微生物学与免疫学：第十五章 病毒

1、BEA Confidential. | 1Nobel Prize in Physiology or Medicine BEA Confidential. | 2两种细胞“合作”定位The “cooperation” in position of two kinds of cell)早在100多年前，著名的西班牙科学家、神经系统研究的先驱卡赫曾经说过，“只要大脑的奥秘尚未大白于天下，宇宙将仍是一个谜”。中科院院士、脑科学研究专家杨雄里教授介绍，此次获奖的奥基夫于1971年在老鼠身上发现了大脑定位系统的第一个组成部分“位置细胞”。经过反复研究，奥基夫发现，老鼠在房间的某个特定位置时，其大脑海马区的

2、一些神经细胞总是处于激活状态，而老鼠移动到房间其他位置时，其他神经细胞则被激活。奥基夫总结出，这些“位置细胞”在大脑中形成了关于房间的“地图”。而莫泽夫妇2005年在老鼠海马区边沿的嗅觉皮层又发现了大脑“内置GPS”的另一关键构成“网格细胞”。这种细胞能形成坐标系，可以精确定位和寻找路径。此外，他们还研究出这些“网格细胞”是如何确定位置并导航的。 正是由“位置细胞”和“网格细胞”共同组成的定位系统，解答了“我们如何知道自己在哪里”、“我们怎样找到路径，从一个地点到达另一个地点”以及“我们如何储存这些信息，从而确保下次寻找相同路径时可立即获得”这几个问题，同时也为人们的自我认知提供了细胞意义上的

3、基础。第十五章 病毒有趣的事情美国马里兰大学一位科学家有一个科学项目，获取蝙蝠，提取样品，获得全部RNA，然后把基因组RNA去掉，分析剩下的部分，看是否有病毒，因为蝙蝠是一个庞大的病毒库。SARS、非典慢性病毒就是由中国的蝙蝠起源的；BEA Confidential. | 5有趣的事情我们都生活在病毒的海洋里我们周围到处都是病毒，空气里、水里、教科书上我们每分钟呼吸6升气体，每天吃公斤级的食物海水中每毫升有百万个病毒；我们的基因组里携带者病毒的基因；我们的宠物，我们周围的植物，昆虫都带有病毒，我们无处可逃；病毒还可以在不同的生物之间传播；必须有一个健康的身体，强大的免疫系统BEA Confid

4、ential. | 6有趣的事情病毒如此强大的原因就在于它有一个巨大的数量；例如，噬菌体，全球水源中的噬菌体有10的30次方个，相当于1000头大象的体重；如果把噬菌体头尾相连，单行排列，其长度有2亿光年；BEA Confidential. | 7BEA Confidential. | 8离地球最近的仙女座星系，有250万光年。有趣的事情地球上有10的16次方个HIV基因组；它们还在突变，躲避免疫系统，和药物的治疗；新药研发的速度永远赶不上HIV基因组的突变速度；一个死局。BEA Confidential. | 9有趣的事情每个人的基因组里都镶嵌者数以千计的逆转录病毒基因；占到了DNA的8%；

5、正是这8%的基因，把人和黑猩猩区分开来；人类的基因与黑猩猩的相似度是95%，那5%的区别主要是逆转率病毒部分。BEA Confidential. | 10BEA Confidential. | 11病毒的发现和研究历史1886年，A. Mayer 发现具有传染性的烟草花叶病；1892年，D. Ivanovsky证明烟草花叶病病原体能通过细菌滤器： 一种能通过细菌滤器的细菌毒素或极小的细菌1898年，M W Beijerinck对烟草花叶病病原体的研究结果： 能通过细菌滤器； 可被乙醇沉淀而不失去其感染性， 能在琼脂凝胶中扩散； 用培养细菌的方法不能被培养出来，推测只能在植物活细胞中生活；比细菌

6、小的具有传染性的活的流质BEA Confidential. | 121900年前后，包括口蹄疫（foot and mouth disease）在内的多种动植物疾病病原体的滤过性特性被证明。filterable viruses（滤过性病毒）viruses（病毒）F W Twort（1915年）、F dHerelle（1917年），分别发现细菌（Shigella dysenteriae）病毒bacteriophagesPhago：“to eat”噬菌体（phage）1935年，W M Stanley首次提纯并结晶了烟草花叶病毒； Bawden等证明烟草花叶病毒的本质为核蛋白；1940年，Kausc

