生物高一生物微生物的实验室培养

1、细菌的外形与大小 细菌：细菌：单细胞不分枝的原核微生物单细胞不分枝的原核微生物。 细菌细胞细菌细胞，通常用适当染料，通常用适当染料 后显微镜观察后显微镜观察 图图1-1 常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态 A.球菌球菌 B.杆菌杆菌 C.弧菌弧菌 细菌细胞由外向里 依次有、菌菌 （、 、 ， 。 细菌的构造 *细胞壁 细胞壁有哪些功能？细胞壁有哪些功能？ 伤伤 寒寒 杆杆 菌菌 细细 胞胞 壁壁 中中 含含 毒毒 素素 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠 体，叫做体，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等

2、恶劣的环。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环 境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3 3小时以后才小时以后才 死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水 分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌. . 菌落： 单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落形态结构的子细胞群体，叫做菌落。

3、菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。 菌落 细菌的菌落特征细菌的菌落特征 因种而异因种而异 1 1、结构：、结构： 单细胞原核单细胞原核 分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝） 链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其中微生物中发现了几千种抗生素，其中2/32/3是是 由放线菌产生的由放线菌产生的 应用应用: : 病毒的结构病毒的结构 病毒病毒 SARS病毒、病毒、 禽流感病毒禽流感病毒 朊病毒（蛋白质病毒） 2、病毒的增殖：、病毒的增殖： 真菌真菌 如图是酵

4、母菌电子显微如图是酵母菌电子显微 镜下的形态结构镜下的形态结构 酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌 青霉青霉 生殖生殖 直立菌丝直立菌丝 营养菌丝营养菌丝腐生生活腐生生活 孢子生殖孢子生殖 细菌的营养类型 根据细菌所利用的能源和碳源的不同，根据细菌所利用的能源和碳源的不同， 将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。 自养菌（自养菌（autotrophautotroph） 异养菌（异养菌（heterotrophheterotroph） 腐生菌腐生菌 寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌 了解有关培养基的基础知识，进行无了解有关培养基的基础知识，进行无 菌技术的操作，进行微生物的培养。菌技术的操作

5、，进行微生物的培养。 一、课题目标：一、课题目标： 掌握掌握培养基的制备培养基的制备、高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌和和 平板划线法平板划线法等基本操作技术，熟练、规范等基本操作技术，熟练、规范 地进行无菌操作，成功地培养微生物。地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。无菌技术的操作。 二、课题重点和难点：二、课题重点和难点： 三、技能目标：三、技能目标： 一、基础知识：一、基础知识： （一）培养基（一）培养基 培养基（培养液）是培养基（培养液）是由人工方法配制而成由人工方法配制而成 的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。液。 （1 1）按物理状态来

6、分：培养基可分为）按物理状态来分：培养基可分为固体培固体培 养基养基和和液体培养基液体培养基。其中固体培养基用于菌。其中固体培养基用于菌 种分离、鉴定菌落等。种分离、鉴定菌落等。 （2 2）按功能来分，可分为）按功能来分，可分为选择培养基选择培养基和和鉴别鉴别 培养基培养基。 （3 3）按成分来分，可分为）按成分来分，可分为天然培养基天然培养基和和合成合成 培养基培养基。 1.1.培养基的类型和用途培养基的类型和用途 2. 2.不同的微生物往往需要采用不同不同的微生物往往需要采用不同 的培养基配方的培养基配方 (参考教材附录内容参考教材附录内容) 3.3.不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养

7、基，一般都含有水水、 碳源碳源、和、和氮源氮源、 无机盐无机盐、等等营养物质，营养物质， 另外还需要满足微生物生长对另外还需要满足微生物生长对pHpH、特特 殊营养物质殊营养物质, ,例如例如: :生长因子生长因子(即细菌生长即细菌生长 必需，而自身不能合成的化合物必需，而自身不能合成的化合物,如维生如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) )以及以及氧气氧气、 二氧化碳二氧化碳、渗透压渗透压等等的要求。的要求。 选择培养基 加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基: : 分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基: : 分离金

8、黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基: : 分离固氮菌分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基: : 分离自养型微生物分离自养型微生物 加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基: : 分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、 次黄嘌呤和胸腺嘧啶次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基核苷的培养基: : 分离杂交瘤细胞分离杂交瘤细胞 根据细胞生存所需物质的种类和根据细胞生存所需物质的种类和 数量，用人工方法模拟合成的。数量，用人工方法模拟合成的。 合成培养基主要成分是氨基酸、合成培养基主要成

