中西医结合思路与方法学课件

1、中西医结合思路与方法学中西医结合思路与方法学 第五章第五章 中西医结合基本方法中西医结合基本方法 n第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n第二节第二节 动物模型研究方法动物模型研究方法 n第三节第三节 中西医结合临床疗效评价方法中西医结合临床疗效评价方法 n第四节第四节 病证药结合研究方法病证药结合研究方法 n第五节第五节 多学科研究方法多学科研究方法 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n一、概述一、概述 n二、中西医结合实验研究常用方法二、中西医结合实验研究常用方法 n实验研究方法：科学技术人员根据研究实验研究方法：科学技术人员根据研究 的对象、目的、任务，利用科学仪器设的对象、目

2、的、任务，利用科学仪器设 备，人为控制或模拟人类的生理现象、备，人为控制或模拟人类的生理现象、 疾病过程，在一定条件下排除干扰，突疾病过程，在一定条件下排除干扰，突 出主要实验因素，去研究和发现问题、出主要实验因素，去研究和发现问题、 进而解决问题的方法。进而解决问题的方法。 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 概概 述述 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 实验方法六个要素实验方法六个要素 n 有明确研究对象与研究目的有明确研究对象与研究目的 n 有科学的实验程序设计有科学的实验程序设计 n 应用专门的实验仪器设备设计应用专门的实验仪器设备设计 n 人为模拟某种作用或过程人为模拟某种

3、作用或过程 n 严格控制实验条件（排除无关严格控制实验条件（排除无关/干扰因素，干扰因素， 突出实验因素）过程突出实验因素）过程 n 有可观的（定性、定量）观察指标，可明有可观的（定性、定量）观察指标，可明 确界定并记录之结果。确界定并记录之结果。 概概 述述 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n目的目的 n对于未知领域（初试、盲试）发现某种对于未知领域（初试、盲试）发现某种 物质、现象、揭示规律物质、现象、揭示规律 n对于预见、估计或有争议观点证明研究对于预见、估计或有争议观点证明研究 对象的存在（证实）、不存在（证伪）对象的存在（证实）、不存在（证伪） n对于已知事物之间的比较选择最

4、佳物质、对于已知事物之间的比较选择最佳物质、 数量、作用、方法等。数量、作用、方法等。 概概 述述 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n意义意义 n是客观地搜集科学事实，获得感性材料是客观地搜集科学事实，获得感性材料 的过程。的过程。 n是形成、发展、检验科学理论的实践基是形成、发展、检验科学理论的实践基 础之一。础之一。 n是以发现新事实或解释已发现的事实。是以发现新事实或解释已发现的事实。 n可以验证理论假说的客观性，在一定范可以验证理论假说的客观性，在一定范 围内予以肯定或否定。围内予以肯定或否定。 概概 述述 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n评价评价 n （1）优点）优

5、点 n充分应用现代科技条件能延长人的感观。充分应用现代科技条件能延长人的感观。 n 变多因素为单因素，纯化对象。变多因素为单因素，纯化对象。 n安全、低耗、易控制。安全、低耗、易控制。 n可重复性大、可反复进行。可重复性大、可反复进行。 概概 述述 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n评价评价 n（2）缺点）缺点 n 把研究对象认为地从整体中分割出来，把研究对象认为地从整体中分割出来， 不便观察事物的整体联系，因而实验结不便观察事物的整体联系，因而实验结 果具有相对性。果具有相对性。 概概 述述 举 例 n西医治疗多惯用西医治疗多惯用“缺什么补什么缺什么补什么”的的“替代疗替代疗 法法”

6、，如缺激素补激素，缺血补血，缺氧输氧等。，如缺激素补激素，缺血补血，缺氧输氧等。 中医则对中医则对“不足不足”多采取多采取“扶正扶正”调动机体固有调动机体固有 的内部调节机制的内部调节机制“调动疗法调动疗法”。 n体内激素水平低下体内激素水平低下 n西医治疗：补充外源性激素，甚至终生替代。西医治疗：补充外源性激素，甚至终生替代。 n中医治疗中医治疗 ：给补肾中药改善机体下丘脑垂体肾上：给补肾中药改善机体下丘脑垂体肾上 腺轴之功能，自动调节激素水平。腺轴之功能，自动调节激素水平。 n中西医结合治疗中西医结合治疗 ：激素加补肾中药减少激素用量、：激素加补肾中药减少激素用量、 副作用，帮助激素撤退停

7、药。副作用，帮助激素撤退停药。 举 例 n失血（急性）失血（急性） n西医治疗：输液输血。西医治疗：输液输血。 n中医治疗中医治疗 ：人参、归芪补气生血。：人参、归芪补气生血。 n中西医结合治疗中西医结合治疗 ：输液输血加参芪标本兼治。：输液输血加参芪标本兼治。 举 例 n脑动脉硬化症（脑血栓、缺氧）脑动脉硬化症（脑血栓、缺氧） n西医治疗西医治疗 ：高压氧治疗缺点血浆前列环素下降（有抗血栓高压氧治疗缺点血浆前列环素下降（有抗血栓 形成作用）；载脂蛋白形成作用）；载脂蛋白B100上升（有促动脉硬化作用）氧自由基上升（有促动脉硬化作用）氧自由基 损伤产物上升，超氧化物歧化酶损伤产物上升，超氧化物

8、歧化酶SOD下降。下降。 n中医治疗中医治疗 ：补阳还五汤补气活血。：补阳还五汤补气活血。 n中西医结合治疗中西医结合治疗 ：高压氧加补阳还五汤血浆前列环素上升；高压氧加补阳还五汤血浆前列环素上升； 载脂蛋白载脂蛋白B100下降；载脂蛋白下降；载脂蛋白A1上升；提高上升；提高SOD抗自由基损伤作用调动抗自由基损伤作用调动 体内对抗自由基损伤机会体内对抗自由基损伤机会 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n指导思想指导思想 n遵循中西医理论体系，着重探讨中医和遵循中西医理论体系，着重探讨中医和 西医之间的异同点，探索中西医之间的西医之间的异同点，探索中西医之间的 结合途径，逐步形成中西医结合

