动物细胞与组织培养.pptx

1、动物细胞工程动物细胞与组织培养,烧伤病人图片,异体皮肤移植图片,动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体制备,细胞核移植,动物细胞工程技术,动物细胞工程的基础,动物细胞培养,1、概念（人教版） 动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。,讨论,1、动物细胞培养的原理是什么？ 2、从动物机体中要取出哪些相关组织？并解释原因。,3、组织分散成单个细胞的方法是什么？其理论依据是什么？ 4、动物细胞体外培养需要满足哪些条件？,阅读课本观察图片，简述动物细胞培养的基本过程,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,剪碎,单个细胞,加培养

2、液,制成,细胞悬浮液,10代 细胞,部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代,动物细胞培养不能 最终培养成动物体,50代细胞,细胞贴壁,剥离、分瓶,细胞株,细胞,细胞系,2、过程,动物细胞生长特性,细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。,细胞贴壁过程,50代细胞,无限传代,细胞株,细胞系,如何界定细胞株和细胞系？,多数组织细胞固定在表面生长和分裂。,随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖,遗传物质改变,思考讨论,1.

3、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因。,细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。,肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞,拓展-动物组织或细胞培养的难易程度,幼体组织或细胞 老龄组织或细胞,分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织或细胞,2、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？,保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大的变化，最接近于体内组织或细胞的生长

4、特性，很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。,3、在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？,胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖.,.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ .胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ .细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ .既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？,进一步思考：,否,胰蛋白酶水解蛋白质,蛋白质,蛋白质和磷脂,

5、能,注意时间的控制,不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？,动物细胞培养条件：,1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）,2、必须的营养物质 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、激素、生长因子、动物血清等。）,保证细胞顺利的生长增殖,3、适宜的温度和pH 36.50.5; pH：7.2-7.4,4、充足的氧气和适宜的酸碱度 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）,问题：,1、培养基的类型,合成培养基：成分明确，

6、便于控制试验条件,2、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组织培养基有何独特之处？,主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。,独特之处有：1、液体培养基（动物体细胞大都生活在液体的环境） 2、成分中有动物血清等,获得细胞,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体,培养结果,或细胞产物,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物组织和动物细胞培养的比较,动物细胞培养应用,大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体） 获得大量自身的皮肤细

7、胞，用于植皮 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据,课堂小结,动物细胞和组织培养（原理、材料选择及原因、一般过程、培养条件、主要应用）,注意： 概念理解：原代培养、传代培养、细胞株 、细胞系 胰蛋白酶处理的原因、目的和注意事项 动物细胞培养和植物组织培养的区别,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 -（ ） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是 -（ ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,课堂反馈练习,3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出

8、生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ）A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强,D,4、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） A限制性内切酶 BDNA连接酶 C胰蛋白酶 D果胶酶,C,5、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ） A动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白 B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散 C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D培养至50代后继续传代的细胞是细胞株 6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为（ ）A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系,B,D,7、动物细胞培养的正确过程是（ ） A.原代培养传代培养细胞株细胞系 B. 原代培养传代培养细胞系细胞株 C.传代培养细胞系原代培养细胞株 D. 原代培养细胞系传代培养细胞株 8、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（ ） A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变 D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞,A,C,动物细胞体外培养时，通常要在培养 基中补充一定浓度的某些物质。 右图是