原创家族性青少年高尿酸肾病致病基因研究魏昕课件

家族性青少年高尿酸肾病致病 基因研究 魏昕 南昌大学第一附属医院 舀 账 浑 扑 熔 炽 匪 拟 窘 厘 裸 光 橱 骚 滑 赢 参 蹈 特 箕 母 唤 顶 玲 腹 殷 萨 矾 逊 久 断 段 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究背景 家族性青少年高尿酸肾病又称为家族幼发 性高尿酸肾病（fmilil juvenile hyperuricemic nephropthy,FJHN），是一种罕见的常染色 体显性遗传性疾病，其临床特点为青年发 病，高尿酸血症，肾小管尿酸排泄障碍及 进行性发展的间质性肾炎 以往的研究发现染色体16p12上的UMOD基 因与该病的发生密切相关，但其具体突变 位点在不同的人种中存在较大异质性 旺 射 几 骤 吧 复 励 模 鸣 遥 骸 怒 箕 劳 各 孝 踌 频 厘 窥 哗 冶 听 枉 塘 佣 拳 稿 佬 辆 严 农 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究背景 已报道了UMOD基因上的42个突变位点与家族幼发性高尿酸肾 病相关，但这些突变位点主要集中在3号和4号外显子区域，该区 段编码3个表皮生长因子样区域和1个光氨酸富足区域 却 蹿 窘 如 器 捅 得 良 何 误 必 窥 秋 絮 户 措 砰 葡 椰 迫 坍 蒜 郡 钎 抄 裁 袜 并 斜 把 缅 廖 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究背景 UMOD基因包含2315个碱基，11个外显子， 编码的蛋白质为uromodulin 蛋白（又称 Tmm-Horsfll蛋白） uromodulin在正常人的尿液中含量丰富，该蛋白虽已被发 现有一个多世纪了（1895），但其生物学功能尚不明确 轩 擅 续 镰 岳 遏 葬 旁 圭 邪 版 彬 淘 酸 长 轧 顺 铀 赖 巩 迢 燎 谋 喘 赏 虹 曰 篓 娱 使 烘 斌 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究目的 本研究的目的在于通过对一例较完整的中 国南部的家族幼发性高尿酸肾病家系进行 遗传学分析，定位中国家族幼发性高尿酸 肾病的致病位点并探讨其致病机制 腊 蜂 些 叮 泥 芦 惠 接 猎 曹 伪 城 晚 栖 掐 狱 诱 桌 酌 接 挤 狗 崖 瞎 阔 秀 饲 捶 抽 座 叛 滦 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 诊断标准 FJHN家系诊断标准： 家族患病成员表现为常染色体显性遗传方 式的慢性肾脏病 痛风或高尿酸血症发生在肾功能损害之前 家族中有两例或以上成员为经肾活检证实 的慢性间质性肾炎 患病成员诊断标准： 出现肾损害（血肌酐水平1.4mg/dl） 尿酸排泄分数（FEU%）：男性5.5%; 女性 7.8% FEU%计算公式：（血肌酐尿尿酸）/（尿 肌酐血尿酸）100% 衔 规 绳 匹 敢 家 震 桥 苯 杆 恫 惶 络 捍 览 阻 湘 铝 搐 热 崎 卯 醋 级 坟 址 肌 截 疯 货 搪 审 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究方法 FJHN家系的采集 患病成员健康成员普通人群对照 DN 尿液肾组织 外显子测序，定 位突变位点 免疫荧光测定肾组织 中uromodulin表达 ELIS测定尿液中 uromodulin浓度 判 统 糠 湖 岁 悠 水 掘 沥 邦 跨 藐 矿 堵 毋 坛 第 荣 熏 漾 近 叛 殆 鹰 咳 锣 巾 年 胞 闲 出 过 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结果 FJHN家系图谱：4代，13例患者(10男，3女)，36例健康成员 斥 憨 砰 笨 乏 们 更 怂 转 掷 海 依 达 求 祭 胰 椭 疗 穗 能 凯 没 缉 扦 涣 狞 挣 挺 痒 走 矾 榜 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结果 ID年龄性别高血压血肌酐 (mg/dl) 血尿酸 (mg/dl) eGFR* (ml/min/1.7 3m2) 尿酸排 泄分数 (%) 双肾B超肾活检痛风死亡年 龄 :1-maleyesNANAESRDNANANAnot clear not clear :1-maleyesNANAESRDNANANAno48 :3-maleyesNANAESRDNANANAyes50 :5-femalyesNANAESRDNANANAno48 :1-maleyesNANAESRDNANANAyes46 :5-maleyesNANAESRDNANANAyes51 :1332maleyes1.4313.3257.622.86normal size of kidney, multiple renal calculus in both kidney NAyes- :1532maleyes1.5813.4251.851.15normal size of kidney, multiple renal calculus in both kidney NAyes- :1945maleyes3.349.7220.514.58small kidney with decreased renal parenchyma Chronic interstitial nephritis yes- :2139femaleyes1.529.4741.137.04small kidney with decreased renal parenchyma Chronic interstitial nephritis no- :121maleyes1.258.4070.764.54NANAno- :416maleno0.947.99109.073.04NANAno- :1112femaleno0.618.90119.473.12NANAno- 13例患病成员临床资料 法 塑 藕 尾 强 宅 抛 阿 涸 屈 恤 骂 涯 崎 许 露 帝 扯 砾 芒 抢 扣 众 墓 欲 淋 疲 苯 瑞 席 听 娟 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结果 患病成员()UMOD基因在1815号碱基的位置上发生了突变（c.1815 G，见 图二），该突变导致UMOD编码蛋白uromodulin的第605号氨基酸由苏氨酸 变成甘氨酸,该突变在对照组（B,家族中的健康成员和100例无血缘关系的健 康对照）中未出现。 . B. 愉 昨 秒 蔷 仓 课 鸟 叶 医 荫 绢 湿 顷 戎 盗 假 仲 头 荣 潍 经 掐 收 乡 终 磺 囱 捆 掺 姐 叮 朵 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结果 比较7例健存的患病成 员 和15例未发病成员，15例无 血缘关系的健康对照尿液中 uromodulin浓度： 患病成员，未患病成员和健 康对照尿uromodulin/尿肌酐 分别为0.62mg/g，3.40 mg/g和3.10 mg/g，P0.05 洪 捧 窜 群 盆 梅 灌 粒 最 亲 蝉 檬 丰 峰 害 绽 竹 腕 濒 衫 闸 勇 卑 心 两 碳 霖 誓 哗 躺 馏 巴 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结果 比较健康对照（）,非家族性痛风肾患者（B），FJHN患者肾组织中 uromodulin的表达：FJHN患者肾小管上皮细胞内uromodulin成团块 状聚集且表达明显高于其他两组。 挟 慌 罩 转 构 嗓 碍 溃 屿 畸 捷 阅 仿 蛆 反 缨 扒 朋 尤 硫 稼 舶 舟 警 肃 戚 扦 当 辊 坟 爪 裕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 讨 论 以往研究报道的突变位点主要集中在3号和 4号外显子，这两个外显子所编码的区域（ EGF-like，D&C）与蛋白的折叠和转运相关 ，这些位点的突变使uromodulin蛋白在内质 网聚集或在胞浆内的转运能力下降，最终 导致蛋白的分泌减少。 局 辟 纫 邓 救 叔 擎 雷 浊 合 矢 命 涣 升 桂 痈 摔 夏 氰 漂 弄 喊 壳 窍 泌 窃 先 粳 肠 几 赢 挂 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 本研究所发现的新突变位点位于UMOD基因 的9号外显子（ c.1815 G，p.605 T G）， 该区域编码uromodulin蛋白的糖基磷脂酰肌 醇锚定区（GPI -nchor），主要功能为将蛋 白锚定在包膜上，然后通过酶解作用释放 到胞浆或细胞外。 因此，该位点突变可能导致蛋白锚定失败 ，而在胞浆和内质网内聚集，导致分泌降 低。 讨 论 徘 痹 栅 锥 荧 终 志 球 萎 内 毫 潞 枢 灰 两 浩 溢 牲 茎 剖 陕 梳 马 蛾 滤 面 邵 翰 骤 雍 退 凶 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 家 族 性 青 少 年 高 尿 酸 肾 病 致 病 基 因 研 究 - 魏 昕 研究结论 本研究发现UMOD基因9号外显子（c. 1815 G ）的突变使其编码蛋白uromodulin的分泌障碍 从而导致家族幼发性高尿酸肾病的发生。 颜 说 授 娩 铅 尊 髓 像 男 昌 幸 胃 盟 摆 逗 税 屁 姻 带 瘩 株 底 赡 貌 郑 畏 款 辖 惺