急性软组织损伤大鼠不同赋形剂调制 七厘散外敷疗效的实验研究_图文_第1页
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文档简介

1、年月第卷第期护理学报,()【中医护理】急性软组织损伤大鼠不同赋形剂调制七厘散外敷疗效的实验研究彭细果,徐生红,彭力平(深圳市福田区中医院,广东深圳)【摘要】目的观察不同赋形剂调制的七厘散药膏局部外敷对急性软组织损伤模型大鼠的治疗效果。筛选较优赋形剂。方法将只大鼠打击造成急性软组织损伤模型后,随机分为模型对照组、蜂蜜药膏组、白酒药膏组、米醋药膏组、香油药膏组和凡士林药膏组各只。按不同组别分别予损伤部位皮肤涂抹给药,确定用药第天、第天、第天为观察时相点。先大体观察,然后颈动脉采血测定血浆药物浓度,最后切取损伤部位软组织病理切片,镜下观察并分析比较。结果()用药后第时相、第时相大体观察结果比较差异有

2、统计学意义,第时相白酒组、米醋组与模型组比较差异有统计学意义(,)。第时相白酒组与模型组、凡七林组比较差异有统计学意义();米醋组与模型组、凡士林组比较差异有统计学意义()。()用药后第时相、第时相血药浓度比较差异有统计学意义。白酒组在第、第时相各组点血药浓度明显高于米醋组、蜂蜜组、香油组、凡士林组,差异具有统计学意义()。米醋组血药浓度第、第时相高于蜂蜜组、香油组、凡士林组,差异具有统计学意义()。()用药后第时相、第时相镜下观察结果比较,差异有统计学意义。第时相白酒组与模型组比较差异有统计学意义();第时相白酒组与模型组、蜂蜜组、凡士林组比较差异有统计学意义(值分别为、)。结论白酒作赋形剂

3、调制七厘散外敷治疗急性软组织损伤,能促进药物透皮吸收,加快损伤组织的修复,作用明显优于其他赋形剂,外敷治疗急性软组织损伤效果最好;米醋赋形剂次之。【关键词】大鼠;急性软组织损伤;七厘散;赋形荆;血药浓度【中图分类号】【文献标识码】【文章编号】(),(:,):,(),()(),()(),),()(),(),(尸生,):;急性软组织损伤是伤科常见病症之一,以局部【收稿日期】【基金项目】深圳市福田区公益性科研计划项目()【作者简介彭细果(一),女湖南蓝山人,大专学历,主管护师,护士长。疼痛、肿胀、功能障碍为主要表现。活血化淤类中药外敷治疗软组织损伤具有改善血液循环,减轻或防止粘连和疤痕的形成,促进损

4、伤组织修复的作用。使用时须将药末用赋形剂调和成糊状,然后局部外敷,使药力发挥作用,常用的赋形剂有白酒、米醋、香油、护理学报蜂蜜、凡士林、鲜药汁等,哪种赋形剂调制的活血化淤药透皮吸收效果更好,组织吸收及血药浓度更高,组织学恢复更快,并未见有关相互比较的资料和报道,更没有详细科学的指标和数据。七厘散作为药典中常用的外治方药具有化淤消肿、镇痛止血之功效。本研究旨在用不同赋形剂调制七厘散对急性软组织损伤模型大鼠外敷,测定其用药后不同时相点血药浓度变化情况,并做损伤组织切片镜下观察,结合大体观察结果分析比较,探讨不同赋形剂调制的七厘散药膏局部外敷对急性软组织损伤大鼠的治疗效果,筛选较优赋形剂。现报道如下

5、。材料实验药膏制备血竭、乳香(制)、没动物分组先将实验动物随机编成号,造模后通过新药设计软件上的随机表生成器制定随机分配卡,再将号实验动物随机分成模型对照组、蜂蜜药膏组、白酒药膏组、米醋药膏组、香油药膏组、凡士林药膏组,每组只大鼠。给药途径、剂量、方法模型对照组不予任何处理,其他组别分别予损伤部位皮肤涂抹给药,剂量为约加创面,厚约,每天次,连续。观察时相的确定确定给药后第天、第天、第天为观察时相点(分别为第、第、第时相),先大体观察,然后颈动脉采血测定血药浓度,再切取损伤部位软组织病理切片,镜下观察并分析比较。取材方法用药第天、第天、第天用水合氯醛腹腔注射麻醉后,切开大鼠颈部软组织暴露颈动脉采

