课件：微生物培训.pptVIP

微生物,Introduction of Microbiology,2019,-,1,2019,-,2,1348年，意大利佛罗伦萨。 黑死病横行。 三名少男、七名少女逃到城外山上，每日讲故事。,2019,-,3,黑死病,2019,-,4,黑死病是人类历史上最严重的瘟疫之一。起源于亚洲西南部，约在1340年代散布到欧洲，而“黑死病”之名是当时欧洲的称呼。这场瘟疫在全世界造成了大约7500万人死亡，其中2500万为欧洲人。根据估计，当时欧洲约有三分之一的人死于黑死病。,2019,-,5,黑死病最初症状是腹股沟或腋下的淋巴肿块，然后，胳膊上和大腿上以及身体其他部分会出现青黑色的疱疹，这也是黑死病得名的源由。极少有人幸免，几乎所有的患者都会在3天内死去，通常无发热症状。,2019,-,6,黑死病最初于1338年中亚一个小城中出现，1340年左右向南传到印度，随后向西沿古代商道传到俄罗斯东部。从1340年到1345年，俄罗斯大草原被死亡的阴影笼罩着。1345年冬，蒙古人在进攻热那亚领地法卡，攻城不下之际，恼羞成怒的蒙古人竟将黑死病患者的尸体抛入城中，结果城中瘟疫流行，大多数法卡居民死亡了，只有极少数逃到了地中海地区，然而伴随他们逃难之旅的却是可怕的疫病。,2019,-,7,1347年，黑死病肆虐的铁蹄最先踏过康坦丁斯堡拜占庭最大的贸易城市。到1348年，西班牙、希腊、意大利、法国、叙利亚、埃及和巴勒斯坦都爆发了黑死病。1352年，黑死病袭击了莫斯科，连莫斯科大公和东正教的教主都相继死去。黑死病的魔爪伸向了各个社会阶层，没有人能逃避死亡的现实。,2019,-,8,1629年到1631年的意大利 1665年到1666年的伦敦 1679年的维也纳 1720年到1722年的马赛 1771年的莫斯科,2019,-,9,1894年，法国细菌学家亚历山大耶尔森发现了引起鼠疫的病原体，命名为耶尔森氏鼠疫杆菌。从那以后，科学界普遍认为，黑死病就是鼠疫杆菌袭击淋巴腺导致的腺鼠疫。它可以由人直接传染给人，但主要传播途径是老鼠和跳蚤。 进入21世纪，两名英国科学家提出，黑死病并非通常所认为的腺鼠疫，而是一种由病毒导致的出血热，可能与埃博拉出血热类似。,2019,-,10,一、史前时期（直观时期）,春秋战国时期 微生物分解有机物质,沤粪积肥。 公元二世纪的神农本草经 白僵蚕治病。 公元6世纪 后魏的贾思勰 齐民要术 谷物制曲、酿酒、制酱、造醋、腌菜。 豆科植物与其它作物轮作 在古希腊留下来的石刻上，记有酿酒的操作过程,2019,-,11,二、初创时期（形态学发展时期）,（17世纪下半叶十九世纪中叶） 使用显微镜观察微生物世界的时期。 代表人物：列文虎克,贡献: （）发现了微生物世界 （）科学地描述了微生物的形态并阐述了它们的繁茂性,2019,-,12,2019,-,13,1676年，荷兰，列文虎克，单式显微镜（复制品）,2019,-,14,三、奠基时期（生理学发展时期）,十九世纪下叶 有关微生物的两个疑难问题： 1、生物是自然产生的吗？ 2、传染性疾病的本质是什么？,2019,-,15,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生学说,法国，化学家，路易斯 巴斯德,2019,-,16,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,新鲜食品,搁置,细菌检定,无细菌,腐败食品,细菌检定,有细菌,由非生命的物质自然发生,自然发生说,2019,-,17,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,巴斯德反驳自然发生说的三个实验,第一个实验,空 气,乙醇、醚混合物,棉纤维,沉淀物,检测,2019,-,18,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,巴斯德反驳自然发生说的三个实验,第二个实验,加热,营养液,密封,放置,细菌检测,无细菌检出,自然发生说质疑：无机物自然变为生命有机体必须提供新鲜的空气,2019,-,19,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,巴斯德反驳自然发生说的三个实验,第三个实验,2019,-,20,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,巴斯德反驳自然发生说的三个实验,第三个实验,2019,-,21,三、奠基时期（生理学发展时期）,、巴斯德与自然发生说,巴斯德反驳自然发生说的三个实验,第三个实验,2019,-,22,法国酿酒工业的需要 巴斯德灭菌法 狂犬疫苗的产生,2019,-,23,、科赫与疾病的病菌说,三、奠基时期（生理学发展时期）,德国，乡村医生，科赫,2019,-,24,、科赫与疾病的病菌说,三、奠基时期（生理学发展时期）,健康者,病 