9、的新见结合途径，逐步形成中西医结合的新见 解和理论。解和理论。 指导思想、基本任务及注意点指导思想、基本任务及注意点 n作用作用 n可以克服中医药实践的局限性可以克服中医药实践的局限性 n检验及进一步发展中医药理论检验及进一步发展中医药理论 n可以提高中医临床效果检验速度和准确可以提高中医临床效果检验速度和准确 性性 n加速中医药规范化加速中医药规范化 n为中医药学提供新的事实材料为中医药学提供新的事实材料 指导思想、基本任务及注意点指导思想、基本任务及注意点 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 n注意点注意点 n1.要以中医药基本理论为指导要以中医药基本理论为指导 n2.确立中西医结合思

10、维方式确立中西医结合思维方式 n3.要把握现代医药学的发展趋势要把握现代医药学的发展趋势 n4.要寻找中西医结合的结合点（契合点）。要寻找中西医结合的结合点（契合点）。 n5.要注意对传统理论的阐释和发展要注意对传统理论的阐释和发展 指导思想、基本任务及注意点指导思想、基本任务及注意点 第一节第一节 实验研究方法实验研究方法 1、以中医药基本理论为指导、以中医药基本理论为指导 n 中西医结合研究采取科学实验进行中西医结合研究采取科学实验进行中医客中医客 观化研究、中医生理病理研究、中医现代观化研究、中医生理病理研究、中医现代 化研究化研究，均须循中医之理，突出中医特点，均须循中医之理，突出中医

11、特点， 不能以西医学的研究方法把中西医结合研不能以西医学的研究方法把中西医结合研 究引入究引入“还原论还原论”的枢臼中。的枢臼中。 2、确立中西医结合思维方式、确立中西医结合思维方式 n思维方式思维方式观察事物、分析与解决问观察事物、分析与解决问 题的角度、形式和方法。它可以支配研题的角度、形式和方法。它可以支配研 究者的思考路线与实践方式。并体现研究者的思考路线与实践方式。并体现研 究者的行为风格。究者的行为风格。 n科学的思维方式往往可以引导研究工作科学的思维方式往往可以引导研究工作 者正确选题、合理的实验设计、对实验者正确选题、合理的实验设计、对实验 结果能合理分析推导；其实验成果往往结

12、果能合理分析推导；其实验成果往往 是具有积极意义的。是具有积极意义的。 实验研究的思维方式中西医结合与西医的区别实验研究的思维方式中西医结合与西医的区别 n生理病理研究：生理病理研究：观察重点应尽量着重整体观察观察重点应尽量着重整体观察 （不是局部（不是局部/离体观察）离体观察）设计整体慢性实验设计整体慢性实验 n证与证候、疾病研究证与证候、疾病研究：观察方法应采用：观察方法应采用“多输入多输入- 多输出多输出”的系统方法的系统方法多指标与特异性指标的多指标与特异性指标的 选择（微观指标选择（微观指标/宏观指标双向）宏观指标双向） n病情观察：病情观察：观察结果应从动态分析和观察结果应从动态分

13、析和“多输出多输出” 信息的综合分析来判断信息的综合分析来判断 n药物与方剂研究：药物与方剂研究：在对含有单体的复杂体系研究在对含有单体的复杂体系研究 时，在研究单体特征时，应侧重总体特征与规律时，在研究单体特征时，应侧重总体特征与规律 的研究的研究 中西医结合实验研究确立的思维方式中西医结合实验研究确立的思维方式 n强调观察整体强调观察整体 n立足在分析基础上的综合立足在分析基础上的综合 n强调强调“三个结合三个结合”：宏观与微观：宏观与微观 整体与局部整体与局部 辨证与辨病辨证与辨病 3、把握现代医药学的发展趋势、把握现代医药学的发展趋势 n医学科学的现代发展有两个转变医学科学的现代发展有

14、两个转变医学模式和药学模式的转变医学模式和药学模式的转变 医学医学 模式模式 生生 物物 生物心理社会生物心理社会 自然工程技术自然工程技术 药学药学 模式模式 生物药物生物药物 平衡调节平衡调节 现代整体医学现代整体医学 重视自然疗法重视自然疗法 为人类健康建为人类健康建 造造“绿色通道绿色通道” 中医学在这一大趋势中存在明显优势，中西医结合研究应把握中医学在这一大趋势中存在明显优势，中西医结合研究应把握 这一趋势，务必使研究成果集中中、西医学优势而发展之。这一趋势，务必使研究成果集中中、西医学优势而发展之。 化学化学 药物药物 抑杀抑杀 替代替代 4、寻找中西医结合的结合点（契合点）、寻找

15、中西医结合的结合点（契合点） 一是共同一是共同 结合点结合点 二是互补二是互补 结合点结合点 中医基础理论：以状态为中心，着力于状态的中医基础理论：以状态为中心，着力于状态的 调整控制（状态识别与整体调控）调整控制（状态识别与整体调控） 西医免疫学说：免疫状态识别强调整体联系和动西医免疫学说：免疫状态识别强调整体联系和动 态变化的免疫网络理论态变化的免疫网络理论 中药归经理论：中药作用所及中药归经理论：中药作用所及/中药效应的定向中药效应的定向 定位（归经是功能与作用部位的综合）定位（归经是功能与作用部位的综合） 药物受体理论：西药作用于效应细胞的受体部位药物受体理论：西药作用于效应细胞的受体

16、部位 （阻断（阻断/兴奋）（也是功能与部位的综合）兴奋）（也是功能与部位的综合） 有共同点有共同点类似靠近类似靠近 5、注意对传统理论的阐释和发展、注意对传统理论的阐释和发展 n实验研究的一个重要任务，是通过符合实验研究的一个重要任务，是通过符合 中西医结合原则和宗旨的实验方法，为中西医结合原则和宗旨的实验方法，为 传统（或经典）的已证明是正确科学的传统（或经典）的已证明是正确科学的 理论提供科学阐释，明确其物质基础，理论提供科学阐释，明确其物质基础， 建立可重复验证的客观指标，用现代语建立可重复验证的客观指标，用现代语 言描述，从而发展了中医理论。言描述，从而发展了中医理论。 寒热本质寒热本

