紫外与荧光实验

1、 紫外与荧光实验 2 荧光Agilent8453仪器 1 紫外实验内容数据处理与实验报告PE公司LS55仪器实验内容数据处理与实验报告722Agilent8453光二极管阵列透镜光栅vAgilent8453仪器v 1 紫外同时全波长扫描仪器特点传统仪器分光过比色皿单波长检测 Agilent 8453过比色皿分光全波长检测 仪器特点每次测量均获得全谱标准差sA：0.001波长范围：190-1100nm 但190-220nm干扰大可靠线性范围:A2.5上限A=40246810020406080T%Er%T=36.8%A0.700.400.100.22吸光度A读数范围的选择光分析法http:/A的适

2、当范围T为常数时 T通常0.002 0.01c/c与T的关系图适当范围：A: 0.20.8T: 15% 65%A=0.434 吸光度A读数范围的选择光分析法http:/A的适当范围0.00.51.01.52.0020406080T%Er%A0.700.400.100.22T=13.5%新世纪，新仪器。c/c与T的关系图适当A: 0.12.0最佳T=0.135A=0.86好多教材没提及 但却是更有用的概念TT热噪声降低，T主要受散粒效应噪声影响 下式仪器操作Turn on 比色皿不要装太满比色皿不要装太满顶端差顶端差1cm较合适较合适放比色皿 光面对光路光面对光路, 敞开式敞开式向下压紧向下压紧

3、以下：全电脑操作！分光光度计Standard 模式操作步骤打开电脑及仪器开关 运行Instrument 1 online Mode中选Standard 放入参比溶液Blank 放入样品溶液 Sample全部样品测完保存文件按需取/使用数据Kinetics模式不常用打开电脑及仪器开关 运行Instrument 1 online Mode中选Kinetics 设置动力学参数 F7设定路径文件名自动结束t=0Start紫外实验内容实验内容讲义下载我们网站 IP： BBS 本科实验教学 实验安排及讲义专题帖绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数数课件下载仪器

4、分析实验 紫外实验内容熟悉仪器的操作选波长范围、模式等绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数数纯水参比blank自动扫描2种氨基酸的吸收曲线找出max及相应A转换成n阶导数光谱紫外实验内容绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系绘制吸收光谱及测定摩尔吸光系数数数据转换成*.dat文件计算max处的计算一阶导数光谱作原图及导数光谱图数据处理与实验报告结果与讨论-0.35-0.25-0.15-0.050.05200220240260280300/nmdA/d0.00.51.01.52.02.53.0200220240260280300/nmA紫外实验内容1. 稀释2份溶液 苯丙氨酸 色氨酸

5、2. 扫描光谱，看导数光谱3. 测一次荧光注意事项4 . 文件保存，用学号(03去掉), CSV格式 (每组4文件)例：1236Sd.csv/1236B.csv 实验专区数据下载 / 或直接2005本科仪器分析实验 分类UV/Fluor/IR/HPLC/TOC 自己的文件名5 . 数据网上下载 荧光实验仪器2003环科实验安排日期实验6/7实验8实验911月16日轮空28-33(1:30)轮空11月23日15-27(1:30)1-7(1:00)/22-27(3:00)2833(1:00)8-14(2:30)1-7(3:40)11月30日1-7&28-33(1:

6、00)8-14(3:00)8-14(1:00)/15-21(3:00)1521(1:30)21-27(3:00)12月7日网上预约开放实验(说明内容/仪器/时间1:30-4:30间)荧光的产生荧光的产生荧光的产生荧光的产生eeee吸收激发振动驰豫内部转换S1最低荧光辐射S0各振动能级2 荧光UV-Vis属于吸收荧光属于发光光致发光四面光比色皿荧光实验仪器2 荧光PE公司LS55仪器Luminescence Spectrometer荧光荧光/ /磷光磷光/ /发光发光 分光光度计分光光度计下图超级连接下图超级连接LS -55紫外实验内容熟悉仪器的操作氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量氨基

7、酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 2种氨基酸预扫描以水为空白测量激发、发射和同步荧光光谱找出max处的荧光强度测量2种氨基酸的激发、发射和同步荧光光谱紫外实验内容数据为txt格式, 可直接处理作ex/em/syn三种光谱图数据处理与实验报告结果与讨论氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量氨基酸的荧光激发、发射及同步荧光光谱的测量 找max及相应荧光强度报告在BBS上跟帖上传用学号注册如书面请在2周内交到老师处0200400600800200250300350400450/nmIf050100150200250300350250300350400450/nmIfsynem一天后有效紫外实验内容1. 稀释2份氨基酸溶液 浓度低多了！2. 软件使用3. 测一次UV注意事项4 . 文件保存，用学号