者,接触传染物,感染得病,2019,-,25,、科赫与疾病的病菌说,三、奠基时期（生理学发展时期）,科赫的有关实验病原菌的发现,炭疽病炭疽芽孢杆菌,科赫法则 (证明某微生物是某疾病病原菌的四项要求) 1、在患病动物中存在可疑病原有机体，而健康动物中没有； 2、可疑有机体在纯培养中生长； 3、纯培养中的可疑有机体细胞，能引起健康动物发病； 4、可疑有机体被再次分离，并且和最初分离的有机体一样；,2019,-,26,、科赫与疾病的病菌说,三、奠基时期（生理学发展时期）,主要贡献： 建立了疾病细菌说； 首创了细菌染色法； 首创了细菌的纯培养固体培养基 提出了著名的科赫法则。,2019,-,27,三、奠基时期（生理学发展时期）,、贝耶林克 加富培养 、维诺格拉斯基 土壤微生物研究的生态学观点和原位研究路线。,2019,-,28,四、发展时期（生物化学水平）,始于二十世纪初， 代表人物： E. Echner （1897年）,酵母细胞,石英砂研磨,过 滤,滤液,葡萄糖,酵母细胞,酒精、CO2,2019,-,29,五、成熟时期（分子水平）,始于二十世纪五十年代 电子显微镜的使用 DNA的发现,2019,-,30,2019,-,31,2019,-,32,2019,-,33,2019,-,34,噬菌体,SARS病毒是一类新发现的冠状病毒,禽流感病毒,爱滋病毒,2019,-,35,一、基本概念,什么是微生物 是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。,2019,-,36,真核细胞型微生物细胞核分化程度高，有核膜和核仁，细胞器完整。如真菌。 原核细胞型微生物细胞核的分化较低，仅有原始核，无核膜、核仁。细胞器很不完善。DNA和RNA同时存在。这类微生物众多，有细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。 非细胞型微生物是最小的一类微生物。无典型的细胞结构，只能在活细胞内生长繁殖。核酸类型为DNA或RNA。如病毒。,微生物的种类,2019,-,37,二、微生物特点,种类多、分布广 微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入，人的皮肤上，口腔，肠道里都有许多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁殖的大本营，约占微生物总量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20亿个微生物，即使是贫瘠的土壤，每克土中也含有35亿个微生物。空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。哪里尘埃多，哪里的微生物就多。 迄今为止，我们知道的微生物约有10万种，目前已知的种类只占地球上实际存在的微生物总数的20%，人类生产和生活中仅开发利用了已发现微生物种数的1%。,2019,-,38,我们所生活的环境中，到处都存在着大量的微生物。 一般空气：8003500个/m3 土壤：1500108个/g 严重污染的水：107个/ml；饮用水经水塔或贮水池贮存后，短期内可繁殖至105106个/ml。 人的头皮上有140万个/cm2 两手上约有440万个 1g指甲污垢有38亿个 可以说微生物是无处不在，无处不有。许多以前被人们认为是极端（高温、高压、强酸、强碱、低温等）甚至是致死的环境，现在已发现生活着各种类型的微生物（称为极端微生物）。事实说明，微生物有特别顽强的生存、繁殖和变异能力来适应环境。,2019,-,39,个体小、面积大 生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。 物体的表面积和体积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的30万倍。,2019,-,40,吸收多、转化快 微生物有惊人的繁殖速度，大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代，如细菌一般每2030分钟即可分裂一次。 生产味精的谷氨酸短杆菌，从摇瓶培养扩大到50吨发酵罐的过程中，在52小时内细胞数目增加了32亿倍。 微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。,2019,-,41,适应强、易变异 多数细菌能耐0196的低温；在海洋深处的某些硫细菌可在250300的高温条件下正常生长；一些嗜盐细菌甚至能在饱和盐水中正常生活；产芽孢细菌和真菌孢子在干燥条件下能保藏几十年、几百年。