17、质 的研究的研究 寒证寒证机能水平偏低，反应缓慢机能水平偏低，反应缓慢 热证热证机能偏亢，反应迅速机能偏亢，反应迅速 实热证实热证早期交感神经、垂体早期交感神经、垂体-肾上肾上 腺素系统机能亢进，随之垂体腺素系统机能亢进，随之垂体-甲状腺甲状腺 系统亢进系统亢进 虚热证虚热证垂体垂体-甲状腺系统机能活跃甲状腺系统机能活跃 虚证研究虚证研究 （阴虚阳虚）（阴虚阳虚） 体内微量元素紊乱，锌含量下降，铜含量上体内微量元素紊乱，锌含量下降，铜含量上 升，两者比值下降。补肾中药含丰富的锌。升，两者比值下降。补肾中药含丰富的锌。 作用部位在中枢，作用部位在中枢， 与神经肽类神经递与神经肽类神经递 质有关质

18、有关 5、注意对传统理论的阐释和发展、注意对传统理论的阐释和发展 肾肾 开开 窍窍 于于 耳耳 研研 究究 通过对肾上腺皮质激素、甲状腺激素、肾虚动物实验和补肾中药通过对肾上腺皮质激素、甲状腺激素、肾虚动物实验和补肾中药 的研究，认为：的研究，认为： 肾上腺皮质功能是中医肾功能的重要组成部分；肾上腺皮质功能是中医肾功能的重要组成部分； 内耳（耳蜗内耳（耳蜗/前庭器）组织中含有醛固酮受体；前庭器）组织中含有醛固酮受体； 肾上腺盐皮质激素肾上腺盐皮质激素-醛固酮可能是醛固酮可能是“肾肾-耳耳”联系的物质基联系的物质基 础；础； 甲状腺功能也是中医肾本质内容之一；甲状腺功能也是中医肾本质内容之一；

19、甲状腺激素是维持听觉功能的重要因素；甲状腺激素是维持听觉功能的重要因素； 甲状腺激素也是甲状腺激素也是“肾肾-耳耳”联系的物质之一；联系的物质之一； 传统补肾中药方（六味地黄汤）可预防传统补肾中药方（六味地黄汤）可预防/减轻实验性耳聋。减轻实验性耳聋。 5、注意对传统理论的阐释和发展、注意对传统理论的阐释和发展 n（一）微循环方法（一）微循环方法 n（二）超微结构研究方法（二）超微结构研究方法 n（三）膜学研究方法（三）膜学研究方法 n（四）血液流变方法（四）血液流变方法 n（五）电生理研究方法（五）电生理研究方法 n（六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 n（七）免疫学研究方法（七）免疫学

20、研究方法 n（八）组织培养研究方法（八）组织培养研究方法 第二节第二节 实验研究方法实验研究方法 n（九）分子生物学研究方法（九）分子生物学研究方法 n（十）核技术研究方法（十）核技术研究方法 n（十一）影像学研究方法（十一）影像学研究方法 n（十二）基因组学研究方法（十二）基因组学研究方法 n（十三）蛋白质组研究方法（十三）蛋白质组研究方法 n（十四）代谢组学研究方法（十四）代谢组学研究方法 第二节第二节 实验研究方法实验研究方法 （一）微循环方法（一）微循环方法 微循环基本结构：微微循环基本结构：微A后微后微A毛细毛细 血管前括约肌血管前括约肌毛细血管床毛细血管床毛细血管毛细血管 后微后微

21、V微微V及微及微A短路支。短路支。 凡是具有血瘀病理和病证（气滞、气虚、凡是具有血瘀病理和病证（气滞、气虚、 血涩、血瘀等）都可在不同程度上显现出血涩、血瘀等）都可在不同程度上显现出 微循环的改变微循环的改变 （一）微循环方法（一）微循环方法 n1、微循环研究在现代中医学中的应用、微循环研究在现代中医学中的应用 （1）血瘀本质）血瘀本质 研究中作为血瘀研究中作为血瘀 病理的客观指标病理的客观指标 血色黯红、黯紫血色黯红、黯紫 异形微血管襻增多、微血管膨大、异形微血管襻增多、微血管膨大、 变形。变形。 血流减慢、淤积、血细胞聚集。血流减慢、淤积、血细胞聚集。 微血管周围渗出、出血，对寒冷微血管周

22、围渗出、出血，对寒冷 反应敏感。反应敏感。 （一）微循环方法（一）微循环方法 n1、微循环研究在现代中医学中的应用、微循环研究在现代中医学中的应用 （2）作为中医辨证与临床分型的协助、参考指标）作为中医辨证与临床分型的协助、参考指标 肝阳上亢肝阳上亢舌乳头显著增大，微血管丛开放增多，微血管扩张，血舌乳头显著增大，微血管丛开放增多，微血管扩张，血 流加快（肝炎偏亢，气血上冲）流加快（肝炎偏亢，气血上冲） 阴虚阳亢证阴虚阳亢证舌乳头增大，管襻开放增多，微血管异形，血流淤滞舌乳头增大，管襻开放增多，微血管异形，血流淤滞 （体现其虚实夹杂病理）（体现其虚实夹杂病理） 阴阳两虚证阴阳两虚证舌乳头缩减，管

23、襻纤细缩短，血流缓慢（反映气血阴舌乳头缩减，管襻纤细缩短，血流缓慢（反映气血阴 阳不足病理状态）阳不足病理状态） 痰湿壅盛痰湿壅盛微血管异形，红细胞聚集，血流缓慢，微血管渗出，血微血管异形，红细胞聚集，血流缓慢，微血管渗出，血 色黯红等（痰湿阻络，气血瘀滞）色黯红等（痰湿阻络，气血瘀滞） 高血压病：甲皱微循环血管口径缩小，管襻畸形率增加阴虚阳亢高血压病：甲皱微循环血管口径缩小，管襻畸形率增加阴虚阳亢 型（偏阴虚型（偏阴虚/偏阳亢）偏阳亢）微血流淤滞较轻；非阴虚阳亢型（多微血流淤滞较轻；非阴虚阳亢型（多 为阴阳两虚为阴阳两虚/痰湿壅盛痰湿壅盛微血流淤滞严重）微血流淤滞严重） （一）微循环方法（一