6、血础,将血液收集于肝素抗凝的试管中,转离心,分离出血浆,于进行冷冻保存待测定血药浓度,最后处死动物,以造模局部为中心切取约次各只。血药浓度测定因七厘散以血竭为主药,血竭占七厘散全方总剂量的,其中血竭所含黄酮类成分血竭素是较为理想的指标成分,故本实验以血竭素为指标,利用高效液相色谱法()测定大鼠血浆中血竭素浓度删。疗效标准药(制)、红花、儿茶、冰片、麝香、朱砂,组方中药均按药典所载道地药材,指定主产地由湖南中医药大学附属一院药剂科一次购进并制剂。朱砂制成极细粉,其余血竭等五味粉碎成细粉,将麝香、冰片研细,与上述粉末焙研、过筛、混匀即得七厘散。然后分别用蜂蜜、白酒、米醋、香油、凡士林调和配制成软膏

7、,密封备用。软组织置于甲醛溶液瓶中固定,送做组织切片,每组每实验动物选用月龄大鼠只,雌雄各半,体质量,清洁级。方法动物造模参考周国林的造模方法,造成大鼠软组织损伤模型。大鼠左侧臀部及大腿用脱毛剂提前一天脱毛,大鼠侧卧式固定于软组织打击器上,用打击锤拉至高度,松开打击锤,自由大体观察及评分标准大体观察及评分标准参照周国林、姚全胜【的方法,根据出血或淤血灶、肿胀程度、淤斑颜色、肢体活动个方面,分别记分。评分标准见表。落下,连击下,打击后肉眼即见打击部位肿胀、淤血,说明造模成功。表症状及体征。分出血或淤血灶肿胀程度淤斑颜色无出血或淤血灶无肿胀皮肤颜色正常无淤点淤斑肢体活动活动如常分偶见点状出血或淤血

8、灶,面积小于轻微肿胀感有淤斑局部呈红色伤肢迟缓,活动无明显受限急性软组织损伤局部大体观察评分标准记分分表面出血或淤血灶水肿面积小于有淤斑局部呈紫色伤肢跛行,活动受限分表面见大于,的出血或淤血灶水肿面积大于局部呈深紫色,可见小血泡或明显出血点伤肢悬空不愿意着地,活动明显受限镜下观察评分标准病理组织石蜡包埋切片,常规染色,光学显微镜下()观察,评分标准采用周国林法分:损伤软组织恢复同正常。分:肌纤维肿胀,肌组织内淤血、水肿,出血灶明显减轻或大部分消失,血管增生,胶原纤维增生。与正常软组织相比,已基本恢复。分:肌纤维肿胀伴有变性,肌组织内淤血、水肿、出血灶稍有减轻或部分消失,纤维母细胞侵入,血管增生

9、或胶原纤维增生,与对照组相比略有减轻。分:肌纤维肿胀有透明变性,肌纤维明显坏死,肌纤维组织中伴有严重淤血、第期彭细果,等急性软组织损伤大鼠不同赋形剂调制七厘敖外敷疗效的实验研究水肿、出血。结果统计学处理将实验数据输入计算机,用统计软件对完全随机设计多组计量资料进行方差分析(检验)和多重比较(法);计数资料行检验。动物分组结果造模分组后对各组动物体质量、淤斑面积、综合记分、性别比较,差异无统计学意义()。说明组间均衡性好,具有可比性。见表。表急性软组织损伤大鼠造模后分组情况比较(瓢)用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型大体观察结果见表表用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型大体观察结果(兄心。分)

10、组别,第时相±第时相±第时相±模型组蜂蜜组白酒组米醋组香油组凡士林组,±±士(±:±,±±±±士±表显示:用药后第时相、第时相大体观察结果比较差异有统计学意义。组间比较采用法,第时相白酒组、米醋组与模型组比较差异有统计学意义(值为、)。第时相白酒组与模型组、凡士林组比较差异有统计学意义(值为、);米醋组与模型组、凡士林组比较差异有统计学意义(值为、)。用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型血林组比较,差异均有统计学意义(值分别为、)。第时相白酒组与蜂蜜组、米醋组、香油组、凡士林