由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅度的产量提高。,2019,-,42,三、微生物的类群和形态结构,微生物按其结构、化学组成及生活习性等分为三大类： 原核细胞型：细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体等 真核细胞型：真菌 非细胞型：病毒 噬菌体,2019,-,43,1、细菌,细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二等分裂方式繁殖的原核微生物，分布广泛。,2019,-,44,观察细菌常用光学显微镜，其大小用测微尺在显微镜下进行测量，以微米(m)为单位。不同种类的细菌大小不一，同一种细菌也因菌龄和环境因素的影响而有差异。 细菌按其外形，主要有球菌、杆菌、螺形菌。,2019,-,45,脑膜炎奈瑟菌,双球菌(diplococcus),2019,-,46,链球菌(streptococcus),2019,-,47,葡萄球菌(streptococcus),2019,-,48,葡萄球菌,2019,-,49,四联球菌(tetrad),2019,-,50,八叠球菌(sarcina),2019,-,51,不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致,2019,-,52,杆菌的形态多样,2019,-,53,杆菌的形态多样,分枝杆菌,双歧杆菌,2019,-,54,螺形菌(spiral bacterium),2019,-,55,淡水中的螺旋菌 spirochetes .,2019,-,56,革兰染色法,涂片 风干 固定 结晶紫 碘液 95%乙醇 复红 保留紫色革兰氏阳性 复染成红色革兰氏阴性,2019,-,57,革兰阳性 革兰阴性,2019,-,58,关于芽孢,芽孢是休眠体 芽孢的特性,成熟芽孢的电镜照片,2019,-,59,芽孢的特点,整个生物界中抗逆性最强的生命体，是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标。 芽孢是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞； 产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。产芽孢的细菌多为杆菌，也有一些球菌。 芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标。 芽孢与营养细胞相比化学组成存在较大差异，容易在光学显微镜下观察。,2019,-,60,关于芽孢,芽孢的显微照片,嗜热脂肪芽孢杆菌的内生孢子,梭状芽孢杆菌,2019,-,61,芽孢杆菌 （细菌）,2019,-,62,蜡样芽孢杆菌（细菌）,2019,-,63,细菌的繁殖,二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。,2019,-,64,2019,-,65,细菌的菌落,单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。细菌的菌落特征因种而异。可作为鉴定细菌种的依据。,2019,-,66,粘质沙雷氏菌的菌落特征,沙门氏菌的菌落特征,铜绿假单孢菌的菌落特征,弗氏志贺氏菌的菌落特征,粘质沙雷氏菌的菌落特征,2019,-,67,放线菌的形态、大小和结构 放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝，菌丝直径与细菌相似，小于1微米。菌丝细胞的结构与细菌基本相同。 根据菌丝形态和功能的不同，放线菌菌丝可分为基内菌丝、气生菌丝和孢子丝三种。链霉菌属是放线菌中种类最多、分布最广、形态特征最典型的类群，其形态如下图所示。,2、放线菌,2019,-,68,放线菌的菌丝,2019,-,69,放线菌的繁殖,放线菌没有有性繁殖，主要通过形成无性孢子方式进行无性繁殖。,2019,-,70,放线菌的菌落,放线菌在固体培养基上形成与细菌不同的菌落特征，放线菌菌丝相互交错缠绕形成质地致密的小菌落，干燥、不透明、难以挑取，当大量孢子覆盖于菌落表面时，就形成表面为粉末状或颗粒状的典型放线菌菌落，由于基内菌丝和孢子常有颜色，使得菌落的正反面呈现出不同的色泽。,2019,-,71,放线菌的菌落特征 A：诺尔斯氏链霉菌； B：皮疽诺卡氏菌； C：酒红指孢囊菌； D：游动放线菌； E：小单胞菌； F：皱双孢马杜拉放线菌,产抗菌素的放线菌的菌落特征 A：卡特利链霉菌； B：弗氏链霉菌； C：吸水链霉菌金泪亚种；D：卡那霉素链霉菌；E：除虫链霉菌； F：生磺酸链霉菌,2019,-,72,3、霉菌,霉菌是丝状真菌的俗称，意即“发霉的真菌“，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。