24、）微循环方法 n1、微循环研究在现代中医学中的应用、微循环研究在现代中医学中的应用 （3）为舌诊客观化提供微观依据（对爪甲色诊也有同样意义）为舌诊客观化提供微观依据（对爪甲色诊也有同样意义） 3种舌质舌尖微循环改变（是舌质形成的病理基础之一）种舌质舌尖微循环改变（是舌质形成的病理基础之一） 淡白舌淡白舌微血管丛减少，管襻口径变细，血色淡红血流呈低灌注微血管丛减少，管襻口径变细，血色淡红血流呈低灌注 状态，血色淡。状态，血色淡。 红绛舌红绛舌微血管丛扩张，微血流流速、流态变异。微血管丛扩张，微血流流速、流态变异。 青紫舌青紫舌异形微血管丛、淤血微血管丛、微血管周围渗出与出血，异形微血管丛、淤血微

25、血管丛、微血管周围渗出与出血， 血色黯红。血色黯红。 由淡红舌由淡红舌红绛舌红绛舌青紫舌，其舌质蕈状乳头中呈树枝形青紫舌，其舌质蕈状乳头中呈树枝形/花瓣花瓣 形的微血管丛（属正常形态）比例递减；而呈网孔形形的微血管丛（属正常形态）比例递减；而呈网孔形/发团形的微血发团形的微血 管丛（属管襻排列紊乱）比例递增。而微观变异的严重程度亦渐剧管丛（属管襻排列紊乱）比例递增。而微观变异的严重程度亦渐剧 （一）微循环方法（一）微循环方法 n1、微循环研究在现代中医学中的应用、微循环研究在现代中医学中的应用 （4）经络与微循环相关性研究经络与微循环相关性研究 督脉循行线上的命门、脊中、至阳以及身柱四个督脉循

26、行线上的命门、脊中、至阳以及身柱四个 穴位，其左右两侧旁开穴位，其左右两侧旁开1cm非经对照部位的表非经对照部位的表 面及深部组织的血流灌注量面及深部组织的血流灌注量 ：经脉线上的微循：经脉线上的微循 环血流灌注均高于两侧旁开对照部位；认为腧穴环血流灌注均高于两侧旁开对照部位；认为腧穴 的实质是具有特异性舒缩频率的微循环单元的实质是具有特异性舒缩频率的微循环单元 （一）微循环方法（一）微循环方法 n 1、微循环研究在现代中医学中的应用、微循环研究在现代中医学中的应用 （5）作为疗效判断的定性）作为疗效判断的定性/定量观察指标定量观察指标 通过补肾中药或活血化瘀、行气导滞、化痰通络等中药治疗，通

27、过补肾中药或活血化瘀、行气导滞、化痰通络等中药治疗， 其疗效可通过微循环状态改善得到反映其疗效可通过微循环状态改善得到反映 如：丹参、冠心如：丹参、冠心号治冠心病、糖尿病、脑血管病、慢肝等号治冠心病、糖尿病、脑血管病、慢肝等 微血管清晰、流速恢复正常、红细胞解聚等微血管清晰、流速恢复正常、红细胞解聚等 川芎嗪治疗脑血栓川芎嗪治疗脑血栓瘫侧缩短的微管襻变大增多，渗出减少。瘫侧缩短的微管襻变大增多，渗出减少。 补肾治疗矽肺补肾治疗矽肺微血管清晰度好转，管襻增长，乳头下微血管清晰度好转，管襻增长，乳头下V丛增丛增 加，甲皱循环改善。加，甲皱循环改善。 （一）微循环方法（一）微循环方法 n2、常用的微

28、循环研究方法、常用的微循环研究方法 微循环研究方法主要有形态学方法、生化学方法和生理学方法，微循环研究方法主要有形态学方法、生化学方法和生理学方法， 目前中医现代化研究较多采用生理学方法和形态学方法目前中医现代化研究较多采用生理学方法和形态学方法 （1）间接生理学方法：通过测量微循环经外的机体变化来）间接生理学方法：通过测量微循环经外的机体变化来 推导局部微循环变化。具体观察项目推导局部微循环变化。具体观察项目容积脉波描记、组容积脉波描记、组 织血流量、体表温度、血压、脉搏、呼吸频率与幅度，以及织血流量、体表温度、血压、脉搏、呼吸频率与幅度，以及 中医望诊察皮肤色泽、神志等。中医望诊察皮肤色泽

29、、神志等。 （一）微循环方法（一）微循环方法 n2、常用的微循环研究方法、常用的微循环研究方法 （2）直接生理学方法：在人体（动物）知觉部位，借助显微镜，）直接生理学方法：在人体（动物）知觉部位，借助显微镜， 直接观察活体微循环的形态、分布、微流速度以及其动态变化。直接观察活体微循环的形态、分布、微流速度以及其动态变化。 观察部位观察部位 手指甲襞手指甲襞（甲皱）甲下及甲周微血管分布及充盈状态 口唇粘膜口唇粘膜 鼻粘膜鼻粘膜：使用粘膜微循环显微镜直接观察粘膜微血管 皮肤微循环皮肤微循环（血流量）测局部温差/133氙检测其廓清速率 人体观察 眼球结眼球结：膜球结膜透明，微血管沿白色巩膜表面分布，

30、对比清晰，无损伤， 适用于慢性实验 耳廓微循环耳廓微循环：在透射光下观察/测耳廓温差/兔耳开窗术观察微循环形成各项指标。 地鼠颊囊地鼠颊囊：制备容易，薄而光亮，血管平行致密局部滴药反应迅速 其他有创性观察其他有创性观察：肠系膜/软脑膜/肝/肾微循环（连体置外观察） 动物实验 （二）超微结构研究方法（二）超微结构研究方法 n1超微结构方法与中医临床研究超微结构方法与中医临床研究 n病理舌象：厚苔的形成与上皮增殖加速、 细胞退化过程延迟、细胞间结合力增加 和剥脱减慢有一定关系。这些因素是相 互配合的，其中以退化延迟、剥脱减慢 两个因素最重要。 n2超微结构方法与中医药实验研究超微结构方法与中医药实

