临床免疫学检验：第18章 免疫自动化仪器分析及应用

1、第十八章 免疫自动化仪器分析及应用(Chapter 17 automation of immunoassays and its application)临床免疫学检验第十八章 免疫自动化仪器分析及应用第一节 自动化免疫浊度分析系统第二节 自动化化学发光分析系统第三节 自动化荧光免疫分析系统第四节 自动化酶联免疫分析系统第五节 免疫自动化仪器分析选择与应用第一节 自动化免疫浊度分析系统免疫检验自动化（automation of immunoassays）是将免疫检验过程中的取样、加试剂、混合、温育、固相载体分离、信号检测、数据处理、结果报告和检测后的仪器清洗等步骤由计算机控制，仪器自动完成整个免

2、疫检验过程。优点减轻了劳动强度缩短了分析流程提高了试验结果的精确度和准确度第一节 自动化免疫浊度分析系统免疫比浊法透射免疫比浊法（turbidimetric immunoassay）散射免疫比浊法（nephelometry immunoassay）速率散射比浊法定时散射比浊法第一节 自动化免疫浊度分析系统一、免疫透射比浊法原理液相沉淀反应比浊剂抗体过量吸光度与抗原量呈正比波长：340nm第一节 自动化免疫浊度分析系统一、免疫透射比浊法原理仪器工作过程 试剂区 试剂针 样本区和稀释液 加样针 反应区 清洗工作站124365124365第一节 自动化免疫浊度分析系统一、免疫透射比浊法原理仪器工作过

3、程方法评价灵敏度较好抗体用量较大免疫复合物要足够大，足够多耗时长第一节 自动化免疫浊度分析系统二、免疫胶乳比浊法原理第一节 自动化免疫浊度分析系统二、免疫胶乳比浊法原理方法评价灵敏度提高类风湿因子的测定会出现非特异性凝集免疫胶乳轻度自凝或抗体活性降低第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法原理散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度呈正比；与微粒至检测器的距离、入射光波长呈反比。II042（dn/dc) 2 Mc(1+cos) N24第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法原理散射光强度与颗粒的分子量、数目、大小及入射光强度呈正比；与微粒至检测器的距离、入射光波长呈反比

4、。不同大小微粒形成的散射光分布不同，选用适当的角度测量散射光强度。第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法原理 颗粒直径1/10 Rayleigh 散射1/10颗粒直径 Debye 散射 颗粒直径 Mile 散射第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法定时散射比浊法预反应阶段：避开抗原抗体反应的不稳定阶段（7.5-120秒）反应阶段：在抗原抗体反应的最佳阶段读数（2-6min）抗原过量检测 抗体过量 抗原过量阈值限定第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法定时散射比浊法第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫

5、复合物的量。第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法原理速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。速率峰与抗原浓度呈正相关抗原浓度-速率峰反应曲线第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法原理速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。速率峰与抗原浓度呈正相关抗原浓度-速率峰反应曲线第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法原理第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免

6、疫散射比浊法速率散射比浊法原理速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。速率峰与抗原浓度呈正相关抗原浓度-速率峰反应曲线抗原过量检测第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法第一节 自动化免疫浊度分析系统三、免疫散射比浊法速率散射比浊法原理速率指抗原抗体反应在单位时间内形成的免疫复合物的量。速率峰指单位时间内免疫复合物形成量最多的速率。速率峰与抗原浓度呈正相关抗原浓度-速率峰反应曲线抗原过量检测方法评价：灵敏度高第一节 自动化免疫浊度分析系统四、免疫浊度分析的影响因素抗原抗体比例抗体的质量增浊剂的使用伪浊度入射光光源和

7、波长计量单位标准曲线的制备与质量控制第一节 自动化免疫浊度分析系统检测菜单（举例介绍，并不包含全部）第一节 自动化免疫浊度分析系统检测菜单（举例介绍，并不包含全部）自身免疫性疾病免疫球蛋白A (IGA) 免疫球蛋白G (IGG) 免疫球蛋白M (IGM) 补体C3 (C3) 补体C4 (C4) 轻链(KAP) 轻链(LAM) Free 轻链* Free 轻链*C-反应蛋白(CRP) 触珠蛋白(HPT) 备解素B因子(PFB)类风湿因子(RF)炎症状态监测白蛋白(ALB)-酸性糖蛋白(AAG)抗胰蛋白酶(AAT)铜蓝蛋白(CER) C-反应蛋白(CRP) 触珠蛋白(HPT) 类风湿性关节炎类风湿

8、因子(RF)C-反应蛋白(CRP)抗链球菌溶血素O(ASO) ADNase-B肾功能监测尿微白蛋白(MA)尿免疫球蛋白(IGU)尿转铁蛋白(TRU)1微球蛋白(A1M)2巨球蛋白(AMG)2 微球蛋白*胱抑素C*传染病抗DNA酶B(DNB)抗链球菌溶血素O(ASO)2 微球蛋白*贫血抗凝血酶III (AT3)铁蛋白(FER)转铁蛋白(TRF)触珠蛋白(HPT)免疫功能障碍评估免疫球蛋白A (IGA)免疫球蛋白E (IGE)免疫球蛋白G (IGG)免疫球蛋白M (IGM)IgG1亚型*IgG2亚型* IgG3亚型* IgG4亚型* 轻链(KAP)轻链(LAM)补体C3 (C3)补体C4 (C4)C-反应蛋白(CRP)超敏CRP (CRPH)肝脏疾病抗胰蛋白酶(AAT) 抗凝血酶III (AT3) 铜蓝蛋白(CER)补体C3(C3)补体C4(C4)免疫球蛋白A(IGA)免疫球蛋白M(IGM)尿转铁蛋白(TRU)前白蛋白(PAB)第四节 自动化酶联免疫分析系统一、仪器组成与性能步骤固相包被加样温育洗涤加酶结合物温育洗涤加底物温育比色第四节 自动化酶联免疫分析系统一、仪器组成与性能条形码识别系统样本架和加样系统试剂架温育系