,2019,-,73,霉菌的形态、大小和结构,霉菌的菌丝是构成霉菌营养体的基本单位。 菌丝是一种管状的细丝，把它放在显微镜下观察，很像一根透明胶管，它的直径一般为3-10微米，比细菌和放线菌的细胞约粗几倍到几十倍。菌丝可伸长并产生分枝，许多分枝的菌丝相互交织在一起，就叫菌丝体。,2019,-,74,霉菌的菌落,由于霉菌的菌丝较粗而长，因而霉菌的菌落较大，有的霉菌的菌丝蔓延，没有局限性，其菌落可扩展到整个培养皿，有的种则有一定的局限性，直径1-2厘米或更小。菌落质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取；菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。,2019,-,75,各种曲霉的菌落,2019,-,76,各种病原真菌的菌落,青霉的菌落,青霉的菌落,2019,-,77,4、酵母菌(真菌),提起酵母菌这个名称，也许有人不太熟悉，但实际上人们几乎天天都在享受着酵母菌的好处。因为我们每天吃的面包和馒头就是有酵母菌的参与制成的；我们喝的啤酒，也离不开酵母菌的贡献，酵母菌是人类实践中应用比较早的一类微生物，我国古代劳动人民就利用酵母菌酿酒；酵母菌的细胞里含有丰富的蛋白质和维生素，所以也可以做成高级营养品添加到食品中，或用作饲养动物的高级饲料。 酵母菌在自然界中分布很广，尤其喜欢在偏酸性且含糖较多的环境中生长，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果园土壤中最为常见。,2019,-,78,酵母菌的形态、大小和结构,酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1-5微米5-30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。 酵母菌具有典型的真核细胞结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。,2019,-,79,酵母菌的菌落,大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。,2019,-,80,各种酵母菌的菌落,啤酒酵母的菌落,红酵母的菌落,2019,-,81,5、病毒,形态结构 病毒的形态基本可归纳为三种：杆状、球状和这两种形态结合的复合型。没有细胞构造，病毒粒子的主要成分是核酸和蛋白质，在宿主细胞协助下，通过核酸的复制和核酸蛋白装配的形式进行增殖。病毒粒子通常形成螺旋对称、二十面体对称和复合对称。 病毒粒子是无法用光学显微镜观察的亚显微颗粒，但当他们大量聚集在一起并使宿主细胞发生病变时，就可以用光学显微镜加以观察。例如动、植物细胞中的病毒包涵体；有的还可用肉眼看到，如噬菌体的噬菌斑等。,2019,-,82,繁殖方式,病毒只有在宿主细胞里才能进行繁殖，而且是通过复制的方式进行的。概括起来可分为吸附、侵入、脱壳生物合成、装配与释放五个步骤。,2019,-,83,四、微生物的营养,水分：水占细胞浆的70%90%，是细胞的重要组成成分。较普遍的观点认为，只有在含水的环境中微生物才能存活。但也有人发现在无水碳氢化合物中微生物可长期存活。 碳源：碳源是构成细胞的重要物质。有些微生物的碳源必须来自有机碳化合物如糖、蛋白质、脂肪、有机酸等（同时利用其化学能），属异养型；有些微生物不需有机碳化合物，以CO2为碳源，属自养型（分为光能自养型和化能自养型）。,2019,-,84,氮源：氮是组成蛋白质和核酸的重要元素。 无机盐类：细菌所需无机盐包括磷、硫、镁、铁、钾、钠、钙、氯、锰、锌、钴、铜等。其中磷、硫、镁、钾、钠、铁需要量较多，其他只需微量。 生长因子：生长因子是某些微生物生长发育所必需，而其自身又不能合成的一类营养物质。包括维生素、嘌呤和嘧啶。,2019,-,85,五、消毒与灭菌,消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，从事药品生产和检验的人员都应当了解消毒与灭菌的方法及其意义，严格遵守操作规程，否则会影响产品质量，危害患者安全。,2019,-,86,概念,灭菌使达到无菌状态的方法（GMP指南）。用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。通常是指杀灭或除去全部活的微生物（包括繁殖体和芽孢）。 消毒用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。通常是指杀死病原微生物的繁殖体，但不能破坏其芽孢。