31、验研究 n中药大黄造成的小白鼠中药大黄造成的小白鼠“虚证虚证”模型，模型， 在心、肾能引起超微结构的变化。在心、肾能引起超微结构的变化。 n利用中药大黄制作大鼠慢传输型便秘动利用中药大黄制作大鼠慢传输型便秘动 物模型，电镜下结肠肌间神经丛物模型，电镜下结肠肌间神经丛cajal间间 质细胞消失，神经元、胶质细胞退行性质细胞消失，神经元、胶质细胞退行性 变，平滑肌细胞的肌纤维结构破坏，大变，平滑肌细胞的肌纤维结构破坏，大 量嗜酸性粒细胞浸润。量嗜酸性粒细胞浸润。 （二）超微结构研究方法（二）超微结构研究方法 （三）膜学研究方法（三）膜学研究方法 n生物膜是由脂质、蛋白质、糖等物质共同组成生物膜是由

32、脂质、蛋白质、糖等物质共同组成 的一种双分子膜结构，主要包括细胞的作用膜的一种双分子膜结构，主要包括细胞的作用膜 和细胞内的具有多种特定功能的细胞器。和细胞内的具有多种特定功能的细胞器。 n生物膜的研究与构成生命现象本质的许多基本生物膜的研究与构成生命现象本质的许多基本 问题，如能量转换，代谢的调节控制，细胞识问题，如能量转换，代谢的调节控制，细胞识 别，免疫、激素和药物作用，神经传导，物质别，免疫、激素和药物作用，神经传导，物质 转运以及细胞癌变有密切关系。转运以及细胞癌变有密切关系。 （三）膜学研究方法（三）膜学研究方法 n中医中医“证证”的实质探索的实质探索 ： n血瘀证与红细胞膜的研究

33、血瘀证与红细胞膜的研究 ：血瘀证患者红细：血瘀证患者红细 胞膜的流动性减少，可使红细胞变形性降低，胞膜的流动性减少，可使红细胞变形性降低， 从而导致微循环障碍，并容易形成微血栓。从而导致微循环障碍，并容易形成微血栓。 n药物作用机制：补益中药可以通过降低白血病药物作用机制：补益中药可以通过降低白血病 淋巴细胞膜的流动性，改善膜结构与功能，调淋巴细胞膜的流动性，改善膜结构与功能，调 节膜胆固醇节膜胆固醇/磷脂分子比值而发挥治疗作用。磷脂分子比值而发挥治疗作用。 （三）膜学研究方法（三）膜学研究方法 n中药制剂脂微球中药制剂脂微球 n设想把抗瘤中药封入脂微囊球膜内之后，设想把抗瘤中药封入脂微囊球膜

34、内之后， 再通过脂微球与癌细胞融合把中药注入再通过脂微球与癌细胞融合把中药注入 到癌细胞中，可以达到治疗癌肿的目的。到癌细胞中，可以达到治疗癌肿的目的。 （四）血液流变方法（四）血液流变方法 血液流变：血液（流体）在血管系统内流动、变化规律。血液流变：血液（流体）在血管系统内流动、变化规律。 血液流变学血液流变学 临床血液流变学临床血液流变学研究不同临床病理状况研究不同临床病理状况 下的流变规律。下的流变规律。 血液微观流变学血液微观流变学研究血液微结构（细胞研究血液微结构（细胞/ 胶体胶体/分子）与血液流动变化的关系。分子）与血液流动变化的关系。 血液流变方法血液流变方法 检测方法检测方法

35、采血采血实验室标准化条件下检测各项流变学指标：实验室标准化条件下检测各项流变学指标： 血液粘度、血液粘度、 血浆粘度、血细胞比容、红细胞聚集性血浆粘度、血细胞比容、红细胞聚集性(包括血沉包括血沉)、红细胞的变、红细胞的变 形能力、红细胞或血小板的表面电荷形能力、红细胞或血小板的表面电荷(细胞电泳细胞电泳)、血小板的聚集、血小板的聚集 活性、血液内生化大分子含量活性、血液内生化大分子含量(纤维蛋白质、白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白质、白蛋白、免疫球蛋白、 血浆脂类血浆脂类)等含量。等含量。 研究应用研究应用 常作为解释不同疾病过程存在高粘滞综合征的病理状常作为解释不同疾病过程存在高粘滞综合征的病理

36、状 况，以及中西医结合治疗后的疗效情况。况，以及中西医结合治疗后的疗效情况。 血液流变方法血液流变方法 1、证实血瘀证病人血液粘度普遍较正常为高（共性规律）、证实血瘀证病人血液粘度普遍较正常为高（共性规律） 2、8项流变学指标检测预报缺血性中风、冠心病，约有项流变学指标检测预报缺血性中风、冠心病，约有80% 左右的符合率左右的符合率 3、高分子葡聚糖引起家兔实验性高粘滞综合征，测定活血化、高分子葡聚糖引起家兔实验性高粘滞综合征，测定活血化 瘀中药（益母草、郁金、桃仁、红花）对血液粘度的影响。瘀中药（益母草、郁金、桃仁、红花）对血液粘度的影响。 实实 例例 （五）电生理学研究方法（五）电生理学研

37、究方法 n电生理学是研究有机体中的电现象和电电生理学是研究有机体中的电现象和电 流对于活体的作用的科学。流对于活体的作用的科学。 n在针灸原理研究、中药药理研究等领域在针灸原理研究、中药药理研究等领域 中的应用。中的应用。 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 病理学病理学关于疾病发生、发展的原因、关于疾病发生、发展的原因、 规律反其机理的医学基础学科。规律反其机理的医学基础学科。 广义病理学广义病理学包括病理生理、疾病过程机包括病理生理、疾病过程机 理、组织病理等。理、组织病理等。 中西医结合病理学研究中西医结合病理学研究采取病理学客采取病理学客 观方法研究中医病证的病理基础和治观方法研

38、究中医病证的病理基础和治 病原理。病原理。 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 1、运用现代病理学的理论观点阐释中医八纲病理生理。、运用现代病理学的理论观点阐释中医八纲病理生理。 “凡厥者，阴阳之气不相顺接，便为厥凡厥者，阴阳之气不相顺接，便为厥”（伤寒论伤寒论） 有人从能量代谢病理解释厥证病机：体内物质（阴）缺失，有人从能量代谢病理解释厥证病机：体内物质（阴）缺失， 不能进行氧化供能（阳），能量代谢低下（阴阳虚衰）；正不能进行氧化供能（阳），能量代谢低下（阴阳虚衰）；正 常的氧化磷酸化生成常的氧化磷酸化生成ATP过程受抑制（阴阳不能相互为用过程受抑制（阴阳不能相互为用 阴阳不相顺接，失