7、he首先用电镜观察到烟草花叶病毒颗粒；BEA Confidential. | 13病毒 (virus) 一类体积微小，结构简单，含一种类型核酸（DNA or RNA），必须在活细胞内才能生长增殖的非细胞型微生物 。BEA Confidential. | 14病毒的特点：个体微小(以纳米计)，能通过细菌滤器，必须用电子显微镜才能观察；无细胞结构，由内部核酸和外部蛋白质组成，且核酸只有一种（DNA or RNA）；两种存在形式：完整有感染性的病毒粒子宿主细胞外，病毒基因组（核酸）宿主细胞内；专性活细胞寄生物，不能在无生命的人工培养基上增殖；在宿主细胞协助下，以自身基因组为模板，以复制方式进行增殖；

8、 对多数抗生素不敏感，对干扰素敏感。具感染性BEA Confidential. | 15微生物种类 结构在无活细胞的培养基中生长二等分裂繁殖核酸类型 核糖体 敏感性 抗生素干扰素细菌原核细胞型+DNA，RNA+-支原体原核细胞型+DNA，RNA+-立克次体原核细胞型-+DNA，RNA+-衣原体原核细胞型-+DNA，RNA+-螺旋体原核细胞型-（+）+DNA，RNA+-真菌真核细胞型+出芽、产生孢子DNA，RNA+-病毒非细胞型-DNA或RNA-+BEA Confidential. | 16病毒的宿主范围病毒几乎可以感染所有的细胞生物，并具有宿主特异性动物病毒植物病毒昆虫病毒微生物病毒病毒学（v

9、irology） ：研究病毒（virus）的本质及其与宿主的相互作用的科学，是微生物学的重要分支学科。BEA Confidential. | 17一、病毒的大小与形态二、病毒的组成与结构三、病毒的分类四、病毒的增殖五、病毒的人工培养六、病毒的干扰现象与干扰素七、控制病毒性疾病的措施八、噬菌体BEA Confidential. | 18葡萄球菌(1000nm） 牛痘病毒300250nmABCDEFG立克次体450nm衣原体390nmA、大肠杆菌噬菌体 ( 65 95nm )B、腺病毒 (70nm )C、脊髓灰质炎病毒 (30nm )D、乙脑病毒 ( 40nm )E、蛋白分子 (10nm )F、流

10、感病毒 ( 100nm )G、烟草花叶病毒（250 18nm） 一、病毒的大小与形态BEA Confidential. | 19Orf virus：口疮病毒(接触性脓疱皮炎病毒)（负染技术）Ebola virus ：埃博拉病毒（正染技术）Vaccinia virus 痘苗病毒（投影技术）形态：球形，杆形，砖形，丝状，蝌蚪状BEA Confidential. | 20多数动物病毒呈球形或近似球形：脊髓灰质炎病毒、流感病毒、腺病毒等：多数植物病毒为杆状：烟草花叶病毒；有些病毒呈丝状或弹状：狂犬病毒；砖状：痘苗病毒、痘病毒；大多数细菌噬菌体有头和尾的结构，呈蝌蚪状：大肠杆菌噬菌体。BEA Confi

11、dential. | 21BEA Confidential. | 22病毒体组成和结构模式图壳粒衣壳核心（核样物）核衣壳包膜包膜病毒包膜子粒形态学术语病毒粒子：指成熟的、有感染性的和结构完整的病毒颗粒；在电子显微镜下呈一定的形态；衣壳：指包围病毒核酸或核蛋白核心的蛋白质外壳；衣壳粒：是构成病毒衣壳的形态学单位，由一条或多条相同或不同的多肽链组成；核衣壳：指病毒衣壳和病毒核酸的复合体。BEA Confidential. | 23形态学术语核心：指病毒核酸或病毒颗粒的中心部分，由单一核酸DNA或RNA构成，与蛋白质紧密相接，又称病毒基因组；包膜：包被在病毒核衣壳外，由脂质和蛋白质或（糖）蛋白组成的

12、囊膜；包膜子粒和刺突：处于病毒薄膜表面，向外突出的钉状病毒特异性糖蛋白为包膜子粒，它与无包膜病毒衣壳表面的突起统称为刺突。BEA Confidential. | 24BEA Confidential. | 25（1）毒粒、病毒粒子（viron）：结构完整的，有感染性的病毒颗粒。（2）衣壳（capsid）：包围和保护病毒核酸的蛋白质外壳（3）衣壳粒（capsomere）：构成衣壳的形态单位，由多肽链组成。（4）核衣壳（nucleocapsid）：病毒核酸和衣壳的复合体裸露毒粒（naked virion）：仅由核衣壳构成的病毒颗粒，如烟草花叶病毒、脊髓灰质炎病毒等一些简单的病毒。 （5）包膜（en