9、分是氨基酸、 维生素、碳水化合物、无机盐和其它维生素、碳水化合物、无机盐和其它 一些辅助物质。一些辅助物质。 优点：优点：标准化生产，组分和含量相标准化生产，组分和含量相 对固定对固定; ;成本低成本低 缺点：缺点： 缺少某些成分，不能完全满缺少某些成分，不能完全满 足体外细胞生长需要。足体外细胞生长需要。 合成培养基合成培养基: : 天然培养基有血清、血浆、和组天然培养基有血清、血浆、和组 织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。 优点：优点：营养成分丰富，培养效果好营养成分丰富，培养效果好 缺点：缺点：来源受限来源受限; ;成分复杂，影响对某成分复杂，影响对某 些实验产

10、物的提取和实验结果的分析些实验产物的提取和实验结果的分析; ; 易发生支原体污染易发生支原体污染; ; 天然培养基：天然培养基： 血清中含有：血清中含有： 多种蛋白质（白蛋白、球蛋多种蛋白质（白蛋白、球蛋 白、铁蛋白等）白、铁蛋白等） 多种金属离子；多种金属离子； 激素；激素； 促贴附物质，如纤粘蛋白、促贴附物质，如纤粘蛋白、 冷析球蛋白、胶原等。冷析球蛋白、胶原等。 各种生长因子各种生长因子 转移蛋白转移蛋白 不明成分不明成分 人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细 胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基（如胞生长和繁殖，还需补充一定量的天然培养基

11、（如 血清）。血清）。 液体培养基：液体培养基： 表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长 沉淀生长沉淀生长 固体培养基：菌落，菌苔固体培养基：菌落，菌苔 半固体培养基：半固体培养基： 无动力无动力 有动力有动力( (弥散弥散) ) ( (是否运动是否运动) ) 4.4.培养基的用途培养基的用途 液体培养基：增菌液体培养基：增菌 固体培养基：纯化，增菌固体培养基：纯化，增菌 半固体培养基：动力检测，保种半固体培养基：动力检测，保种 1.1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指无菌操作泛指在培养微生物的操作在培养微生物的操作 中，所有防止杂菌污染的方法。中，所有防止杂菌污染的方法。无论是无

12、论是 随后将要学到的随后将要学到的倒平板倒平板、平板划线平板划线操作，操作， 还是还是平板稀释涂布法平板稀释涂布法，其操作中的每一，其操作中的每一 步都需要做到步都需要做到“无菌无菌”，即防止杂菌污，即防止杂菌污 染。只有熟练、规范地进行无菌操作，染。只有熟练、规范地进行无菌操作， 才可能成功地培养微生物。才可能成功地培养微生物。 （）（）消毒定义：消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死大部份利用化学或物理方法，杀死大部份 致病微生物的过程。区分为致病微生物的过程。区分为高程度消毒高程度消毒 （High-level DisinfectionHigh-level Disinfection）、）、中

13、程度中程度 消毒消毒（Intermediate-level Intermediate-level DisinfectionDisinfection）、）、低程度消毒低程度消毒（Low-Low- level Disinfectionlevel Disinfection）三种方式。）三种方式。 2.2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2 2）灭菌的定义：）灭菌的定义： 以化学剂或物理方法消灭以化学剂或物理方法消灭所有所有微微 生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、 霉菌及病毒，而达到霉菌及病毒，而达到完全无菌完全无菌之过程。之过程。 灭菌与

14、消毒技术是微生物有关工灭菌与消毒技术是微生物有关工 作中最普通也是最重要的技术。作中最普通也是最重要的技术。 1 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min 2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 70-75 下煮下煮30min30min 或或 80 80 下煮下煮15min15min 3 3、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法: :用用75%75%酒精、新洁酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒尔灭等进行皮肤消毒; ;氯气消毒水源氯气消毒水源 4 4、紫外线消毒、紫外线消毒 (1)消毒的方法：消毒的方法： 3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法 1 1、灼

