细胞的命运决定PPT精选文档

1,细胞命运的决定,2,动物有机体是由分化细胞(specializedcell)组成分化细胞不仅形态多样，而且功能各异,3,第二节胚胎细胞发育命运的决定,Fateofcells:指正常发育情况下细胞将发育的方向，这种方向可因条件的改变而改变定型(commitment):细胞在分化之前，会发生一些隐蔽的变化，使细胞命运朝特定方向发展。-特化（specification）-决定（determination）,4,定型,两个阶段,特化（早期）,决定（后期）,有条件特化,自主特化,过程,合胞体特化,5,当一个细胞或者组织放在中性环境(neutralenvironment)如培养皿中可以自主分化时，可以说这个细胞或组织已经特化。Theydevelopaccordingtonormalfate.当一个细胞或组织放在胚胎另一个部位可以自主分化时，可以说这个细胞或组织已经决定。细胞特性发生了不可逆的改变，发育潜力已经单一化。,6,Cellfate:specificationanddetermination,7,已特化的细胞或组织的发育命运是可逆的。如果把已特化的细胞或组织移植到胚胎不同的部位，它就会分化成不同的组织。已决定的细胞或组织的发育命运是不可逆的。在细胞发育过程中，定型和分化是两个相互关连的过程。在胚胎早期发育过程中，某一组织或器官的细胞必需先定型，然后才能向预定的方向发育，也就是分化，形成相应的组织或器官。定型之后，分化方向变得不可逆转。,Cellfate:specificationanddetermination,8,早期胚胎中，卵裂球的发育命运没有决定(determination)。随着胚胎的发育，不同卵裂球受本身内在因素及环境条件的影响，其发育命运被确定下来，分化为内胚层、中胚层或外胚层细胞。细胞发育命运的决定是一个渐进的过程,9,两栖动物眼区细胞的潜能随发育时期的不同而改变,胚胎发育早期，细胞的发育潜力更大！,原肠胚中眼区将发育为眼睛。,将原肠胚中眼区细胞移植到神经胚的躯干区，它们将按新部位的命运发育为体节和脊索。,将神经胚中眼区细胞移植到神经胚的躯干区，它们仍将发育为类似于眼的结构。,10,细胞命运的定型的作用方式胞质隔离(cytoplasmicsegregation)：卵裂时，受精卵内特定的细胞质分离到特定的分裂球中，裂球中所含有的特定胞质决定它发育成哪一类细胞，细胞命运的决定与临近的细胞无关。自主特化（autonomousspecification）。以细胞自主特化为特点的胚胎发育模式称为镶嵌型发育(mosaicdevelopment)，或自主性发育，整体胚胎好像是自我分化的各部分的总和。无脊椎动物为主。,11,Weismann理论的核心强调早期的卵裂必须为不对称卵裂。卵裂结果产生的子细胞彼此之间是完全不同的。,12,细胞质中决定因子的定位和细胞不对称分裂使细胞变得不同,细胞分裂时母细胞中的某些分子不均等地分配到两个子细胞中，造成子细胞向不同方向分化。,不对称分裂：生成不同的子细胞,13,细胞质分裂时分配到子细胞中的细胞质不均一,在一定程度上决定了细胞的早期分化。细胞质中决定细胞命运的特殊信号物质称为决定子(determinant),14,Cellfatedetermination,Cytoplasmiclocalizationandasymmetriccelldivision:resultindaughtercellshavingpropertiesdifferentfromeachother;chemicaldifferencesdistributedintheeggintheformofdeterminants(mRNAorproteins,Xenopus-VegT,vegetalregionsofthefertilizedegg),15,Cellfatedetermination,Asymmetricdivision:stemcell:repeateddivision-stemcellsanddifferentiateintoavarietyofcelltypes;inadult-selfrenewal;Pluripotent.,16,海鞘不同区域的卵细胞质分别与未来胚胎特定的发育命运相联系。黄色新月区含有黄色细胞质，称为肌质（myoplasm），将来形成肌细胞。灰色新月区含有灰色细胞质，将来形成脊索和神经管。