13、velope）：病毒在成熟过程中以出芽方式从宿主细胞释放时获得的一层外膜（含宿主细胞膜成分），由类脂或脂蛋白组成。 （6） 刺突蛋白（spike protein）/包膜子粒（peplomer)：包膜表面不同形状的突起，具有病毒特殊的抗原特性。如流感病毒的刺突上含有神经氨酸酶（NA）和血凝素（HA）二、病毒的组成和结构BEA Confidential. | 26毒粒的结构类型主要结构类型裸露的二十面体毒粒；裸露的螺旋毒粒；有包膜的二十面体毒粒；有包膜的螺旋毒粒；复杂毒粒（有尾噬菌体、痘病毒等）有包膜的螺旋毒粒裸露的螺旋毒粒裸露的二十面体毒粒 有包膜的二十面体毒粒复杂毒粒BEA Confident

14、ial. | 27病毒衣壳二十面体对称模式图BEA Confidential. | 28病毒衣壳螺旋对称模式图BEA Confidential. | 29病毒衣壳复合对称模式图BEA Confidential. | 30研究病毒形态学的方法 电子显微镜检查法 超过滤法 超速离心法 X线晶体衍射法BEA Confidential. | 31毒粒的化学组成毒粒核酸蛋白质脂类碳水化合物基本化学组成病毒颗粒在化学上表现为核蛋白BEA Confidential. | 32病毒的化学组成：核酸：DNA或RNA动物和人类病毒以线性dsDNA和ssRNA为多；植物病毒以ssRNA为多；噬菌体以线性的dsDNA

15、为多；真菌病毒都是dsRNA。每个病毒粒子只含有一个分子的核酸，核酸长度是一定的，一般由100-250000核苷酸组成。小的病毒只含有4-8个基因，大病毒如痘病毒则含有多余200个基因。BEA Confidential. | 33病毒的化学组成：蛋白质：主要组成部分，占病毒总重量的70%；具有病毒的特异性；病毒的衣壳、包膜和基质的主体成分是蛋白质；主要功能：1.保护病毒核酸；避免环境中的核酸酶和其他理化因素对核酸的破坏作用； 2.参与感染过程；衣壳蛋白和包膜上的蛋白能特异性的吸附至易感细胞表面的受体上； 3. 具有抗原性；能诱导体液免疫和细胞免疫。BEA Confidential. | 34病

16、毒的化学组成：脂类和糖：1.脂质主要存在于包膜中；2. 包膜中的绝大部分来自于宿主细胞膜；具有与宿主细胞膜的亲和及融合的性能；3. 包膜构成病毒体的表面抗原，与致病性和免疫性有关。4. 脂溶剂可除去包膜，使病毒失去感染性。BEA Confidential. | 35病毒的核酸（+）RNA：正链RNA，指病毒复制时RNA直接作为mRNA进行生物合成（病毒RNA与mRNA同极性），有感染性（-）RNA：负链RNA，病毒RNA与mRNA不同极性，无感染性BEA Confidential. | 36病毒蛋白质结构蛋白非结构蛋白在病毒复制增殖过程中产生并具有一定功能的蛋白质。构成一个完整的有感染性的病毒

17、颗粒所必需的蛋白质。壳体蛋白包膜蛋白存在于毒粒中的酶BEA Confidential. | 37病毒的包膜包膜由含有病毒糖蛋白的脂质双层膜组成，其中糖蛋白系病毒基因组所编码，脂质来源于宿主细胞。 一些病毒的包膜上具有功能性的突起物，叫做刺突(spike)，如流感病毒的刺突上含有神经氨酸酶(NA) 和血凝素(HA) 。流感病毒吸附到宿主细胞时，NA与细胞膜发生作用，HA可促进病毒凝集红血球细胞的能力。 与宿主细胞膜融合；致病性和免疫原性；脂溶剂去除BEA Confidential. | 38三、病毒的分类 （ 真）病毒：至少含核酸和蛋白质两种组分 非细胞生物 类病毒： 亚病毒 拟病毒：一类能引起