15、烧灭菌、灼烧灭菌 2 2、干热灭菌：、干热灭菌： 160-170 160-170 下加下加 热热1-2h1-2h。 3 3、高压蒸气灭菌：、高压蒸气灭菌： 100kPa100kPa、121 121 下维持下维持15-30min.15-30min. (2)灭菌的方法：灭菌的方法： 最常用的灭菌方法是最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌，它可以，它可以 杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休 眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被 破坏。破坏。 有些玻璃器皿也可采用有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌高温

16、干热灭菌。为了。为了 防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻 璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花 塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只 可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过 。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器 具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 分类分类定义定义方法方法 灭菌法灭菌法 杀灭一切微生物杀灭一切微生物

17、物理法：热力、辐射、微物理法：热力、辐射、微 波、等离子体波、等离子体 化学法：醛类、烷化剂化学法：醛类、烷化剂 高效消高效消 毒法毒法 杀灭一切致病微杀灭一切致病微 生物生物 紫外线、含氯剂、臭氧、紫外线、含氯剂、臭氧、 复配剂等复配剂等 中效消中效消 毒法毒法 杀灭除芽孢外的杀灭除芽孢外的 致病微生物致病微生物 超声波、碘类、醇类、酚超声波、碘类、醇类、酚 类类 低效消低效消 毒法毒法 杀灭细菌繁殖体、杀灭细菌繁殖体、 亲脂病毒亲脂病毒 单链季胺盐、双胍类、中单链季胺盐、双胍类、中 草药、金属离子草药、金属离子 1 1、器具的灭菌、器具的灭菌 2 2、培养基的配制、培养基的配制 3 3、培

18、养基的灭菌、培养基的灭菌 4 4、倒平板、倒平板 5 5、微生物接种、微生物接种 6 6、恒温箱中培养、恒温箱中培养 7 7、菌种的保存、菌种的保存 1.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物无菌技术除了用来防止实验室的培养物 被其他外来微生物污染外，还有什么目的？被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭 菌。如果需要，请选择合适的方法。菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1 1） 培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿 （2 2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3 3） 实验操

19、作者的双手实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自答：无菌技术还能有效避免操作者自 身被微生物感染。身被微生物感染。 答：（答：（1）、（）、（2）需要灭菌；（）需要灭菌；（3）需要消毒）需要消毒。 三、实验操作三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1 1计算计算、称量称量 2 2溶化溶化 3 3调调pHpH：pH7pH76 6 4 4过滤：这一步可以省去。过滤：这一步可以省去。 5 5分装：分装过程中注意不要使培养分装：分装过程中注意不要使培养 基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而 引起污染。

20、分装三角烧瓶的量以不超过引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过 三角烧瓶容积的一半为宜。三角烧瓶容积的一半为宜。 6 6加塞加塞 7 7包扎包扎 操作步骤操作步骤 8 8灭菌灭菌: : 将将50ml50ml培养基培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，用玻棒转移至三角锥瓶中， 塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌 锅，在压力为锅，在压力为100kPa100kPa、温度为、温度为121121，灭菌，灭菌 151530min30min。将。将培养皿培养皿用旧报纸包裹，放入干用旧报纸包裹，放入干 热灭菌箱内，在热灭菌箱内，在160160170 170 下灭菌下灭菌2

21、h2h。 9 9倒平板倒平板: : 待培养基冷却到待培养基冷却到50 50 左右时，在酒精灯附左右时，在酒精灯附 近倒平板。（倒平板操作见课本）近倒平板。（倒平板操作见课本）2d2d后观察平后观察平 板，无杂菌污染才可用来接种板，无杂菌污染才可用来接种. . 10 10无菌检查：无菌检查： 将灭菌的培养基放入将灭菌的培养基放入3737的温室中培的温室中培 养养24482448小时，以检查灭菌是否彻底。小时，以检查灭菌是否彻底。 1.1.培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 50 左右时，左右时， 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基

22、的 温度？温度？ 答：答：可以用手触摸盛有培养基的锥形可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。 2.2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生 物污染培养基。物污染培养基。 3.3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅 在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来在皿盖与皿底之间的

23、部位，这个平板还能用来 培养微生物吗？为什么？培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之 间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板 培养微生物。培养微生物。 2 2、纯化大肠杆菌

24、、纯化大肠杆菌 接种方法有：接种方法有： 平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法 平板划线法平板划线法: :通过接种环在琼脂固体通过接种环在琼脂固体 培养基表面连续画线的操作培养基表面连续画线的操作, ,将聚集的将聚集的 菌钟逐步稀释分散到培养基的表面菌钟逐步稀释分散到培养基的表面. . 在数次画线后在数次画线后, ,可以分离到由一个细可以分离到由一个细 胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体, , 这就是菌落这就是菌落. . 1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前为什么在操作的第一步以及每次划线之前 都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需都要灼