所以消毒是不彻底的，不能代替灭菌。,2019,-,87,方法,热力灭菌法 干热灭菌 湿热灭菌 辐射杀菌法 滤过除菌法 超声波杀菌法 化学灭菌法,2019,-,88,干热灭菌,常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。 火焰、烧灼：通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。 干烤和红外线：利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135145需35h，160170需2h以上，170180需1h以上，180200需0.51h。除热原，则需25030min，或20045min，1802h。空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。,2019,-,89,湿热灭菌,通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。 煮沸或流通蒸汽灭菌：常压下沸水和蒸汽的温度是100，一般处理3060min可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。 低温间隙灭菌（巴斯德灭菌法）：将物品先用6080加热（或煮沸）1h，然后置2025保存24h（或常温过夜），使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。,2019,-,90,高压蒸汽灭菌（热压灭菌）,超过一个大气压时，水的沸点高于100，反之亦然。高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。 常用条件为：115.5 、30min； 121.5 、20min； 126.5、 15min。,2019,-,91,滤过除菌,利用细菌不能通过致密孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法一般只能除菌，不能除去支原体和病毒。过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22m。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性（如压力维持试验或起泡点试验）。,2019,-,92,辐射灭菌,辐射有两种类型： 一种是电磁波辐射，如紫外线、红外线、微波； 一种是电离辐射，如可引起被照射物电离的X射线、射线等。,2019,-,93,辐射灭菌,紫外线 波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用。 其主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻的两个胸腺嘧 啶共价结合形成二聚体，导致细菌变异和死亡。 电离辐射 高速电子、X射线、射线 微波 波长1mm1m,2019,-,94,超声波灭菌,是一种机械的作用因素，每秒超过2万次振动的声波即为超声波。常用的超声波发生器能产生20-100千赫的声波。可使细菌细胞壁裂解而死亡。,2019,-,95,化学灭菌,利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷（又称氧化乙烯）。环氧乙烷是广谱杀菌剂，能杀灭细菌、芽孢和多种病毒，还能杀死昆虫及虫卵。多用于医疗器械、塑料制品等灭菌(不能用于橡胶和乳胶手套，能将其溶解)。,2019,-,96,消毒,消毒:是指用化学性试剂杀灭致病微生物的过程，消毒时所用的化学试剂称为消毒剂。 消除或抑制微生物污染。 酚类、醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂,2019,-,97,制药工业常用的消毒剂,酒精类 酚类 季铵盐类 液体灭菌剂和杀孢子剂，如：次氯酸钠、二氧化氯、过氧化氢、戊二醛、甲醛和过氧乙酸,2019,-,98,酒精类,特点： 在潮湿环境中浓度高于40%的酒精溶液（体积比）具有清洁卫生的效果。 对干燥表面消毒时，酒精的杀菌效果在体积比为6070%时为最强。 酒精易挥发且易燃，需按易燃易爆物品的保管要求予以保存。 异丙醇 75%水溶液，用于皮肤、器具等消毒。,2019,-,99,酒精类,优点： 以酒精为基质的化合物蒸发后没有任何残留。 局限性: 杀菌能力有限 在洁净室内，酒精类化合物仅能用作卫生洗涤剂或清洁剂，因为它们无法杀灭细菌芽孢。,2019,-,100,酚类化合物,特点: 抑菌谱很广 它们对人体的毒性较低并且对多数材料的腐蚀性相对很小 酚类化合物对有机物具有较好的耐受性 酚类消毒剂会产生残留物，但能被生物降解,2019,-,101,酚类化合物,局限性： 酚类化合物对芽孢的杀伤力不强,2019,-,102,季铵盐类化合物,特点： 表面活性剂能提供良好的除味和清洁能力。 