18、哺乳动物亚急性海绵样脑病的病原因子，其化学本质是蛋白质 只含不具侵染性的RNA组分。朊病毒：只含具侵染性的RNA组分。BEA Confidential. | 39核酸类型：DNA orRNA，ds or ss等， 线状或环状，分节段或不分节段 病毒的形态：球形，杆形，砖形，蝌蚪形等 壳粒的数目，排列和对称形式 包膜的有无 病毒的抗原性 宿主的种类，传播方式或媒介种类等病毒分类的基本原则: BEA Confidential. | 40按宿主的种类分动物病毒 脊椎动物病毒：感冒，肝炎，麻疹，水痘，腮腺炎，脊髓灰质炎，口蹄疫，鸡瘟昆虫病毒 桑蚕、蜜蜂避免病毒感染，防止农林害虫，新型无污染农药植物病毒

19、：TMV 能侵染200种植物微生物病毒：细菌噬菌体、放线菌噬菌体、真菌病毒 BEA Confidential. | 41朊粒未检出任何核酸对各种理化因素抵抗力强传染性很强有正常细胞编码的，构象异常的蛋白BEA Confidential. | 42现在已知的人和动物朊病毒病1） 库鲁（Kuru）病；2） 传染性病毒痴呆病或克-雅病， 又称早老性痴呆病；3） 吉斯特曼-斯召斯特列综合征4） 致死性家族性失眠病；5） 绵羊瘙痒病；6） 山羊瘙痒病；7） 大耳鹿慢性消耗病；8） 牛海绵脑病，即疯牛病；9） 猫海绵脑病；10） 传染性雪貂白质脑病；引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病BEA Confid

20、ential. | 43其致病作用是由于动物体内正常的蛋白质PrP c改变折叠状态为PrP sc所致，而这二种蛋白质的一级结构并没有改变。1997年，Stanley B. Prusiner荣获诺贝尔奖WHO将朊病毒病和爱滋病并立为世纪之交危害人类健康的顽疾！BEA Confidential. | 44朊病毒的发现与思考DNARNA肽链蛋白质BEA Confidential. | 45病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过其复制与表达产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然后由这些新合成的病毒组分装配（assembly）成子代毒粒，并以一定方式释放到细胞外。病毒的这种特殊繁殖方式称复制（rep

21、lication）。（一）、virus replication circle:吸附(Adsorption)侵入(Penetration)脱壳(Uncoating)生物合成(Biosynthesis)装配与释放(Assembly and Release)四、病毒的增殖BEA Confidential. | 46吸附侵入早期：病毒特异性酶的合成病毒核酸复制病毒结构蛋白质合成装配释放病毒大分子合成病毒的增殖脱壳BEA Confidential. | 47复制周期（replicative circle）或称复制循环：自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放到细胞外的病毒复制过程。包括： 吸附与侵

22、入； 脱壳； 病毒大分子的合成； 装配与释放。BEA Confidential. | 48病毒表面蛋白与细胞受体的特异性结合1、吸附与侵入BEA Confidential. | 49有尾噬菌体：注射方式将噬菌体核酸注入细胞吸附尾钉固着尾鞘收缩尾管穿入DNA注入通过因人为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠有吮吸式口器的昆虫取食将病毒带入细胞。植物病毒：BEA Confidential. | 50动物病毒完整病毒穿过细胞膜的移位方式；细胞的内吞功能；毒粒包膜与细胞质膜的融合；BEA Confidential. | 51病毒侵入后，病毒的包膜和/或壳体除去而释放

23、出病毒核酸的过程。病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，进入潜隐期。2、脱壳BEA Confidential. | 52以dsDNA为例： 早期转录 早期翻译 dsDNA mRNA 早期蛋白复制 晚期转录 晚期翻译子代dsDNA mRNA 晚期蛋白装配子代核衣壳其它核酸类型病毒（ ssDNA，(+)ssRNA，(-)ssRNA，dsRNA，逆转录病毒ssRNA等）的生物合成自学。即病毒基因组表达和复制的过程。包括：核酸复制 + 蛋白质合成3、病毒大分子的合成（生物合成）BEA Confidential. | 534、装配与释放（Assembly and release）大多数DNA病毒的核酸在细胞