39、去气化功能阴阳不相顺接，失去气化功能脏腑功能低下）乃成厥证。脏腑功能低下）乃成厥证。 （李恩（李恩.中西医结合思路方法与实践）中西医结合思路方法与实践） 热证病理，与高级神经过度兴奋，交感神经紧张度上升有关。热证病理，与高级神经过度兴奋，交感神经紧张度上升有关。 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 如最近出版的上海中草药大学匡调元主编的现代中医病理学基础中有： 表证表证：出现皮肤、皮下、肌肉及其间神经、血管症状；又不：出现皮肤、皮下、肌肉及其间神经、血管症状；又不 具具 备各器官系统机能或代谢的比较严重而深刻的障碍。（体备各器官系统机能或代谢的比较严重而深刻的障碍。（体 表表A收缩、植物

40、收缩、植物N紊乱紊乱） 里证里证：温热调节中枢、消化、呼吸、循环等系统功能代谢比较：温热调节中枢、消化、呼吸、循环等系统功能代谢比较 严重而深刻的障碍。严重而深刻的障碍。 虚证虚证：共同基础是生理功能减退：共同基础是生理功能减退N功能低抑，副交感功能低抑，副交感N紧紧 张度呈非保护性上升，导致心肌功能低下，心率下降循环血张度呈非保护性上升，导致心肌功能低下，心率下降循环血 量不足，血压下降，基础代谢降低。微量元素紊乱（锌、铜）量不足，血压下降，基础代谢降低。微量元素紊乱（锌、铜） 实证实证：共同基础是生理机能亢进：共同基础是生理机能亢进N功能兴奋，交感功能兴奋，交感N张力张力 异常上升，心肌功

41、能增强，心率加快，循环血量增多，血压上异常上升，心肌功能增强，心率加快，循环血量增多，血压上 升，基础代谢率上升。升，基础代谢率上升。 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 早期交感早期交感N，垂体，垂体-肾肾 上腺系统上腺系统，随后垂体，随后垂体- 甲状腺系统甲状腺系统 垂体垂体-甲状腺系统机甲状腺系统机 能活跃能活跃 寒证：归结于机体热量寒证：归结于机体热量， 机能反应性机能反应性 热证：归结于机体热量热证：归结于机体热量 ， 机能反应性机能反应性 作用部位作用部位 在中枢与在中枢与 N肽类与肽类与 递质有关。递质有关。 虚热生火：植物虚热生火：植物N功能紊乱导致暂性功能紊乱导致暂性A

42、 充血，并与内分泌紊乱有关。充血，并与内分泌紊乱有关。 实证实证 虚证虚证 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 2、运用各种测试手段并结合临床或病理、运用各种测试手段并结合临床或病理 造模、推求或发展中医的病证原理。造模、推求或发展中医的病证原理。 以沈自尹（上海华山医院）为 首的关于“肾本质”研究发现 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 肾阳虚肾阳虚24小时尿小时尿17羟皮质内固醇含量明显低于正常人，提示羟皮质内固醇含量明显低于正常人，提示 肾阳虚证具有肾上腺皮质功能低下的病理基础。肾阳虚证具有肾上腺皮质功能低下的病理基础。 后来进一步的研究发现，肾阳虚病人还有其他两个靶腺（性后

43、来进一步的研究发现，肾阳虚病人还有其他两个靶腺（性 腺、甲状腺）轴的功能紊乱。从而证明了肾阳虚患者具有下腺、甲状腺）轴的功能紊乱。从而证明了肾阳虚患者具有下 丘脑丘脑-垂体及其靶腺轴的隐潜性病理变化，以及多靶腺轴功能垂体及其靶腺轴的隐潜性病理变化，以及多靶腺轴功能 损害。损害。 并推论出：肾阳虚证主要发病环节是下丘脑或更高级中枢的并推论出：肾阳虚证主要发病环节是下丘脑或更高级中枢的 调节紊乱；中医调节紊乱；中医“肾肾”功能调节点主要应定位在下丘脑。功能调节点主要应定位在下丘脑。 脾虚证：往往有免疫功能低下，胃肠功能紊乱及器质病变。脾虚证：往往有免疫功能低下，胃肠功能紊乱及器质病变。 在病理组织

44、学上，有呼吸道炎症、胃肠粘膜慢性炎症，肝在病理组织学上，有呼吸道炎症、胃肠粘膜慢性炎症，肝 细胞浊肿、脾轻度纤维化、淋巴组织轻度萎缩等。细胞浊肿、脾轻度纤维化、淋巴组织轻度萎缩等。 （六）病理学研究方法（六）病理学研究方法 3结合辨证论治观察用药前后，患病机体发生的各结合辨证论治观察用药前后，患病机体发生的各 种变化以及利用正常动物和病理模型所进行的药理种变化以及利用正常动物和病理模型所进行的药理 学和实验治疗学研究学和实验治疗学研究 不仅阐明了药物和方剂的作用和规律，而且通过病理生理不仅阐明了药物和方剂的作用和规律，而且通过病理生理 和病理解剖学的观察和分析，对一些证的物质基础也提供和病理解

45、剖学的观察和分析，对一些证的物质基础也提供 了旁证性的依据。另一方面，通过治疗观察病理变化的可了旁证性的依据。另一方面，通过治疗观察病理变化的可 逆转效应，在病理学研究中也极有价值。逆转效应，在病理学研究中也极有价值。 （七）免疫学方法（七）免疫学方法 免疫学技术免疫学技术：免疫化学、细胞免疫、免疫化学、细胞免疫、 血清学、免疫标记技术、皮试敏感血清学、免疫标记技术、皮试敏感 试验等。试验等。 常用的技术方法常用的技术方法为：免疫扩散、电免疫扩散、电 泳、补体测定、泳、补体测定、E-玫瑰花环试验、玫瑰花环试验、 免疫复合物测定、免疫酶标技术、免疫复合物测定、免疫酶标技术、 酶联免疫吸附试验等。

