Lowrys法Folin酚试剂法顺德学习教案

1、会计学1Lowrys法法Folin酚试剂酚试剂(shj)法顺德法顺德第一页，共25页。第1页/共24页第二页，共25页。方方 法法 灵敏度灵敏度 优点优点 缺点缺点凯氏定氮法凯氏定氮法0.2 1.0mg氮氮 干扰少，干扰少，准确准确操作复杂，费时操作复杂，费时 紫外吸收法紫外吸收法50100mg 快速简便快速简便无损样品无损样品灵敏度低灵敏度低干扰物较多干扰物较多考马斯亮蓝法考马斯亮蓝法（Bradford）法）法15ug 灵敏、简灵敏、简便、快速便、快速不同蛋白质测定时不同蛋白质测定时有较大的偏差有较大的偏差 双缩脲法双缩脲法 120mg 干扰相对干扰相对少，较快少，较快灵敏度低灵敏度低Low

2、ry法法20250ug 灵敏度高灵敏度高干扰物质多、费时、干扰物质多、费时、操作严格计时操作严格计时第2页/共24页第三页，共25页。第3页/共24页第四页，共25页。第4页/共24页第五页，共25页。第5页/共24页第六页，共25页。第6页/共24页第七页，共25页。第7页/共24页第八页，共25页。第8页/共24页第九页，共25页。第9页/共24页第十页，共25页。第10页/共24页第十一页，共25页。第11页/共24页第十二页，共25页。第12页/共24页第十三页，共25页。试剂（试剂（ml)123456牛血清白蛋白牛血清白蛋白标准液标准液-0.200.400.600.80-样品液样品液

3、（稀释（稀释300倍）倍）-0.50蒸馏水蒸馏水1.00.800.600.400.200.50碱性硫酸铜碱性硫酸铜2.02.02.02.02.02.0l各管混匀，室温放置各管混匀，室温放置(fngzh)10min。 l向各管内加入向各管内加入Folin-酚试剂酚试剂, 2s内迅速混匀！内迅速混匀！ 40放置放置(fngzh)10min。l冷却至室温后，以冷却至室温后，以500nm波长比色，用波长比色，用1号管作空白，读取各管吸光度。号管作空白，读取各管吸光度。蛋白质浓度（蛋白质浓度（ g/ml）04080120160未知未知第13页/共24页第十四页，共25页。第14页/共24页第十五页，共2

4、5页。蛋白蛋白(dnbi)样品样品碱性碱性(jin xn)铜试剂铜试剂混匀，混匀，放放10min加酚试剂加酚试剂2s混匀混匀水浴水浴10min放至室温放至室温比色比色第15页/共24页第十六页，共25页。2345测定次数1236各管平均A值各 管 A 值第16页/共24页第十七页，共25页。第17页/共24页第十八页，共25页。吸光度A蛋白质浓度C（g/ml）0.20.40.6.第18页/共24页第十九页，共25页。第19页/共24页第二十页，共25页。(g/ml)。n血清(xuqng)蛋白浓度(g/ml)=样品蛋白质浓度2300第20页/共24页第二十一页，共25页。的直线形式n 3.专一性较差，干扰物质较多。第21页/共24页第二十二页，共25页。第22页/共24页第二十三页，共25页。MODE 0%MODE 100%第23页/共24页第二十四页，共25页。NoImage内容(nirng)总结会计学。Lowrys法Folin酚试剂法顺德。第1页/共24页。第2页/共24页。Lowrys法（Folin-酚试剂法）测定蛋白质含量。和色氨酸残基（酚基）还原酚试剂（磷钨酸-磷钼酸）起蓝色反应。在碱性溶液中,双缩脲(H2NOCNHCONH2)能与Cu2+作用,形成紫色或紫红色的络合物,