24、核内复制，蛋白质在细胞质中合成，最后在细胞核内装配。eg：腺病毒。大多数RNA病毒核酸和蛋白质的合成及装配均在细胞质中。eg：脊髓灰质炎病毒。BEA Confidential. | 54大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放释放方式1、裂解性释放病毒包膜的基本结构与生物膜相似，是脂双层膜。在包膜形成时，细胞膜蛋白被病毒的包膜糖蛋白取代。 2、出芽（buding）有包膜的病毒在复制过程中不引起宿主细胞破坏，子代病毒以出芽的方式陆续释放，并同时获得包膜和包膜子粒（糖蛋白）。BEA Confidential. | 55动物病毒培养动物接种鸡胚培养细胞培养1）动物接种是最原始的病毒培养方法，根据病毒种类不

25、同，选择敏感实验动物及适宜接种部位。敏感实验动物：幼鼠、豚鼠、大鼠、兔、犬、猴等。适宜的接种途径，如：流行性乙脑病毒 小鼠脑内接种 痘苗病毒 家兔角膜接种 乙肝病毒 黑猩猩体内接种五、病毒的人工培养BEA Confidential. | 562）鸡胚培养孵育715天受精卵，注射器接种。受精卵培养4872小时，使病毒增殖。 分离病毒根据病毒种类不同，将病毒标本 接种于鸡胚的不同部位，最常用的鸡胚接种部位有：羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等。BEA Confidential. | 573）细胞培养（cell culture） 单层细胞培养法离体的活组织（eg：人胚肾，人成纤维细胞，新生瘤细胞，

26、猴肾细胞等），胰蛋白酶消化，获得单个多分散的细胞，细胞培养液贴壁培养成单层细胞，接种病毒，培育。 传代细胞系大多从癌瘤组织中分离，能在体外持续培养增殖。BEA Confidential. | 584）病毒在培养细胞内大量增殖的现象大多数动物病毒感染敏感细胞培养能产生致细胞病变效应（CPE），细胞内出现包涵体乃至细胞裂解等。BEA Confidential. | 591 细胞病变效应（cytopathogenic effect，CPE） 病毒在细胞内增殖而引起细胞发生的病理改变，常见的细胞形态学变化为：变圆，坏死，溶解，脱落，凝集。2 红细胞吸附(hemadsorption,HAd) 被感染的宿

27、主细胞膜上表达病毒特异性的血凝素（eg：流感病毒），能吸附动物红细胞。常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖。3 出现包涵体（inclusion body）. 被感染的细胞内会出现在光学显微镜下可见的大小不等、数量不等的圆形或不规则的小体，称为包涵体。4 干扰现象(interference) 病毒感染寄主细胞后能干扰随后进入的病毒的增殖。如风疹病毒感染Vero细胞时CPE不明显，但它能干扰后感染的埃可病毒 (ECHOV) 的增殖，从而阻抑后者所特有的CPE。 5 细胞代谢改变 病毒感染细胞的结果可使培养液的pH值改变，说明细胞的代谢在病毒感染后发生了变化。这种培养环境的生化改变也可作为判断

28、病毒增殖的指标。BEA Confidential. | 60植物病毒培养植物病毒敏感植物叶片产生坏死斑，或称枯斑BEA Confidential. | 61噬菌体的培养噬菌体细菌培养物培养液营养琼脂平板细菌培养液变清亮细菌平板成为残迹平板噬菌体标本经过适当稀释接种细菌平板，经过一定时间培养，在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域，即噬斑（plaque）。噬菌斑可用于对噬菌体的数目进行估算。BEA Confidential. | 62六、病毒的干扰现象和干扰素一）干扰现象病毒感染寄主细胞后能干扰随后进入的病毒的增殖。 在疫苗的制备和预防接种上重要意义：1、减毒活疫苗可阻止毒力较强的病毒感染；2、机体

29、感染毒力较弱的呼吸道病毒在一定时间内可降低对其它病毒的感染机制：竞争干扰、改变宿主代谢途径、产生干扰素等BEA Confidential. | 63二）干扰素（interferon，IFN）1、定义：动物机体细胞受病毒感染或在IFN诱生剂作用下所产生的能抑制病毒增殖和具有多种生物学活性（抑制细胞生长，免疫调节，抗肿瘤）的一类糖蛋白。 其抗病毒作用无特异性, 但有种属特异性，在同种细胞上的活性高于异种细胞。种类 型别 产生细胞 5630分钟 pH2.0 抗病毒作用 抗肿瘤作用 免疫调节作用IFN 白细胞 稳定 稳定 较强 较弱 较弱IFN 成纤维细胞稳定 稳定 较强 较弱 较弱IFN T细胞 灭

