葡萄籽原花青素对DOCA-盐高血压小鼠心室重构的影响

1、葡萄籽原花青素对DOCA-盐高血压小鼠心室重构的影响葡萄籽原花青素对DOCA-盐高血压小鼠心室重构的影响#汪星辉，黄玲玲，余婷婷，郭言伟，杜苏明，贾媛，高杉*基金项目：教育部高等学校博士学科点专项科研基金（No 20103420120002）；国家自然科学基金资助项目（No 81073088）作者简介：汪星辉，（1987-），男，硕士研究生，主要研究方向：心血管药理学通信联系人：高杉，（1974-），男，副教授，心血药理学. E-mail: 1.2.4 血清MDA 含量和SOD 活性测定MDA 含量测定采用硫代巴比妥酸法，严格按照试剂盒说明在532 nm 处测定血清中MDA 含量。SOD 活性

2、测定采用黄嘌呤氧化酶法，严格按照试剂盒说明在550 nm 处测定血清中SOD 活性。85 1.3 统计学处理数值以xs 表示。组间比较采用方差分析或两独立样本非参数检验。用SPSS10.0 统计软件进行分析。2 结果2.1 GSP 对DOCA-高盐高血压小鼠心脏重量指数、肾脏重量指数的影响90 皮下注射DOCA 及高盐饮水四周后，与单肾对照组相比，模型组心重指数、肾重指数明显升高，GSP 可明显抑制心重指数、肾重指数的升高，差异具有统计学意义（P0.01）。表明GSP 可改善DOCA-高盐所致的心室重构，减少高血压对肾脏的损伤。（见表1）表1 GSP对DOCA-高盐高血压小鼠肾脏重量指数、心脏

3、重量指数的影响组别 BW(g) HW(mg) KW(mg) HWI(mg/g) KWI(mg/g)单肾对照组8 25.212.98 99.8516.11 199.7127.78 3.940.19 7.900.29模型组 8 28.184.99154.528.88257.6237.715.490.57*9.180.63*GSP 用药组 7 25.213.81 111.8621.68208.5743.214.430.34#8.220.46#95 与单肾对照组比较，*P0.01;与模型组比较，#P0.012.2 GSP 对DOCA-高盐高血压小鼠心肌细胞横截面积和纵径宽度的影响与单肾对照组相比，高血

4、压模型组心肌细胞横截面积及纵径宽度明显增加，差异有统计学意义（P0.01）。与模型组相比，GSP 用药组心肌细胞横截面积和纵径宽度减小，差异有100 统计学意义（P0.01），见图1。ABC0501001502002501 2 3心肌细胞横截面积#*#D0481216201 2 3心肌纵径宽度*#110图1 GSP对DOCA-高盐高血压小鼠心肌细胞横截面积和纵径宽度的影响（xs, n=7-8）A: 心肌细胞横截面积代表图(HE400); B: 心肌细胞纵径宽度代表图(HE400); C:心肌细胞横截面积统计结果；D:心肌细胞纵径宽度统计结果；1：单肾对照组；2：DOCA-盐高血压模型组；3：G

5、SP130mg/kg. 与单肾对照组比较,. *P0.01;与模型组比较，#P0.011152.3 GSP 对DOCA-高盐高血压小鼠心肌组织胶原纤维含量的影响VG 染色后，心肌组织呈黄色，胶原纤维呈红色。与单肾对照组相比，模型组心肌胶原纤维明显增多，心肌CVF 和PVCA 增加，差异具有统计学意义。与模型组相比，GSP 用药组心肌胶原纤维明显减轻，心肌CVF 和PVCA 降低，差异有统计学意义（P0.01）见图2。120 A125B130C0246810121 2 3组别PVCA*#D0246810121 2 3组别CVF*#135 图2 GSP对DOCA-高盐高血压小鼠心肌组织胶原纤维含量