动物极部分含透明细胞质，将来形成幼虫表皮。灰色卵黄区含大量灰色的卵黄，将来形成幼虫消化道。,17,柄海鞘的镶嵌型发育。当8细胞期胚胎中的4对卵裂球被分离后，每对卵裂球只能发育为部分结构。,18,图1-3挤压实验B4.1肌肉b4.2无肌肉将B4.1黄色新月区胞质挤压入b4.2，b4.2产生肌肉细胞质存在某些形态发生决定子，能够决定细胞朝一个方向分化，形成一定的组织结构。,19,海鞘属于典型的镶嵌型发育胚胎。典型的镶嵌型发育的胚胎还有栉水母(tenophores)、环节动物(annelids)、线虫(nematodes)和软体动物（molluscs）等。另一方面，海胆、两栖类和鱼类等动物的胚胎属于典型的调整型发育胚胎。在这些呈典型的调整型发育的动物卵子细胞质中，也存在着形态发生决定子。形态发生决定子广泛存在于各种动物的卵子细胞质中。,20,胚胎中神经组织是从动物极前面一对裂球（a4.2）和植物极前面一对裂球（A4.1）产生；单独培养时，它们都不能形成神经组织。在海鞘这样严格的镶嵌型发育胚胎中，也存在裂球之间相互作用，决定细胞发育命运的渐进决定作用。,21,形态发生决定子在卵细胞质中呈一定形式分布，受精时发生运动，被分隔到一定区域，并在卵裂时分配到特定的裂球中，决定裂球的发育命运。这一现象称为胞质定域（cytoplasmiclocalization）。胞质定域也称为胞质隔离（cytoplasmicsegregation）或胞质区域化（cytoplasmicregionalization）或胞质重排（cytoplasmicrearrangement）。,胞质定域,22,海鞘（Phallusiamammillata）受精时胞质定域的分离,23,表皮决定子在受精过程中迁移到卵子动物极顶部(apicalregion),卵裂时进入动物极裂球中。内胚层决定子在受精过程中迁移到卵子植物极半球，卵裂时进入植物极裂球中。,24,秀丽新小杆线虫胚胎细胞命运主要由卵内细胞质决定，而不是由邻近细胞间相互作用决定。其胚胎中发现的SKN1蛋白质就很可能是一种“转录因子”样形态发生决定子。SKN-1可能通过激活P1裂球及其产生的EMS和P2两裂球中的某些特定基因，从而决定它们的发育命运。咽部细胞命运可以通过分离到这些裂球中的母源性因子（maternalfactor）自主决定。,25,skn-1突变体中肠和咽部的缺陷,26,形态发生决定子的性质,形态发生决定子可能是某些特异性蛋白质或mRNA等生物大分子物质，它们可以激活或抑制某些基因表达，从而决定细胞的分化方向。形态发生决定子的性质和作用方式在海鞘和果蝇中研究较为深入。,27,海鞘胚胎中：第一类是可以激活某些基因（乙酰胆碱酯酶基因）转录的物质，因为海鞘胚胎中多数组织特异性结构的形成都对转录抑制剂敏感；第二类可能是以mRNA的形式存在于卵内一定的区域，在卵裂时分布到预定的裂球中。探讨胚胎的决定状态，应对决定细胞发育命运的蛋白质或mRNA进行分析鉴别，而不是分析鉴别细胞分化时产生的特异性蛋白质和mRNA。,28,果蝇极质果蝇生殖质（极质）的组分之一是gcl（germcell-less）基因转录的mRNA。另一种可能是Nanos蛋白。NanosmRNA蛋白位于卵子后端，Nanos蛋白是果蝇形成腹部所必需。缺乏Nanos蛋白的极细胞不能迁移到生殖腺中，因而不能发育成生殖细胞。oskar基因在果蝇极质的形成和装配过程中起着极其重要的调控作用。Oskar基因将其mRNA定位于胚胎的后极。至少有8种母体效应基因（maternaleffectgene）的突变会导致果蝇不能形成极质，不能形成生殖细胞。,29,A.staufen基因内应在oskar基因之前行使功能，并影响oskar基因的表达。B.研究明了的影响果蝇生殖细胞发生的6种基因的作用顺序。,30,细胞命运的定型的作用方式胚胎诱导：胚胎发育过程中，相邻细胞或组织之间通过相互作用，决定其中一方或双方的分化方向。有条件特化（conditionalspecification），因为细胞命运取决于与其临近的细胞或组织。以细胞有条件特化为特点的胚胎发育模式称为调整型发育（regulativedevelopment），或依赖型发育。脊椎动物为主。,31,Driesch的海胆胚胎分离发育实验。A，正常长腕幼虫，B，单个胚胎细胞发育而成的长腕幼虫。,32,海胆的调整型发育过程中也存在镶嵌式发育的成分。,33,半个8细胞期海胆胚胎的发育。