肺炎支原体明胶颗粒凝集试验及其临床应用（课堂PPT）

1、肺炎支原体肺炎支原体明胶颗粒凝集试验明胶颗粒凝集试验及其临床应用及其临床应用成都市中西医结合医院 检验科 杨溪霖肺炎支原体（mycoplasmsa pneamoniae,MP）肺炎支原体肺炎肺炎支原体肺炎炎炎v支原体肺炎全年均可发病，以秋冬季多见。它由急性期患者的口、鼻分泌物经空气飞沫传播，引起呼呼吸吸道道感感染染。其发病主要与室内活动增加及密切接触有关。支原体感染也可表现为咽炎、气管支气管炎临床表现及实验室检查临床表现及实验室检查潜伏期潜伏期1-3周周起病形式多样，多数起病形式多样，多数患者仅以低热、疲乏患者仅以低热、疲乏起病起病部分患者可以突发高部分患者可以突发高热并伴有明显的头痛热并伴有

2、明显的头痛、肌痛、恶心等全身、肌痛、恶心等全身中毒症状中毒症状呼吸道症状以呼吸道症状以干咳干咳最突出，常持续最突出，常持续4周周以上，多伴有显著咽以上，多伴有显著咽痛，偶有胸痛、痰中痛，偶有胸痛、痰中带血；带血；呼吸道以外的症状呼吸道以外的症状中，以耳痛、麻疹样中，以耳痛、麻疹样或猩红热样皮疹较多或猩红热样皮疹较多见见阳性体征以显著的咽阳性体征以显著的咽部充血和耳鼓膜充血较部充血和耳鼓膜充血较多见多见外周血白细胞总数和外周血白细胞总数和中性粒细胞比例多正常中性粒细胞比例多正常，有些患者可升高，有些患者可升高常用方法常用方法接接血血凝凝试试验验(PHA)v 4.明明胶胶颗颗粒粒凝凝集集试试验验(

3、PA)v 5.酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验（ELISA）v 6.金金标标快快速速检检测测v 7.其其它它方方法：法：间间接接免免疫疫荧荧光光试试验验（IFA）、乳乳胶胶凝凝集集试试验验（LA）、免免疫疫印印迹迹测测定定（WB）、黏黏附附抑抑制制试试验、验、放放射射免免疫疫沉沉淀淀试试验、验、补补体体介介导导的的杀杀伤伤试试验验等等常用方法比较常用方法比较到到红红细细胞胞（禽禽类类或或羊）羊）上，上，与与血血清清中中的的抗抗Mp抗抗体体可可发发生生凝凝集集反反应。应。该该试试验验的的敏敏感感性性和和特特异异性性均均明明显显优优于于CFT。PHA不不能能区区分分抗抗体体的的类类型，型，因因此此

4、单单份份测测定定出出现现低低滴滴度度的的抗抗体体阳阳性性结结果果并并不不能能确确定定是是既既往往感感染染还还是是新新近近感感染。染。最最好好能能间间隔隔23周周再再采采取取第第2份份血血样样进进行行测测定，定，观观察察抗抗体体滴滴度度是是否否有有4倍倍以以上上的的增增加加（血血清清转转化）化）。单单次次测测定定出出现现高高滴滴度度抗抗体体阳阳性性（大大于于1:8）也也有有助助于于对对Mp新新近近感感染染的的判判断断v 明明胶胶颗颗粒粒凝凝集集试试验验(PA)：其其原原理理与与间间接接血血凝凝试试验验基基本本相相同，同，只只是是用用人人工工合合成成的的明明胶胶颗颗粒粒取取代代了了红红细细胞胞作作

5、为为凝凝集集试试验验的的载载体，体，从从而而使使结结果果判判定定更更清清晰，晰，静静置置稳稳定定性性更更好，好，非非特特异异性性反反应应大大大大减减少少，检检测测的的敏敏感感性性也也有有了了进进一一步步提提高高（对对IgM和和IgA更更敏敏感）感）被动凝集法被动凝集法被动凝集法被动凝集法结结果果判判读读容容易，易，过过夜夜后后判判读读不不发发生生显显著著变变化化2.消消除除红红细细胞胞载载体体引引起起的的非非特特异异性性凝凝集集3.特特异异性，性，灵灵敏敏度度较较高高4.血血清清MP抗抗体体滴滴度度与与MP感感染染者者病病情情的的严严重重程程度度呈呈正正相相关关被动凝集法被动凝集法SERODI