11、组比较差异均有统计学意义();米醋组与蜂蜜组、香油组、凡士林组比较,差异均有统计学意义()。用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型镜下观察结果比较见表表用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型药浓度比较结果见表表用药后不同时相急性软组织损伤大鼠模型镜下观察结果比较(屁。分)组别查堑鎏壁生箜!墨堕!坚型田第时相第时相第时相表显示:用药后第时相、第时相镜下观察结表显示:用药后第时相、第时相血药浓度比较差异有统计学意义。组间比较采用法检验,第时相白酒组与蜂蜜组、米醋组、香油组、凡士林组比较差异均有统计学意义(值分别为、);米醋组与蜂蜜组、香油组、凡士果比较,差异有统计学意义。组间比较采用法,第时相白酒组与

12、模型组比较差异有统计学意义();第时相白酒组与模型组、蜂蜜组、凡士林组比较差异有统计学意义(值为、)。护理学报讨论起到很好的增溶作用,能促进药物透皮吸收,提高血中七厘散治疗急性软组织损伤的作用机理液中有效成分血竭素的浓度;并能增强七厘散对损伤局部的抗炎、消肿作用,增强七厘散行气、活血通络、消肿止痛之功效,其作用明显优于其他赋形剂。米醋性温、味苦酸,本身具有活血化淤之功。米醋含乙酸,乙酸是一种与水能混溶的亲水性有机溶剂,溶解性较大,对中草药细胞的穿透力较强,大部分亲水性成分在乙酸中有一定的溶解度,对难溶于水的疏水成分如游离生物碱,能与其生成盐而增大溶解度。米醋组在用药后第、第时相大体观察结果与其

13、他组相比差异具有统计学意义(或),血浆药物浓度在第时相明显高于蜂蜜组、香油组、凡士林组,差异具有统计学意义()。说明米醋作为赋形剂调制七厘散外敷,对损伤组织修复有较好作用。因此以米醋作为赋形剂能起到增溶作用,促进药物透皮吸收,增强活血散淤之功效。【参考文献】周国林一种动物软组织损伤的实验方法【】中国药理学通报,():医认为急性软组织损伤的本质是血淤,损伤之后脉络破损,血液离经而成淤,血淤则气滞,气滞不行则疼痛,故治则活血化淤、行气止痛为主。七厘散方载于清代医家谢元庆编集的良方集腋,方中血竭、红花咸平甘温,活血化淤为主;乳香、没药辛苦而温,祛淤行气、消肿止痛为辅;儿茶苦涩微寒,朱砂甘凉为佐,既清

14、热止血又镇心安神;麝香、冰片辛散,芳香走窜为使,走窜经络、散淤止痛。全方配伍,辛温寒凉并用,苦涩甘平具备,有活血止血、化淤镇痛之功。中药外敷是药物通过透皮吸收直接作用于创伤局部,从而维持局部相对稳定的血药浓度,起到散淤、消肿和止痛的功效。皮肤的水化、温度,药物剂型、赋形剂、施药面积、给药时间均对药物透皮吸收产生影响。白酒赋形剂外敷治疗急性软组织损伤效果最好,米醋赋形剂次之白酒性温、昧甘苦辛、气味芳香,能升能散,具有行气、活血通络、消肿止痛及激发药性之功。酒含乙醇,而乙醇是良好的有机溶媒,药物有多种成分,如生物碱、甙类、鞣质、苦味质、有机酸、挥发油、树脂、糖类及部分色素等皆易溶予酒中。以白酒作为

15、赋形剂调制活血化淤膏药,有助于有效成分的溶出,利于药物透皮吸收,增强药物疗效。本研究结果显示:第时相因用药时间短,血液中血药浓度达不到监测量,用药后第、第时相白酒组血药浓度明显高于其他用药组,差异具有统计学意义();大体观察及镜下观察结果显示白酒组肌纤维肿胀、问质出血、淤血、水肿、炎细胞浸润明显减轻或大部分消失,且见血管和胶原纤维增生,与正常软组织比较已基本恢复正常,对损伤组织的修复作用明显优于其他组,差异有统计学意义(或)。说明以白酒作为赋形剂的确能【】国家药典委员会中华人民共和国药典【】北京:化学工业出版社,:【】陈望,刘振香,章丽华法测定大七厘散中血竭素的含量】冲国药师,:():【】孙文

