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文档简介
1、(胆固醇氧化酶法)(胆固醇氧化酶法)一一、实验、实验目的目的学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。学习胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇的原理。掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。掌握血清总胆固醇的测定方法及操作技术。 (1)(3)H2O2+4-氨基安替吡啉(氨基安替吡啉(4-AAP)苯酚)苯酚游离胆固醇游离胆固醇FAAH2O 红色醌类物质红色醌类物质510nm二、实验原理二、实验原理血清总胆固醇血清总胆固醇游离胆固醇游离胆固醇胆固醇酯胆固醇酯胆甾烯酮胆甾烯酮+H2O2(2)游离胆固醇游离胆固醇三、实验器材三、实验器材材料:人血清试剂:总胆固醇测定试剂盒用具:分光光度计,微量移液枪,试管,试
2、管架,恒温水浴锅(1)取取3支试管,按下表加入试剂支试管,按下表加入试剂: :试剂试剂试剂空试剂空白管白管标准标准管管样品管样品管1样品管样品管2样品管样品管3工作试剂工作试剂(mL)1.01.01.01.01.0标准液标准液(uL)10.0血清样品血清样品(uL)10.010.010.0充分混匀,充分混匀,37 水浴中保温水浴中保温15min;冷却至室温后冷却至室温后,510nm处比色处比色比色方法:以空白管调零,读取标准管及样品管光密度值。比色方法:以空白管调零,读取标准管及样品管光密度值。(2)计算计算: 依据依据朗伯朗伯-比尔定律比尔定律: A=KLC 标准管胆固醇浓度:标准管胆固醇浓度:5.17mmol/L 样品样品管胆固醇浓度管胆固醇浓度( (mmol/L)样品管光密度值样品管光密度值 标准管光密度值标准管光密度值5.17C样=A样A标C标参考值胆固醇胆固醇 血清参考值:血清参考值:3.0 5.20mmol/L 危险阈值:危险阈值:5.2
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