6、A- MYCOII操作步骤操作步骤被动凝集法被动凝集法缘缘均均匀匀且且平平滑滑的的圆圆形。形。2。粒粒子子形形成成小小环环状，状，呈呈现现出出外外周周边边缘缘均均匀匀且且平平滑滑的的圆圆形。形。3.粒粒子子环环明明显显变变大，大，其其外外周周边边缘缘不不均均匀匀且且杂杂乱乱地地凝凝集集在在周周围。围。4。产产生生均均一一的的凝凝集，集，凝凝集集粒粒子子在在底底部部整整体体上上呈呈膜膜状状延延展。展。MP感染的血清学及临床诊断MP的免疫性的免疫性感感染染后后也也不不能能产产生生完完全全的的保保护护性性免免疫疫v Mp特特异异性性的的IgM抗抗体体在在发发病病后后不不久久即即可可出出现现升升高，高

7、，14周周内内达达到到峰峰值，值，然然后后在在几几个个月月内内逐逐渐渐下下降降到到没没有有临临床床意意义义的的水水平。平。急急性性感感染染后后IgM的的持持续续时时间间在在不不同同个个体体中中差差异异较较大。大。儿儿童童的的IgM反反应应一一般般强强于于成成人，人，约约50%的的成成人人患患者者无无法法在在Mp感感染染后后测测到到IgM的的升升高高v IgG的的出出现现时时间间晚晚于于IgM，5周周左左右右达达到到峰峰值，值，上上升升速速度度较较慢慢且且在在体体内内的的持持续续时时间间较较长长（4年年左左右）右），但但在在感感染染数数月月后后就就会会下下降降到到较较低低水水平。平。有有些些儿儿

8、童童无无法法测测得得明明显显的的IgG反反应应v 特特异异性性IgA的的免免疫疫反反应应与与IgM类类似，似，但但其其在在成成年年人人尤尤其其是是老老年年人人中中的的反反应应水水平平更更高高血清学诊断后抗体产生，36周可达高峰，23个月后逐渐下降，故应在发病7d后采血检测。v通常检测滴度阳性起点为1：40，但在临床诊断上因隐性感染存在，此值多无临床意义。v一般认为成人1：801：160或以上对临床诊断有意义，儿童亦为1：160以上有意义。MP感染的临床诊断 道感染症状，无明显脏器所累。v （2）MP肺炎：有发热、咳嗽、呼吸困难及肺部啰音，胸片有片状影或相应影像学改变，MP血清学检测阳性。v （

9、3）MP肺炎肺外并发症（肺外脏器受累）：除明确诊断为MP感染外，同时可累及心、脑、肾、淋巴、血液系统等，并出现相应受累症状与体征，如出现胸腔积液、MP脑炎、感染后肾炎、心肌炎、血小板减少性紫癜，有者呈多脏器所累。MP血清学检测阳性。v （4）MP血症：MP血培养费时23周，对实验室技术要求较高。对肺炎支原体的治疗原则对肺炎支原体的治疗原则生生素素治治疗疗v 支支原原体体肺肺炎炎虽虽然然有有一一定定的的自自限限性，性，但但仍仍应应进进行行抗抗生生素素治治疗疗以以缩缩短短病病程程并并减减少少其其传传染染性性v 在在非非典典型型性性肺肺炎炎的的病病原原体体未未完完全全确确定定时，时，可可以以采采取取

10、一一些些经经验验用用药，药，对对Mp有有效效的的药药物物也也能能覆覆盖盖一一些些其其他他病病原原体体（非非病病毒毒类）类）v 抗抗生生素素的的使使用：用：首首选选为为大大环环内内酯酯类类，也也可可选选用用四四环环素素类类（老老年年人）人）和和喹喹诺诺酮酮类。类。Mp对对-内内酰酰胺胺类类抗抗生生素素天天然然耐耐药，药，磺磺胺胺类类对对Mp也也没没有有作作用用v 抗抗生生素素使使用用一一般般应应持持续续710天，天，但但口口服服用用药药延延长长至至1421天天也也是是合合适适的的v 除除使使用用抗抗生生素素外，外，还还应应采采取取一一些些对对症症治治疗疗措措施施（止止咳咳药、药、退退烧烧药、药、