16、基,绳全房天然活性成分简明手册】北京:中国医药科技版社,:【】姚全胜栀子抗炎、治疗软组织损伤有效部位的筛选研究【】中国中药杂志,():【】孙晓波,徐惠波现代方剂药理与临床】天津:天津科技翻译出版公司,:【】屠锡德生物药剂学【】北京:中国医药科技出版社,:【】于永翔,李振广浅谈酒制中药的作用与方法【】山东医药工业,:【】屈庆玲,满博文谈中药醋制的作用】河南中医,():【本文编辑:周春兰江霞】鼯若十鼯母鼯专专彤寺船夸糖寺夸母母若器护理学报网站投稿注意事项为了加快审稿流程,方便专家在线审稿及作者随时了解审稿进度,年本刊已全面实行在线投稿,投稿网址:,投稿时请作者注意以下几点:()为了能及时与作者联系

17、及方便查询稿件,注册会员时,请务必填写论文第一作者的真实信息,“真实姓名”栏应填写第一作者汉字全名,不可为拼音或数字,若信息填全后提示此人已注册,则可能是注册的作者姓名重复,请作者在真实姓名后加填数字,如“李红”。()上传的稿件应为“”格式,稿件上传成功后,还需点击“提交”,直至网站出现“投稿成功,请从邮局汇元审稿费”提示后为投稿成功。()投稿成功并汇审稿费后天左右,作者可随时登陆网站点击“稿件查询”查询稿件初审结果,如通过初审则进入“专家审理”阶段,审稿周期为个月。稿件审理结果将及时在网站发布。 急性软组织损伤大鼠不同赋形剂调制七厘散外敷疗效的实验研究作者:作者单位:刊名:英文刊名:年,卷(

18、期:引用次数:彭细果, 徐生红, 彭力平, PENG Xi-guo, XU Sheng-hong, PENG Li-ping深圳市福田区中医院,广东,深圳,518034护理学报JOURNAL OF NURSING2008,15(80次参考文献(9条1. 周国林 一种动物软组织损伤的实验方法期刊论文-中国药理学通报 1991(52. 国家药典委员会 中华人民共和国药典 20003. 陈鋆. 刘振香. 章丽华 HPLC法测定大七厘散中血竭素的含量期刊论文-中国药师 2006(124. 孙文基. 绳全房 天然活性成分简明手册 19985. 姚全胜 栀子抗炎、治疗软组织损伤有效部位的筛选研究 1991

19、(86. 孙晓波. 徐惠波 现代方剂药理与临床 20057. 屠锡德 生物药剂学 19988. 于永翔. 李振广 浅谈酒制中药的作用与方法 19989. 屈庆玲. 满博文 谈中药醋制的作用期刊论文-河南中医 2004(6相似文献(10条1.期刊论文 李卫星. 谭大琦. 李秋华. 姜楠. 刘桂喜. 洪文 消瘀止痛膏对大鼠急性软组织损伤的治疗作用 -中医正骨2000,12(11消瘀止痛膏治疗急性软组织损伤临床疗效显著.为探讨其治疗机理,采用钝头铁杵从上向下自由落体造成73只Whistar大鼠右下肢非开放性软组织损伤模型,以麝香壮骨膏为对照,进行用药前后的肉眼和病理组织学观察,结果表明消瘀止痛膏治疗

20、后大鼠病变损伤程度明显低于基质膏对照组,P0.050.01.提示该药具有明显的消肿抗炎祛瘀治疗作用.2.期刊论文 曾平. 廖小波. 欧海玲. 黄海滨. 叶星江 五方膏外敷治疗大鼠急性软组织损伤的实验研究 -中医正骨2007,19(4为探讨五方膏对大鼠急性软组织损伤的治疗效果和作用机制.将60只Whistar大鼠随机分为五方膏组(A组、芬必得乳膏组(B组与空白组(C组,造成大鼠急性软组织损伤的动物模型,A、B组分别外敷五方膏和芬必得乳膏,C组不用药.以损伤症侯指数、血浆黏度、组织学作为观察指标进行实验观察.结果五方膏组在损伤症侯指数、血浆黏度、组织学方面均优于芬必得乳膏组和空白组.表明五方膏具有