6、的影响（xs，n=78）A. 心肌血管周围胶原VG染色代表图(400); B.心肌间质胶原VG染色代表图(400); C. 心肌血管周围胶原容积分数(PVCA)；D.心肌间质胶原容积分数(CVF). 1:单肾对照组. 2: DOCA-盐型高血压模型组; 3: GSP 130mg/kg 组; 与单肾对照组比较: *P0.01; 与模型组组比较: #P 0.01140 2.4 GSP 对心肌组织Hyp 含量的影响皮下注射DOCA 及高盐饮水四周后，模型组心肌组织Hyp 含量较对照组明显增加，差异具有统计学意义（P0.01）。与模型组相比，GSP 用药组心肌组织Hyp 含量明显减少，差异具有统计学意

7、义(P0.05，P0.01)，见图3。00.020.040.060.080.11 2 3心肌组织Hyp含量(m)*#*图145 3 GSP对心肌组织Hyp含量的影响（xs，n=78）1:单肾对照组；2：DOCA-盐型高血压模型组；3：GSP130mg/kg组； 与单肾对照组比较，*P0.01;与模型组比较，#P0.05.2.5 GSP 对血清MDA 含量和SOD 活性的影响150 与单肾对照组相比，高血压模型组血清MDA 含量明显增加，血清SOD 活性明显降低。经GSP 连续四周灌胃给药后，用药组较模型组血清MDA 含量明显减少，血清SOD 活性明显升高，表明GSP 具有一定的抗氧化应激损伤的

8、药理作用(见表2)。表2 GSP对血清MDA含量及SOD活性的影响（xs，n=78）组别 n MDA(nmol/ml) SOD(U/ml)单肾对照组 8 5.221.21 1.150.086模型组 8 6.970.79* 0.930.12*GSP 用药组 7 5.430.69# 1.070.07#155 与单肾对照组比较，*P0.01;与模型组比较，#P0.01，#P0.053 讨论DOCA - 盐诱导的高血压模型(DHR) 是一种继发性高血压模型,与人类高血压中的原发性醛固酮增多症相似。DOCA 作为醛固酮的前体，与醛固酮有相似的生理作用：保钠排钾，160 促进Na+的重吸收，长期或过量应用

9、将导致水钠潴留、血容量增大、肾素-血管紧张素系统的活性受到抑制，血浆肾素活性低下，加剧肾脏损伤，形成高血压8。本实验研究结果显示，与单肾对照组相比，DOCA-盐型高血压模型组小鼠肾脏重量指数、心脏重量指数、心肌细胞横截面积明显增加，且差异具有统计学意义，说明高血压模型制备成功。GSP 作为自然界广泛存在的多酚类化合物，其对心血管系统的活性已逐渐被人们认识。165 既往研究显示GSP 可通过其强大的抗氧化、抗炎、降低动脉血压以及降低动脉粥样硬化风险指数、改善脂质特性等药理学效应而发挥心肌保护作用9。本研究结果显示，与模型组相比，GSP 组心肌细胞横截面积、心肌纵径宽度、心肌间质CVF、血管周PV

10、CF 及心肌Hyp含量均明显减小，说明GSP 可改善心肌间质及心肌血管周纤维化，抑制心室重构的发生和发展。170 氧化应激（Oxidative Stress，OS）是指体内氧化与抗氧化作用失衡，氧自由基蓄积对机体造成的一种病理状态，并被认为是导致疾病和衰老的一个重要因素。既往研究显示，DOCA-盐高血压模型存在氧化应激损伤10，主要表现为8 一羟基脱氧鸟嘌呤核苷含量增加、脂质过氧化、过氧化物增加以及NADPH 氧化酶活性升高11-12。近年来氧化应激与心室重构的关系受到国内外的广泛关注，大量研究表明氧化应激在心室重构的发生发展过程中扮演着175 重要角色13。氧化应激通过激活多种氧化还原敏感的信号转导通路，改变体内一系列的酶、细胞、分子、基因的表达，从而诱导心肌细胞的肥大，间质的纤维化等，最终导致心室重构14-15。本实验结果显示，与对照组相比，DOCA-盐型高血压模型组小鼠MDA 含量明显增加、SOD 活性明显降低，差异具有统计