46、酶联免疫吸附试验等。 （七）免疫学方法中西医结合研究（七）免疫学方法中西医结合研究 1、从免疫学角度研究中医理论，阐明其物质基础、从免疫学角度研究中医理论，阐明其物质基础 虚证虚证：淋转率、玫瑰花环百分率巨噬细胞吞噬功能均下降：淋转率、玫瑰花环百分率巨噬细胞吞噬功能均下降 脾虚动物模型脾虚动物模型：淋巴器官重量下降，胸腺皮质变簿；小肠：淋巴器官重量下降，胸腺皮质变簿；小肠 固有膜中固有膜中IgG浆细胞减少，脾淋巴细胞核异染色质减少致浆细胞减少，脾淋巴细胞核异染色质减少致 淋巴细胞溶解淋巴细胞溶解 阳虚动物模型阳虚动物模型：脾细胞介导红细胞溶血程度下降，血凝抗：脾细胞介导红细胞溶血程度下降，血凝

47、抗 体下降，淋转率下降。体下降，淋转率下降。 （七）免疫学方法中西医结合研究（七）免疫学方法中西医结合研究 2、临床观察病证治疗前后免疫学指标的变化、临床观察病证治疗前后免疫学指标的变化 如对脾气虚的消化系统疾病，测定细胞免疫（如对脾气虚的消化系统疾病，测定细胞免疫（T淋巴细淋巴细 胞总数与活性、胞总数与活性、B淋巴细胞计数）、体液免疫（淋巴细胞计数）、体液免疫（IgG、 IgM、IgA）和补体（）和补体（C3等），采用益气健脾法治疗等），采用益气健脾法治疗13 个月后，自身对照，观察各项免疫指标的恢复情况。个月后，自身对照，观察各项免疫指标的恢复情况。 （七）免疫学方法中西医结合研究（七）免

48、疫学方法中西医结合研究 3、 红细胞免疫检测在研究肾虚、脾虚、血瘀和肿瘤病理等红细胞免疫检测在研究肾虚、脾虚、血瘀和肿瘤病理等 方面受到重视方面受到重视 红细胞免疫是上世纪红细胞免疫是上世纪80年代初期提出的新概念，红细胞具有免年代初期提出的新概念，红细胞具有免 疫功能，是机体免疫系统的组成都分，具有识别、传递抗原，疫功能，是机体免疫系统的组成都分，具有识别、传递抗原， 清除免疫复合物，增加吞噬细胞和清除免疫复合物，增加吞噬细胞和T细胞功能，及防御感染等作细胞功能，及防御感染等作 用其本身存在着代谢调控系统，（血清中红细胞免疫粘附抑制用其本身存在着代谢调控系统，（血清中红细胞免疫粘附抑制 因子

49、及促进因子）进行自身调控。因子及促进因子）进行自身调控。 （七）免疫学方法中西医结合研究（七）免疫学方法中西医结合研究 红细胞免疫检测方法：花环法、放免法、酶联法、发光法、红细胞免疫检测方法：花环法、放免法、酶联法、发光法、 血凝法，其中血凝法方法简便，为临床常规检测方法。血凝法，其中血凝法方法简便，为临床常规检测方法。 脾虚肾虚：红细胞脾虚肾虚：红细胞C3b受体活性及数目下降，导致红细胞免疫粘受体活性及数目下降，导致红细胞免疫粘 附功能低下，调控失常。附功能低下，调控失常。 血瘀证：红细胞血瘀证：红细胞C3b受体粘附功能增强，导致红细胞溶解、血小受体粘附功能增强，导致红细胞溶解、血小 板活化

50、聚集并释放致凝物质等。板活化聚集并释放致凝物质等。 肿瘤：红细胞免疫全面低下和抑制状态。（中药天花粉等可以提肿瘤：红细胞免疫全面低下和抑制状态。（中药天花粉等可以提 高红细胞免疫粘附功能，增强膜高红细胞免疫粘附功能，增强膜SOD酶活性；降低血清中红酶活性；降低血清中红 细胞免疫粘附抑制因子的活性，从而提高红细胞粘附肿瘤细细胞免疫粘附抑制因子的活性，从而提高红细胞粘附肿瘤细 胞和促进肿瘤细胞被吞噬的能力。胞和促进肿瘤细胞被吞噬的能力。 （七）免疫学方法中西医结合研究 4、利用放射免疫分析技术检测与受体结合的活性物质含量，从受、利用放射免疫分析技术检测与受体结合的活性物质含量，从受 体水平阐明中医

51、基础理论和研究中药作用原理体水平阐明中医基础理论和研究中药作用原理 应用组织化学方法及电镜技术的应用，证实了一些细胞在细胞膜及细胞内存在应用组织化学方法及电镜技术的应用，证实了一些细胞在细胞膜及细胞内存在 能与神经递质、激素或药物结合的受体（蛋白质能与神经递质、激素或药物结合的受体（蛋白质/酶）。酶）。 作用于受体的生物活性物质或药物在血浆中含量极微，但其可以应用作用于受体的生物活性物质或药物在血浆中含量极微，但其可以应用“放射放射 免疫分析免疫分析”（近期发展为（近期发展为“放射配体结合分析放射配体结合分析”这种超微量分析技术准确地这种超微量分析技术准确地 检测出来。放射免疫分析（检测出来。

52、放射免疫分析（RIA）的应用推动了生物学和医学基础理论研究，）的应用推动了生物学和医学基础理论研究， 并提高了诊断质量。并提高了诊断质量。 （七）（七）免疫学方法中西医结合研究 例一：血中皮质醇含量减少例一：血中皮质醇含量减少/皮质醇靶细胞中的糖皮质激素受体（皮质醇靶细胞中的糖皮质激素受体（GCR）减）减 少少肾上腺皮质功能低下肾上腺皮质功能低下阳虚阳虚 阳虚动物模型肝细胞液阳虚动物模型肝细胞液/阳虚病人混合阳虚病人混合WBC中的中的GCR明显减少明显减少 甲亢阴虚动物模型肝细胞液中甲亢阴虚动物模型肝细胞液中GCR也明显减少也明显减少 推测推测 GCR减少可能是阴虚、减少可能是阴虚、 阳虚发展

53、到一定阶段阳虚发展到一定阶段 时受体水平的共有病时受体水平的共有病 变变 例二：应用受体学说的理论和技术研究中药的例二：应用受体学说的理论和技术研究中药的“归经归经”问问 题题 归经：中药作用（药效）效应所达到的部位归经：中药作用（药效）效应所达到的部位部位与功能综合。部位与功能综合。 药物受体学说：解释药物的效应部位及如何发挥效应。药物受体学说：解释药物的效应部位及如何发挥效应。 用受体理论指导用受体理论指导“归经归经”研研 究究 从中药功效推求作用部位从中药功效推求作用部位 强调病变部位对中药的选择和适应强调病变部位对中药的选择和适应 （七）（七）免疫学方法中西医结合研究 例三：中药对受体