21、抑制创伤局部无菌性炎症反应,降低血液黏度,改善微循环,促进伤区血肿吸收和组织修复的作用,是治疗急性软组织损伤的一种有效的外用中药制剂.3.期刊论文 何朝勇. 李楠. 陈丽华. 马捷. 李卫东 奇正消痛贴治疗急性软组织损伤实验研究 -中医正骨2008,20(11目的:为探讨奇正消痛贴对动物急性软组织损伤的治疗作用及可能机制.方法:制备大鼠软组织损伤模型,造模后分组并给药.动态测定大鼠损伤症侯指数、血浆黏度、组织学及形态计量学指标,同时测定血浆IL-1水平的改变.结果:奇正消痛贴对急性软组织损伤动物模型有良好的恢复作用,给药组在损伤症侯指数、血浆黏度、组织学恢复方面优于模型对照组,奇正消痛贴可使模

22、型过高的血浆IL-1水平降低.结论:奇正消痛贴具有改变急性软组织损伤症侯作用,该作用与其改善血液黏度、改善微循环和降低炎症介质IL-1释放有关.4.期刊论文 于东安. 杨士友. 黄世福. 阚红卫. 徐鹏夫. 陈菡. YU Dong-an. YANG Shi-you. HUANG Shi-fu. KAN Hong-wei. XU Peng-fu. CHEN Han 复方冰红软胶囊活血化瘀及治疗急性软组织损伤研究 -中国实验方剂学杂志2008,14(11目的:研究复方冰红软胶囊活血化瘀及治疗急性软组织损伤的作用.方法:用动物血瘀模型观察复方冰红软胶囊对大鼠血液流变性、体外血栓形成及血小板黏附率的影

23、响;打击造成大鼠急性软组织损伤,观察复方冰红软胶囊对大鼠软组织损伤程度及病理组织学的影响.结果:复方冰红软胶囊能明显改善模型大鼠血瘀症状及急性软组织损伤的损伤程度.结论:复方冰红软胶囊具有较好的活血化瘀及治疗急性软组织损伤的作用.5.期刊论文 符晓. 殷樱. 宋琦. 许川山. 蒋玮. 周媛. 虞乐华. FU Xiao. YIN Ying. SONG Qi. XU Chuanshan. JIANG Wei. ZHOU Yuan. YU Lehua 低频超声治疗急性软组织损伤的实验研究 -临床超声医学杂志2008,10(4目的 研究两种低频超声治疗大鼠急性软组织损伤后的变化及修复过程.方法 建立急

24、性软组织损伤的大鼠模型,随机分为4组(自然愈合组、假治疗组、0.5 W/cm.治疗组和1 W/cm2治疗组,采用连续超声波治疗,并进行大体和病理观察.结果 治疗第2,4,6天局部软组织损伤的修复,两个治疗组明显好于自然愈合组和假治疗组(P0.05,自然愈合组与假治疗组无明显差异,2个治疗组间也无明显差异.结论 低频超声能加快急性软组织损伤后的修复.6.期刊论文 章建华. 丁伟国. 袁建迪. Zhang Jianhua. Ding Weiguo. Yuan Jiandi 三黄软膏治疗急性软组织损伤的实验研究 -浙江中医药大学学报2009,33(2目的观察三黄软膏对急性软组织损伤大鼠的疗效并探讨其

25、作用机理.方法用随机数字表法将36只大鼠分成正常组(A6只和实验组(B、C、D、E、F30只,将实验组制造急性软组织损伤模型.造模成功后再将实验组随机数字法分为模型对照组(B、基质对照组(C、青鹏膏对照组(D、三黄低剂量组均优于B、C组(P<0.05;与B、C组分别比较,D、E、F组损伤局部组织前列腺素E2(PGE2的含量明显下降(P<0.05.结论表明三黄软膏对急性软组织损伤 动物模型有良好的治疗和修复作用. 7.期刊论文 张根印.牛淑亮.杨宁.Zhang Genyin.Niu Shuliang.Yang Ning 苏栀消肿膏对急性软组织损伤模型大鼠 血液流变学的影响 -陕西中医