液态下很稳定。 是许多阳离子型去污剂的主要成分。只有阳离子型和兼性去污剂才具有杀菌效力。,2019,-,103,季铵盐类化合物,新洁尔灭（苯扎溴铵） 0.1%水溶液，用于皮肤、粘膜、器具等消毒，有清洁和消毒双重功效，抗菌谱较窄。,2019,-,104,季铵盐类化合物,局限性： 抑菌谱很窄 不能杀孢子 和其他化学试剂反应,2019,-,105,二氧化氯（ClO2 ）,特点： 广谱性，在高浓度下可杀孢子。 作用效果快（在宽的pH范围内，最低有效浓度0.1ppm)。 反应后的副产物亚氯酸盐对人物重大危害。,2019,-,106,二氧化氯,局限性: 需要活化，增加了操作步骤，不稳定 此类产品会破坏酚类化合物 具有腐蚀性和刺激气味 反应活性极强，不能大批量配制,2019,-,107,醛类化合物,特点： 广谱性，可杀孢子 无腐蚀性 醛类主要被用作气雾型消毒剂,2019,-,108,醛类化合物,37%40%甲醛溶液89ml，再加入45g高锰酸钾，密闭1224h ，刺激性强。 戊二醛 2%水溶液，用于空气、器具等消毒。广谱、高效、低毒，可杀芽孢和病毒，毒性较轻。,2019,-,109,醛类化合物,局限性： 需要升温 要求接触时间较长 气体和液体状的甲醛均有毒,2019,-,110,过氧化氢,特点： 快速，广谱性 分解成氢气和水 没有残留物 当浓度高于6%时，即能杀死细菌芽孢,2019,-,111,过氧化氢,局限性： 当浓度高于6%时，才能杀死细菌芽孢,2019,-,112,过氧乙酸,特点： 过氧化合物的杀菌谱非常广，杀菌能力高于过氧化氢，低温下亦有很强的杀菌能力且无任何有毒残留物。 局限性： 气态过氧乙酸（VPPA）易挥发并且有刺激性气体 对土壤/尘土无耐受能力，并且对某些金属具有腐蚀作用,2019,-,113,过氧乙酸,过氧乙酸 a、 0.2%0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c 、1g/m3； 用于器具等消毒，抗菌谱广，可用于皮肤消毒杀灭某些病毒；熏蒸，但性质不稳定。,2019,-,114,过氧化氢和过氧乙酸的混合物,特点： 快速，广谱，可杀孢子 相比氧化剂腐蚀性较小 局限性： 对软物质有腐蚀作用 有刺激性气味 对温度敏感,2019,-,115,次氯酸钠,特点： 广谱，可杀孢子 高浓度可快速杀菌 局限性： 易受pH值、有机物、紫外线和热的影响 有一定的腐蚀性,2019,-,116,细菌对消毒剂有耐受性,具耐受性的细菌和不能完全致死的消毒剂剂量 生物膜的形成 清洁剂之间的交互作用 消毒溶液的剂量,2019,-,117,消毒剂的选择和交替使用,选择消毒剂是务必要考虑的因素： 消毒表面与消毒剂的适应性 产品的完整性 人员的安全性 环境中微生物的菌群 消毒剂的使用方法和使用频率 消毒剂的交替使用,2019,-,118,洁净知识,2019,-,119,空气净化系指创造洁净空气为目的的空气调节措施。 空气净化技术系指为达到净化要求所采用的净化方法。分为工业净化和生物净化。,2019,-,120,空气洁净度 洁净环境中空气的含尘（微粒）多少的程度。 空气洁净级别 以单位体积空气中含粒径0.5m的微粒的最大允许粒数来确定。,2019,-,121,英制标准中把1立方英尺中直径0.5m 的 微粒数作为洁净级别的级别。 100级，指每立方英尺中的粒子数有100个。 1米3 = 35.29英尺3 洁净区：需要对尘粒和微生物含量进行控制的房间（区域）。,2019,-,122,中国 GMP（1998 修订）,2019,-,123,GMP 新版 标准,2019,-,124,新版 GMP 微生物指标,2019,-,125,洁净区的卫生,无菌操作区内不应设置清洗间和带水池的洁具间。 清洁用具应定期清洗或消毒 无菌操作百级区不得设置地漏，无菌操作万级区应避免设置水池和地漏。,2019,-,126,洁净区的卫生物料,严格体现出未经消毒灭菌处理的物料不可能进入无菌室内 经过消毒灭菌处理后的物料应直接出现在无菌操作区域内，不应该再经过非无菌操作区而受到再污染。 所有原辅料、药用包材必须除去外包装，同时清洁内包装表面，进行消毒。,2019,-,127,洁净区的卫生物料,将送入缓冲间，关闭缓冲间门，脱去外包或进行清洁（去尘、擦净）处理，开启紫外灯照射30分钟或在缓冲间用75%乙醇对物料表面进行擦拭消毒。 洁净区接料人从缓冲间取出物料，关缓冲间门，将物料运至暂存间或指定地点。 物料出洁净区时，将物料送入缓冲间，关缓冲间门。 取料人从缓冲间取出物料，关缓冲间门，即可将物料运至指定地点。,2019,-,128,洁净区的卫生器具,进入的工具、仪器、零部件、设备等均应进行