54、数量与受体结合活物质亲和率的影响例三：中药对受体数量与受体结合活物质亲和率的影响 益气升阳药参附汤对亡阳虚脱动物模型血浆皮质激素（益气升阳药参附汤对亡阳虚脱动物模型血浆皮质激素（GC）无下调作用；）无下调作用； 但能纠正其胸腺及肝细胞液中但能纠正其胸腺及肝细胞液中GCR的减少。的减少。 温阳药附子、肉桂可使温阳药附子、肉桂可使HPA受抑制大鼠模型子宫的雌激素受体（受抑制大鼠模型子宫的雌激素受体（ER）接接 近正常水平；并提高雌激素与近正常水平；并提高雌激素与ER的亲和力。的亲和力。提高生殖功能。提高生殖功能。 明党参煎液可增加小鼠腹腔巨细胞的明党参煎液可增加小鼠腹腔巨细胞的C3补体受体（补体受

55、体（ C3 bR）；）； 甘草及其提取物对豚鼠甘草及其提取物对豚鼠-肾上腺受体有保护作用；肾上腺受体有保护作用； 助阳药可影响助阳药可影响T3与受体的亲和率。与受体的亲和率。 二型糖尿病的胰岛素抵抗主要是由于体内胰岛素受体减少或失活。采二型糖尿病的胰岛素抵抗主要是由于体内胰岛素受体减少或失活。采 用降糖中药的药理机制则主要是通过改善胰岛素受体功能而取效的。用降糖中药的药理机制则主要是通过改善胰岛素受体功能而取效的。 （八）（八）组织培养研究方法 离体器官、组织、细胞在人为控制条件 下培养（生殖、传代等），研究其生命 过程、生理/病理状态下其他各种因素 的影响，如病毒、肿瘤、药效研究。 （八）（

56、八）组织培养研究方法 1药用植物的组织培养药用植物的组织培养 2组织培养方法在中西医结合研究中的应用组织培养方法在中西医结合研究中的应用 3组织培养方法在中西医结合研究中应注意组织培养方法在中西医结合研究中应注意 的问题的问题 （八）（八）组织培养研究方法 利用体外细胞培养筛选抗利用体外细胞培养筛选抗HBV中草药：用转染法将中草药：用转染法将 克隆的克隆的HBV的的DNA转入肝癌细胞株，建立长期稳定转入肝癌细胞株，建立长期稳定 地向培养上清液分泌乙肝病毒标志物（地向培养上清液分泌乙肝病毒标志物（HBsAg、 HBeAg、完整、完整Dane颗粒）的细胞模型。利用这些转颗粒）的细胞模型。利用这些转

57、 染细胞株对多种中草药抗染细胞株对多种中草药抗HBV活性进行观察，筛选活性进行观察，筛选 出板蓝根、银黄注射液、复方黄芪浸膏片水提取物，出板蓝根、银黄注射液、复方黄芪浸膏片水提取物， 肝毒清等对肝毒清等对HBV有明显抑制作用。有明显抑制作用。 （九）分子生物学研究方法（九）分子生物学研究方法 n1运用分子生物学及其技术研究中医理论的运用分子生物学及其技术研究中医理论的 生物学相关性生物学相关性 n2运用分子生物学及其技术研究方剂作用机运用分子生物学及其技术研究方剂作用机 制制 n3用分子生物学技术研究中药的抗病机制用分子生物学技术研究中药的抗病机制 n4运用分子生物学技术研究针刺作用机制运用分

58、子生物学技术研究针刺作用机制 n5运用分子生物学技术鉴定中药材运用分子生物学技术鉴定中药材 n6利用基因芯片技术筛选和开发新药利用基因芯片技术筛选和开发新药 （十）核技术研究方法（十）核技术研究方法 n1核素标记技术核素标记技术 n2放射免疫分析放射免疫分析 n3放射受体分析放射受体分析 n4活化分析技术活化分析技术 （十一）医学影像学研究方法（十一）医学影像学研究方法 n1超声影像技术超声影像技术 n2正电子断层图（正电子断层图（PET） （十一）医学影像学研究方法（十一）医学影像学研究方法 nPET技术在中西医结合研究中的应用技术在中西医结合研究中的应用 n（1）辨证论治机理的研究）辨证论

59、治机理的研究 n（2）针刺镇痛机理的研究）针刺镇痛机理的研究 n（3）PET与气功原理的研究与气功原理的研究 n（4）中药在人体的动态分布及其作用部）中药在人体的动态分布及其作用部 位与作用机理的研究位与作用机理的研究 n（5）关于经络循经转运与走行机理的研）关于经络循经转运与走行机理的研 究究 （十二）蛋白质组学研究方法蛋白质组学研究方法 n以组织或细胞的全部蛋白质为研究对象，以组织或细胞的全部蛋白质为研究对象， 以蛋白质表达整体水平的研究为特点，以蛋白质表达整体水平的研究为特点， 其主要研究内容是蛋白质的特性，包括其主要研究内容是蛋白质的特性，包括 蛋白质表达水平、氨基酸序列、翻译后蛋白质

60、表达水平、氨基酸序列、翻译后 加工和蛋白质相互作用。在蛋白质水平加工和蛋白质相互作用。在蛋白质水平 上了解细胞或组织的各项功能、各种生上了解细胞或组织的各项功能、各种生 理生化过程以及疾病的病理过程等。理生化过程以及疾病的病理过程等。 n蛋白质组学技术体系主要由蛋白质分离、蛋白质组学技术体系主要由蛋白质分离、 质谱分析和生物信息学三个部分组成。质谱分析和生物信息学三个部分组成。 n1中医证候研究中医证候研究 n2中药复方的作用机制及其配伍研究中药复方的作用机制及其配伍研究 （十二）蛋白质组学研究方法蛋白质组学研究方法 （十三）代谢组学研究方法（十三）代谢组学研究方法 n代谢物组是基因代谢物组是