30、活 灭活 较弱 较强 较强2、 人IFN种类和性质BEA Confidential. | 64三）IFN的产生和作用机制 在细胞内合成的IFN不能直接作用于病毒，而是作用于邻近细胞的IFN特异的受体系统，使位于人体细胞的第21号染色体上长臂远端的抗病毒蛋白(AVP)基因解除抑制，转录并翻译出AVP。抗病毒蛋白(AVP)主要有两种:一种为蛋白激酶(RPK),它可以阻断病毒蛋白质的合成;另一种为2-5A合成酶,它可以降解病毒mRNA。 IFN分别从降解mRNA、抑制病毒蛋白质的翻译等方面发挥抗病毒作用。在正常情况下，存在于细胞核内的IFN结构基因处于抑制状态，不产生IFN。这种抑制状态是由基因系统

31、中的调节基因通过产生IFN结构基因抑制蛋白来实现的。它抑制了操纵基因的作用，因而结构基因就处于抑制状态。当IFN诱生剂进入细胞后，即与抑制蛋白相结合而使其失去抑制作用，因而操纵基因和结构基因的功能就被活化，指导IFN的合成。BEA Confidential. | 65四）IFN诱生剂1)病毒 尤为双链RNA病毒诱生IFN能力较高。2)细胞内繁殖的其他微生物 如细菌、立克次体，原虫和衣原体等。3)微生物代谢产物 如细菌的LPS，真菌多糖等。4)人工合成双链RNA poly I:C5)多聚物 聚丙烯酸，聚甲基丙烯酸，聚乙烯硫酸盐、磷酸化多糖、多核苷酸等。6)低分子物质 如环已亚胺、卡那霉素、梯洛龙

32、及其衍生物等。7)有丝分裂素 如植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA）、商陆、LPS8)中草药 如黄芪等。 BEA Confidential. | 66五）IFN的制备和临床应用 IFN-的临床应用：过敏性疾病 ：哮喘 ；异位性皮炎自身免疫性疾病：类风湿性关节炎(RA) ；系统性硬皮病 细菌真菌感染：慢性肉芽肿;结核病 ;麻风病 ;隐球菌病和念珠菌病 病毒性疾病：呼吸道合胞病毒(RSV)，毛细支气管炎 ;重症肝炎 抗纤维化作用抗寄生虫感染：在疟原虫、利什曼原虫、弓形虫、锥虫、阿米巴虫、艾美球虫和血吸虫等多种寄生虫感染中均有抗虫活性。 肿瘤白细胞或转化的人淋巴细胞产生 目前基因工程法生产的

33、干扰素已取代血制品。BEA Confidential. | 67IFN的疗效分布情况恶性病有效率恶性病有效率血 液 病实体瘤毛细胞白血病85%基底细胞癌86%慢性粒细胞性白血病66%类癌43%皮肤T细胞淋巴瘤65%肾癌41%巨球蛋白血症51%卡波西氏肉瘤35%低度恶性淋巴瘤37%卵 巢 癌19%浆细胞瘤(IgA、轻链型)27%恶性黑色素瘤15%BEA Confidential. | 68七、控制病毒性疾病的措施（一）、病毒对理化因素的抵抗力1 物理因素对病毒的作用（1）温度 一般病毒：60，30 min被灭活乙肝病毒：60，耐受4hr。病毒保存：-70 数月，-196数年。（2）UV、X-ra

34、y蛋白质和核酸中共价键断裂。（3） pH 68 范围内稳定。BEA Confidential. | 692 化学因素对病毒的作用1）脂溶剂：有包膜病毒对脂溶剂敏感。乙醚、氯仿、丙酮、阴离子去垢剂等均可使有包膜病毒灭活。2）氧化剂、卤素、醇类：H2O2、漂白粉、高锰酸钾、甲醛、过氧乙酸、次氯酸盐、酒精、甲醇等均可灭活病毒。3）抗生素和中草药。病毒对抗生素不敏感. 分离病毒标本时，用抗生素处理或在培养液中加入抗生素可抑制标本中的杂菌。对某些病毒有抑制作用的中药如板蓝根、大青叶、柴胡、大黄、贯仲等。BEA Confidential. | 70（二）抗病毒治疗1、抑制病毒与宿主细胞的结合、侵入与脱壳