A，沿赤道面将胚胎分为两半，B，沿动植物极轴将胚胎分为两半。,34,海胆受精卵的不对称性,35,海胆64细胞期胚胎各部分细胞的组合发育（Horstadius,1939）。A，正常发育；B，分离的动物半球的发育；C，动物半球与veg1细胞的组合发育；D，动物半球与veg2细胞的组合发育；E，动物半球与小卵裂球的组合发育。在每一种组合中，都有细胞相互作用而改变原定的发育命运的现象。,36,除去海胆64-细胞期胚胎的受精膜，用细玻璃针把不同的细胞层分开，单独培养或按不同组合方式把分离的细胞层重组培养。分离的动物极半球细胞单独培养时形成具有纤毛的永久囊胚。这样的胚胎称为动物极化胚胎。当把动物极半球细胞和veg1细胞重组时，发育形成的幼虫的动物极化程度相对减小；细胞表面纤毛的发育被抑制，胚胎产生部分消化管。,37,当动物极半球细胞和veg2细胞重组时，形成一个外形正常的长腕幼虫。小裂球比veg2细胞具有更强的抑制动物极化或导致植物极化；veg2细胞又比veg1细胞具有更强的植物极化能力。,38,图1.9Horstadius所示的植物极化梯度,39,海胆胚胎中植物极化（抑制动物极化）的能力是呈梯度分布的，其强度从植物极到动物极逐渐递减。海胆胚胎中不仅存在动物极化因子，而且动物极化因子也呈梯度分布。分离的an1和an2细胞单独培养时都形成永久囊胚。但是，当an1细胞和4个小裂球组合时，可以发育成正常幼虫，而an2细胞只要和2个裂球组合就能发育成正常幼虫。,40,海胆胚胎中植物极化（抑制动物极化）的能力是呈梯度分布的，其强度从植物极到动物极逐渐递减。海胆胚胎中不仅存在动物极化因子，而且动物极化因子也呈梯度分布。分离的an1和an2细胞单独培养时都形成永久囊胚。但是，当an1细胞和4个小裂球组合时，可以发育成正常幼虫，而an2细胞只要和2个裂球组合就能发育成正常幼虫。,41,42,一般来说，在多数无脊椎动物胚胎发育过程中，主要是细胞自主特化在发生作用，细胞有条件特化次之；而在脊椎动物胚胎发育过程中则相反，主要是细胞有条件特化在发生作用，细胞自主特化次之。,43,Cellfatedetermination,Induction:asignalfromonegroupofcellsinfluencesthedevelopmentofanadjacentgroupofcells;细胞间的诱导作用使得细胞之间互不相同。,Permissiveinduction:acellmakesonlyonekindofresponsetoasignalatagivenlevel.Instructiveinduction:thecellresponddifferentlytodifferentconcentrationsofthesignal.,44,细胞间的相互诱导来自外部的信号使一群细胞中的一个或更多的成员进入不同的发育途径。,细胞被导入新的发育途径,45,诱导作用可使细胞互为不同,扩散性信号分子,跨膜蛋白的直接互作,间隙连接,信号传导特点,传递距离有限并非所有细胞都能对某种信号发生反应。不同类型细胞可对同一信号发生不同反应,e.g.,乙酰胆碱使心肌收缩频率下降，但促使唾液腺分泌唾液。,46,Signaltransduction,47,相邻细胞相互作用决定分化方向,48,图式建成依赖于细胞对位置信息的译读,每个细胞位置信息：获得位置值(positionalvalue)，这个值决定它的位置(两端的边界)细胞译读位置信息,法国国旗模式,49,细胞如何知道它们的positionalvalue?由形态发生素梯度产生Morphogen:某种化学物质浓度变化影响到图式形成.Theconcentrationofsubstanceateitherendofthegradientmustremaindifferentfromeachotherbutconstant,thusfixingboundary,50,Frenchflagmodel,Singlegradient,51,形态发生素梯度Morphogen(诱导相邻细胞发育的信号分子,可扩散的蛋白质,转录因子)常在轴一端合成,扩散,细胞沿轴受到不同的Morphogen的浓度,从而在不同浓度下诱导不同基因表达图。分泌成形素的一组特殊细胞称为组织者(organizer)。,52,形态发生素梯度Morphogeneticgradient:某些因子沿体轴的分布呈现一个浓度梯度,这些因子在每一局部的水平决定着这一区域的命运或反应。