细胞工程的应用.ppt

1、动物细胞融合和单克隆抗体,动物细胞与组织培养,动物细胞融合和单克隆抗体,细胞核移植与动物体细胞克隆,动物细胞工程常用技术,本节网络构建,通过本节的学习，我能够： 1简述动物细胞的融合的方法和过程。 2说出单克隆抗体的制备过程及其应用。 3关注细胞工程研究的发展和应用前景 。,本节学习目标,记忆检查,1、细胞融合概念：是指在一定的条件下将 细胞融合为 的过程。 2、诱导动物细胞融合的方法有： 法（如 ）、 法（如 ）和 法（如 ）。 3、单克隆抗体制备：给小鼠注射特定的 ，从 小鼠脾脏中分离 细胞与 细胞融合，经 培养，筛选出 细胞，使其在 或 培养，迅速增殖，分泌出 ，即为单克隆抗体。,两个或

2、多个,一个细胞,物理,电场法,化学,PEG,生物,仙台病毒法,抗原,B淋巴,骨髓瘤,杂交瘤,小鼠体内,体外,特异性抗体,是指在一定的条件下将2个或多个 细胞融合为一个细胞的过程。,共同探究,一、动物细胞融合,1、概念：,2、过程：,筛选 有丝,杂种,【思考题1】杂交细胞是指 融合后形成的具有2个或多 个细胞遗传信息的单核细 胞。杂交细胞形成过程中， 细胞膜的融合依靠 原 理，而细胞核的融合在 时形成。,细胞膜 的流动性,第一次 有丝分裂,3、原理：,4、意义：,突破 方法的局限,使 成为可能。,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。,为制造 开辟了新途径。,5、应用：,

3、有性杂交,远缘杂交,单克隆抗体,植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,细胞膜的流动性、植物细胞的全能性,细胞膜的流动性,酶解法去壁,原生质体,胰蛋白酶,物理法、化学法,物理法、化学法、生物法,杂种植株,单克隆抗体,【思考题2】在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（） A结果是相同的 B杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同,B,二、单克隆抗体,什么是单克隆抗体？,单： 克隆： 抗体：,单个B淋巴细胞,无性繁殖,化学性质单一、特异性强的抗体,1、概念：,2、制备过程：,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,（选择性培养基）,

4、选择性培养基： 使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活。,为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?,小鼠骨髓瘤细胞可以无限增殖，B淋巴细胞能够产生特异性的抗体。,骨髓瘤细胞是癌细胞吗?,有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。,归纳与讨论,整个制备过程要经过几次筛选？为什么？,第一次筛选：用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞。,第二次筛选：用抗原-抗体杂交检测筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,【思考题3】单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋

5、巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D,C,【思考题4】（13年重庆卷）下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是（ ） A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群,D,【思考题5】(多)下列与应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤如下，其中对单克隆抗体制备的相关叙述中正确的是（ ） 将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞 从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞

6、利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合 将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养 筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞 从腹水中提取抗体 A实验顺序应当是 B过程中产生的多个杂交瘤细胞也为克隆 C过程获得的细胞均可无限增殖 D到的过程中通常要经过两次筛选,ABD,3、制备单克隆抗体的原理：,免疫学原理、动物细胞融合原理和动物细胞培养原理等。,4、单克隆抗体的优点：,特异性强、纯度高、灵敏度高、产量 大、容易标准化生产等。,5、单克隆抗体的应用：,治疗各种肿瘤；单抗药物剂型可单独使用，治疗疾病；也可将单抗与抗癌药物结合，制成生物导弹，使药物定向发挥作用。 治疗免疫系统紊乱导致的疾病，如类风湿性关节炎、牛皮癣、系统

7、性红斑狼疮、哮喘、过敏性鼻炎等。 治疗器官移植后发生的移植排异。,【思考题6】,（1）过程的目的是_。 一个效应B淋巴细胞只分泌_特异性抗体。 （2）过程的目的是_，浆细胞（A）和骨髓瘤细胞（B）经人工方法促融，可能会得到_（只考虑两两融合,以A、B表示）。 （3）过程是用特定的_筛选出_细胞。这种细胞的特点是既能_，又能_。过程是需进行_检测，以获得_细胞。 （4）过程是特定的杂交瘤细胞的大规模培养：体内培养是在_中进行，体外培养的条件有：_ _。,获得能产生特定抗体的B淋巴细胞,一种,使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,A-A、B-B、A-B,选择性培养基,杂交瘤,无限增殖,产生特异性抗体,抗原-抗体,能产生特定抗体的杂交瘤,小鼠腹腔,无菌、营养、适宜