.4立方米。换算为1毫升:1000/0.4=2.5103,即1毫升为2.5103 计算每1毫升菌液中所含酵母数的公式为(2mm): (1)计算16个细胞和25个细胞/毫升中酵母细胞数的公式=(100个细胞/毫升中酵母细胞数=(100) 400 2.5103倍稀释,即小网格中酵母数为106倍稀释。 (2)25格16格血细胞计数板的计算公式为:个酵母细胞/毫升=(80个酵母细胞/80个小格)4002.5103倍稀释,即一个小格内的酵母数为106倍稀释,使酵母混合均匀。没有必要,因为在不同
9、的时间取样已经形成了对照。需要。尽量减少错误。对每个样本计数三次,取平均值。建议在从试管中吸出培养液进行计数之前,轻轻摇动试管几次。这是为什么?3.您是否需要在本次调查中进行比较?如有必要,请讨论如何设计和操作控制组;如果没有,请解释原因。你需要重复做实验吗?如何记录结果?如何设计记录表?嘿。只计算相邻边及其顶角上酵母细胞的数量,并稀释培养液。稀释的目的是为了便于酵母悬浮液的计数,建议每方含有4-5个酵母细胞,一般可稀释10倍。8.清洁血细胞计数板。使用血细胞计数板后,用自来水冲洗通过显微镜检查观察每个隔室中是否残留有细菌或其他沉积物。如果不干净,必须反复清洗,直到干净为止。6.如果一个小广场上有太多的酵母需要计数,应该采取什么措施?七、对于压在小方格边界上的酵母,应该如何计数?表达和交流1。将该组7天的数据上报全班,每天计算全班各组数据的平均值,并根据平均值重新绘制酵母群体的生长曲线。将该增
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