25、烧接种环？在划线操作结束时，仍然需 要灼烧接种环吗？为什么？要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接 种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线 前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种 环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的 菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线 次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少， 以

26、便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和 感染操作者。感染操作者。 2.2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却 后再进行划线？后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什在作第二次以及其后的划线操作时，为什 么总是从上一次划线的末端开始划线么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起

27、 始处要少，每次从上一次划线的末端开始，始处要少，每次从上一次划线的末端开始， 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌 落。落。 涂布平板的所有操作都应在火焰附近涂布平板的所有操作都应在火焰附近 进行。结合平板划线与系列稀释的无菌进行。结合平板划线与系列稀释的无菌 操作要求，想一想，第操作要求，想一想，第2 2步应如何进行无步应如何进行无 菌操作？菌操作？ 应从操作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。 例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、例如，酒精灯与培养皿的距离要合

28、适、 吸管头不要接触任何其他物体、吸管要吸管头不要接触任何其他物体、吸管要 在酒精灯火焰周围等等。在酒精灯火焰周围等等。 1 1、临时保藏：、临时保藏： 接种到固体斜面培接种到固体斜面培 养基，菌落长成后养基，菌落长成后 置于置于44冰箱保存。冰箱保存。 2 2、长期保存：、长期保存： 甘油冷冻管藏法甘油冷冻管藏法 四、课题成果评价四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 12 d2 d后无菌后无菌 落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制

29、备。备。 （二）接种操作是否符合无菌要求（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本 一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是 符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接 种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再 次练习。次练习。 （三）是否进行了及时细致的观察与记录（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养培养12 h12 h与与24 h24 h后的大肠

30、杆菌菌落的大小会有明显后的大肠杆菌菌落的大小会有明显 不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到 其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良 好的科学态度与习惯。好的科学态度与习惯。 本课题知识小结本课题知识小结: : 【典例解析典例解析】 例例1 1关微生物营养物质的叙述中，正确的是关微生物营养物质的叙述中，正确的是 A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量 C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机

31、盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要 针对微生物的具体情况分析。对于针对微生物的具体情况分析。对于A A、B B选项，它的表达是选项，它的表达是 不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可 同时是氮源，如同时是氮源，如NH4HCO3NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡；有的碳源同时是能源，如葡 萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C C 选项，除水以外的无机

32、物种类繁多，功能也多样。如二氧化选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化 碳，可作为自养型微生物的碳源；碳，可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3NaHCO3，可作为自养，可作为自养 型微生物的碳源和无机盐；而型微生物的碳源和无机盐；而NaClNaCl则只能提供无机盐。对则只能提供无机盐。对 于于D D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3NH3可可 为硝化细菌提供能量和氮源。为硝化细菌提供能量和氮源。 答案：答案：D 例例2 2下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解的的 是是 A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染 B.

33、B.消灭杂菌消灭杂菌 C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前 B 解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A A 说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一 的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌）， 所以是正确的；所以是正确的；B B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂是错误的，因为灭菌的目的是防止杂 菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而

34、是消灭 全部微生物。全部微生物。C C是正确的，因为与发酵有关的所有设备是正确的，因为与发酵有关的所有设备 和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接 种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把 所接菌种也杀死。所接菌种也杀死。 编号编号成分成分含量含量 粉状硫粉状硫10g10g （NHNH4 4） 2 2SO SO4 4 0.4g0.4g K K2 2HPOHPO4 44.0g4.0g MgSOMgSO4 49.25g9.25g FeSOFeSO4 40.5g0.5g CaClCaCl2 20.5g0.5g HH2 2OO100ml100ml 例例3 3右表是某微生物右表是某微生物 培养基成分，请据此回答：培养基成分，请据此回答： （1 1）右表培养基可培）右表培养基可培 养的微生物类型养的微生物类型 是是 。 （2 2）若不慎将过量）若不慎将过量 NaClNaCl加入培养基中。加入培养基中。 如不想浪费此培养基，如不想浪费此培养基， 可再加入可再加入 . . 自养型微生物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物 （3 3）若除去成分