11、止止痛痛剂剂等）等）MP肺炎的药物治疗中度MP肺炎可以口服大环内酯类抗生素，包括红霉素、罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素等。v重度MP肺炎在疾病进展时期可以静脉用药，但应适用时转变为胃肠道用药，v采用抗生素序贯疗法。阿奇霉素的特点素，其具有独特的药代动力学特征，即呈现多房室模型，有良好的组织渗透性，组织浓度高，在细胞和组织内的浓度可超过血液浓度的10100倍，炎症部位较非炎症部位浓度高6倍。这种优化的体内分布十分有利于致病菌的抑制和清除作用，它还能对MP发挥其一致蛋白合成的独特作用。v 阿奇霉素胃肠都反应轻微，大量以原型由粪便排出，清除缓慢而部明显损害肝脏功能。v 阿奇霉素半衰期长，具有显著的抗生

12、素后效应，由于组织对阿奇霉素的摄取快而释放慢，故其血浆半衰期接近70小时。v 临床上使用阿奇霉素3天即可停药，但在细胞内和被释放出的阿奇霉素浓度于57天内仍超出常见敏感细菌的最小抑菌浓度，而继续保持抗菌活性。v 阿奇霉素具有口服剂量小，口服次数少及疗程相对短的优点。治疗方法霉素或红霉素，阿奇霉素10mg/（kgd），每日1次，服3d停4d。中至重度支原体肺炎，静脉给药，选择阿奇霉素，10mg/（kgd），每日1次，用5d停3d（或用3d停4d）为一个疗程，总计2-3个疗程或更长。v 支原体血症主要表现为持续高热或驰张高热，肺部可见大片状阴影，血支原体抗体阳性，选择红霉素静滴，剂量同前，应用3-

13、7d，若支原体血症已控制，即体温下降，可改为阿奇霉素静滴或口服，总疗程4-6周。v 应用阿奇霉素的过程中，要取得家长的知情同意。混合感染（二重感染）原（合并细菌或病毒感染），vMP感染易引起EB病毒感染（传染性单核细胞增多）或二者混合感染，二者不仅临床症状相似，且都可疑引起血清嗜异凝集试验阳性反应，v除给予大环内酯类药物外，应同时给予抗炎、抗病毒治疗总结总结4入入院。院。v 4天天前前患患儿儿无无明明显显诱诱因因出出现现发发热，热，体体温温最最高高达达39.5，伴伴咳咳嗽，嗽，表表现现为为阵阵发发性性咳咳嗽，嗽，干干咳，咳，晚晚上上重，重，院院外外予予口口服服“阿阿莫莫西西林、林、头头孢孢克克

14、肟、肟、肺肺力力咳咳”2天，天，静静点点“头头孢孢呋呋辛、辛、炎炎琥琥宁宁（用用量量不不详）详）”1天天治治疗，疗，效效果果不不明明显，显，咳咳嗽嗽加加重重入入院。院。v 6-4门门诊诊胸胸片片示示:右右上上肺肺炎炎,右右肺肺上上肺肺不不张张按按序。序。v 入入院院查查体：体：体体温温39，神神清，清，精精神神尚尚好，好，热热性性病病容，容，口口周周无无发发绀，绀，呼呼吸吸促，促，咽咽充充血，血，双双侧侧扁扁桃桃体体度度肿肿大，大，充充血，血，呼呼吸吸35次次/分，分，右右肺肺上上呼呼吸吸音音减减低，低，心心腹腹未未见见异异常。常。v qd1d6-5阿阿奇奇霉霉素素10mg/kg/日日iv qd7dL,N:76.6%,L22.9%,CRP54mg/Lv 6-7胸胸部部CT示：示：右右肺肺上上叶叶不不张张v 6-7肺肺炎炎支支原原体体抗抗体：体：阴阴