35、如：盐酸金刚丸胺（抑制甲型流感病毒）2、干扰病毒生物合成过程 核苷类药物，酶的抑制剂等，如ara-C，ara-A ，无环鸟苷（阿昔洛韦），三氮唑核苷（病毒唑），ddC，ddI，AZT（叠氮胸苷）。3、免疫制剂：包括干扰素或干扰素诱生剂、人源 单克隆抗体、细胞因子等4、基因治疗5、中草药BEA Confidential. | 71控制病毒性疾病的措施和效果措施 效果 抗病毒谱 维持时间 免疫学 高 很窄 较长化疗 中 窄 很短IFN 中高 很广 较短BEA Confidential. | 72国家规定的儿童计划免疫项目接种的种类和接种时间基础免疫：出生：卡介苗； 2个月：小儿麻痹疫苗初服3个月：

36、小儿麻痹疫苗复服，百白破第1针4个月：小儿麻痹疫苗复服，百白破第2针5个月：百白破第3针加强免疫1岁半：百白破加强1针，麻疹疫苗复种，小儿麻痹疫苗加服4岁：小儿麻痹疫苗加强1次67岁：百白破加强1针，麻疹疫苗复种，卡介苗复种八、噬菌体(phage or bacteriophage) 定义：感染细菌、放线菌、真菌的病毒叫噬菌体。eg：大肠杆菌噬菌体（coliphage）BEA Confidential. | 741.形态: 蝌蚪形, 微球形, 丝状2. 结构3. 化学组成大肠埃希菌T4噬菌体结构（一）、噬菌体的生物学性状BEA Confidential. | 75 根据噬菌体与宿主菌的相互关系，

37、噬菌体可分为两类烈性噬菌体(virulent phage)：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。温和噬菌体(temperate phage)：噬菌体基因与宿主染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代。 噬菌体的复制周期或溶菌周期：从噬菌体吸附至细菌溶解释放出子代噬菌体的过程。噬菌体与宿主菌细胞的关系BEA Confidential. | 76烈性噬菌体在敏感菌内以复制方式进行增殖，增殖过程包括：吸附、穿入、生物合成、成熟和释放。上述烈性噬菌体的生长方式，称为一步生长。一步生长曲线（one-step growth curve）

38、定量描述烈性噬菌体增殖规律的曲线，即以培养时间为横坐标，噬菌斑数为纵坐标，绘制出的特征曲线，即为一步生长曲线。一步生长曲线分为潜伏期、裂解期和平稳期。烈性噬菌体BEA Confidential. | 77温和噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合，并随细菌分裂传至子代细菌的基因组中，不引起细菌裂解。整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体(prophage)，带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌(lysogenic bacterium). 前噬菌体偶尔可自发地或在某些理化和生物因素的诱导下脱离宿主菌基因组而进入溶菌周期，产生成熟噬菌体，导致细菌裂解。温和噬菌体这种产生成熟噬菌体颗粒和溶解宿主

39、菌的潜在能力，称为溶原性(lysogeny)。温和噬菌体BEA Confidential. | 78温和噬菌体可有三种存在状态：A. 游离的具有感染性的噬菌体颗粒；B. 宿主菌胞质内类似质粒的噬菌体核酸；C. 前噬菌体。溶原性细菌具有抵抗同种或近缘噬菌体重复感染的能力，称为噬菌体免疫状态某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变，这称为溶原性转换(lysogenic conversion)。如 白喉棒状杆菌 噬菌体BEA Confidential. | 79 （二）、噬菌体与宿主菌细胞的关系见P190 图12-9BEA Confidential. | 80噬菌体生活周期 烈性噬菌体 吸附穿入 增殖 成熟 裂解温和噬菌体 整合 同步复制 自发或诱导 （自发几率10-2-10-5）裂解性循环溶源性循环多次循环传代BEA Confidential. | 81（三）、噬菌体的应用噬菌体可用于细菌的鉴定和分型。分子生物学研究的重要工具。利用噬菌体表达的产物存在于噬菌体表面这一特性，通过多轮的抗原吸附-洗脱-扩增而大大简化筛选过程，已将噬菌体用于基因工程抗体库的建立。在菌种选育时可筛选抗噬菌体的突变株。还可供作抗病毒药物和抗肿瘤抗生素筛选的实验模型。也可通过测定标本中的噬菌体或应用噬菌体效价增殖试验，检测标本中的未知细菌。BEA Co