基因工程的一般过程与技术

1、1 . 1 . 1 DNA重组技术的基本工具，由石东生教授，时间：2018年12月7日，专题1基因工程，真诚欢迎各位领导和同事前来指导！不要想着过去，不要害怕未来，为现在而努力，为未来而奋斗！展现你的热情，大声朗读出来，你就会成为一个优秀的人。理论基础，DNA是遗传物质的发现，DNA双螺旋结构的建立，鉴定的“中心法则”，技术支持和情境参与：苏云金芽孢杆菌细胞含有一个合成有毒蛋白质的基因。如果细菌的毒素蛋白基因在棉花体细胞中表达，可以培育抗棉铃虫的转基因棉花。想想看：培育转基因抗虫棉的关键步骤是什么？普通棉花转基因抗虫棉，基因工程育种抗虫棉的简要过程：普通棉花(无抗虫特性)，切割，抗虫基因，与载

2、体DNA连接，导入，转基因棉花含有抗虫基因，转基因棉花具有抗虫特性，苏云金杆菌和转基因棉花产生有毒蛋白，基因工程育种抗虫棉的关键步骤：关键步骤1:关键步骤2:用载体DNA“剪接”抗虫基因；关键步骤3:抗虫基因进入棉花体细胞，“分子手术刀”限制性内切酶，“分子缝合针”DNA连接酶，“分子转运体”载体；学习任务1:限制性内切酶(缩写为限制性内切酶)，“分子手术刀”；前言：脱氧核苷酸链中两个相邻的碱基由_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _脱氧核糖-磷酸-脱氧核糖组成，自主学习：学习任务1:限制性内切酶(限制性内切酶)“分子手术刀”

3、，课前学习：自主学习：1。观察手里的限制性内切酶序列，并说出其功能特点：学习任务1:限制性内切酶(限制性内切酶)“分子手术刀”，课前学习：自主学习：限制性内切酶在切割脱氧核糖核酸时可以在切割处携带几个突出的核苷酸，它们之间的碱基是互补和配对的，所以这些片段被称为粘性末端。练习：用相同的限制性内切酶切割下列平端：ABCD，小组合作：1用限制性内切酶切割目标基因，并切割几个切口。产生了多少粘性末端？限制酶在原核生物中的作用？2、切割外来DNA使其无效以保证自身安全。4，学习任务2: DNA连接酶“分子缝合针”，前言：自主学习：1，Ecoli DNA连接酶T4 DNA连接酶，物种：2，作用：回收被限

4、制酶切割的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，3，作用原理：磷酸二酯键形成的催化作用，学习任务2: DNA连接酶“分子缝合”基本单位是相同的：它们都是由脱氧核苷酸组成的。空间结构是一样的：它们都有规则的双螺旋结构。碱基配对的方式是一样的：碱基配对是a和t，c和g。学习任务3:载体“分子转运体”，小组合作：1如果外源基因被导入受体细胞后不能复制怎么办？2作为载体，如果没有限制酶切割位点会怎样？如何检测外源基因是否进入受体细胞？4如果载体对受体细胞有害怎么办？5基因工程载体的要求：6细胞膜上的载体和基因工程载体有什么区别？不同的化学本质：不同的功能：学习任务3:载体“分子转运体”，它可以与插入的靶基因一起

5、复制，具有切割位点，并且存在标记基因，这可以通过含有氨苄青霉素的培养基来鉴定。小组讨论：1 .基因工程载体条件：2 .细胞膜上的载体和基因工程上的载体有什么区别？知识网络的构建小组合作：不同的限制性内切酶切样？材料：白纸代表质粒，红纸代表靶基因，剪刀限制性内切酶，胶带脱氧核糖核酸连接酶， T . C . T . A . G . A . T . C . T . G . C . G . A . C . G . A . C . G . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C .

6、 C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C . C 通用汽车公司，通用汽车公司， T . C . T . A . A . T . C . G . G . G . C . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G . G .