,53,Bicoid:thefirstmorphogen,54,GeneandDevelopment,母体基因,间隙基因,成对基因,体节极性基因,同源异形基因,母体基因沿胚的前后轴形成浓度梯度，决定了胚的前后位置和头尾区域；控制其它基因的表达：,55,Positionalinformationistranslatedintotheactivationandrepressionoftargetgenes,Responsestomorphogengradients:activation/repressionoftargetgenes;cellproliferationandgrowth;morphogeneticmovements,56,Differenttargetshavedifferentaffinitiesforeffectors,57,位置信息可以产生无数的模式,58,旁侧抑制产生间隔模式,Lateralinhibition:mechanismthatgivesrisetospacing;thedifferentiatingcellssecretinhibitorymolecule.E.g.abirdsskin,Lateralinhibitiongiveaspacingpattern,59,相邻细胞的旁侧抑制使已分化的细胞阻止临近细胞朝相同方向分化,可避免器官重复发育。,分化细胞发出更多抑制信号,周围细胞分化受到抑制,60,Cellfatedetermination,Embryonicdevelopment:程序是逐步产生(generative),不是预先完整描述好的.Itismoreliketheinstructionsformakingastructurebypaperfoldingthanablueprint.多种途径保障发育的可靠性:如双腿保持同样的长度Redundancy(冗余):whentherearetwoormorewaysofcarryingoutaparticularprocess;ifonefailsforanyreasonanotherwillstillfunction.Negativefeedback:theendproductofaprocessinhibitsanearlierstageandthuskeepsthelevelsofproductconstant.Thecomplexityofthenetworkofgeneactivity:robustandrelativeinsensitivetosmallchange,61,发育命运图,对每一个卵裂球进行标记，通过追踪不同卵裂球的发育过程，可在囊胚表面划定不同的区域，显示每一区域细胞的发育趋向，这样的分区图称为发育命运图（fatemap）。,62,Fatemaps,Earlygastrula,10hr,Blastoporeformsatpredictedposition,Fertilizedeggs,markedwithnilebluedye,32cell,blastula,Lategastrula,Cellsinjectedat32cellstagewithfluorescentdextrans,aslineagetracers,63,爪蟾早期胚胎发育命运图的确定。荧光标记的C3裂球在尾芽期胚胎中形成一侧的中胚层细胞。,64,爪蟾晚期囊胚的发育命运图上：侧面观，外胚层形成上皮和神经系统，沿着背腹轴的带状区域为中胚层，由它形成脊索、体节、心脏、肾和血液。爪蟾中胚层表面还覆盖有一薄层外胚层。下：囊胚背面观,65,命运图并不是表示早期胚胎中各区域的细胞发育命运已经确定了，它在很大程度上反映的是胚胎在继续发育过程各区域细胞的运动趋势，并不是细胞的分化情况。特化图（specificationmap）却可以在一定程度上反映出细胞的分化情况。特化图是将囊胚切成小块，每小块分别在简单培养基中培养，观察它们形成哪一种组织。特化图与命运图之间有很大程度的相似性，但在外胚层和中胚层存在很大的差别。,66,爪蟾晚期囊胚的特化图外胚层区细胞还没有分化为预定神经细胞，中胚层区细胞还没有分化为预定肌肉细胞。,67,爪蟾囊胚命运图和特化图的比较。脊索的命运图和特化图基本相当，其他中胚层区的特化还没有发生，来自Spemman组织者以及腹方的信号将发挥作用