26、学院学报2008,31(3 目的 探讨苏栀消肿膏活血祛瘀的作用机理.方法 健康SD大白鼠,造成急性软组织损伤模型,随机等分为空白组、模型组、正红花油药物对照组和苏栀 消肿膏药物治疗组,药物组用药2次/d,连续治疗4 d.第5 d处死动物,快速心脏取血,测定血液流变学各项指标.结果 苏栀消肿膏、正红花油对大鼠急性软 组织损伤模型血液流变学的异常,均有明显治疗作用,但在降低血浆粘度及全血粘度方面苏栀消肿膏优于正红花油.结论 苏栀消肿膏能够有效改善急性软 组织损伤模型大鼠血液的高浓、粘、聚、凝状态,达到活血祛瘀、消肿止痛的治疗效果. 8.期刊论文 张乐之.孟德胜.温宝书.吕金胜.魏斌 祛瘀宁痛贴治疗

27、急性软组织损伤的机理探讨 -中国临床药理学与 治疗学2004,9(9 目的:探讨祛瘀宁痛贴治疗急性软组织损伤的作用机理.方法:采用大鼠急性软组织损伤模型,观察祛瘀宁痛贴对大鼠血液流变学指标、血小板聚集率 和血栓形成的影响.结果:祛瘀宁痛贴0.3、0.9、1.8 g·kg-1生药能明显降低急性软组织损伤大鼠的全血粘度、血浆粘度、纤维蛋白原含量、红细胞压积 ,减慢血沉速度,降低血沉K值,缩短红细胞电泳时间,并能抑制血小板聚集率和体外血栓形成(P0.05或P0.01.结论:改善血液流变学,抑制血小板聚集 和血栓形成,可能是祛瘀宁痛贴治疗急性软组织损伤作用机理的一方面. 9.学位论文 韦怀籍

28、 骨八方治疗急性软组织损伤的临床及实验研究 2007 目的:骨八方是全国名老中医陈渭良教授根据多年临床经验总结出来的经验方,主要用于治疗创伤早期淤血热证,尤其是偏于上肢者。本课题在总 结以前工作经验以及其他学者研究的基础上,观察骨八方在治疗急性软组织损伤的临床治疗效果,并通过随机对照动物实验进一步研究骨八方治疗急性 软组织损伤的作用机制,为骨八方的应用及推广提供进一步的科学依据,为临床新药开发作前期工作。 方法:(1文献研究:通过查阅大量古代和 现代中、西医国内外文献,总结和评价有关急性软组织损伤肢体肿胀中西医发病机制、治疗措施、临床及实验研究现状。(2临床研究:采用随机对照的 研究方法,观察

29、创伤骨折后急性软组织损伤肢体肿胀病人,随机分为骨八方治疗组及云南白药对照组,疗程为1周,观察记录治疗前后主要症状、体征 (伤肢周径及患者自觉症状如疼痛等。(3实验研究:软组织压榨伤模型复制:参照周国林等一种动物软组织损伤的实验方法进行造模;对软组 织损伤修复作用的研究:取大鼠20只,随机分组、造模、灌喂给药7天后,取挫伤部位皮肤和肌肉,10甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜观察、 记录肌纤维坏死、炎细胞浸润情况;活血化瘀作用的研究:取大鼠32只,随机分组、造模、灌喂给药7天后,腹主动脉取血,肝素抗凝,25恒温下测 定血液流变学各项指标(全血粘度、血浆粘度、红细胞压积及还原粘度、血沉等。 结果:(1文献研究:急性软组织损伤是骨折最常见的合并症。 近年来临床治疗上取得较大突破,不仅有传统的中药煎剂内服、外用药,还有中成药内服、静脉用药的出现。实验研究方面主要为药物的软组织损伤修 复、抗炎镇痛及活血化瘀等方面。软组织损伤的修复主要是在造成急性软组织损伤模型后进行损伤症侯指数评价及病理切片组织学观察(主要包括横纹肌 坏死面积及炎症细胞浸润情况等<'2931>。抗炎研究的经典实验方案有大鼠足跖肿胀法、小鼠耳片肿胀法及毛细血管通透性法<'3235>;镇痛作 用研究的经典实验方案有小鼠热板致痛实验及小鼠冰乙酸致痛实验

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