穿山甲与猪蹄甲的化学成分比较

1、穿山甲与猪蹄甲的化学成分比拟【摘要】目的对穿山甲I和猪蹄甲II的成分进展比拟。方法用薄层层析法、紫外分光光度法，氨基酸分析仪对I、II水解液、水提液及醇提液的成分及氨基酸进展测定比拟。结果两者水提液、醇提液的薄层斑点颜色和Rf值一样；紫外吸收峰峰形根本一致；所含氨基酸一致，除个别氨基酸含量差异明显，其它氨基酸含量接近。结论猪蹄甲和穿山甲的提取物中所含成分相似且含量接近，这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了理论根据。【关键词】穿山甲猪蹄甲薄层层析紫外分光光度法氨基酸穿山甲的鳞甲，临床用于治疗痈疽疮肿、风寒湿痹、月经停闭、乳汁不通，外用止血1，并有明显的抗肿瘤作用，用于妇科卵巢肿瘤效果显著2；猪蹄甲临床

2、用于治疗痔疮、疽咳嗽喘息及通乳、补血等3。此外，民间有将猪蹄甲煅成炭后口服以治疗功能性子宫出血症的4用法。穿山甲是国家二级保护动物，其鳞甲为常用的贵重中药材。由于用量不断增大，野生资源已临灭绝，市场供需矛盾非常突出，因此，很有必要寻找新资源予以代用。据临床报道，猪蹄甲可代替穿山甲5，6使用，?本草纲目?记载了穿山甲与猪蹄甲作用疗效有一样之处，均可治痈疽、恶疮、痔漏、除痰化痰等。本文对穿山甲和猪蹄甲的水和70%乙醇提取物进展了薄层、紫外线及氨基酸含量等的分析，结果发现，两种提取物斑点颜色和Rf值根本一样；此外吸收峰形根本一致，含氨基酸的类型及含量也根本一样。现报道如下。1材料及仪器穿山甲已炮制，

3、购于南昌中药切制厂，猪蹄甲已炮制，购于南昌肉类加工厂。仪器：三用紫外线分析仪海顾村电光仪器厂，日立835-50型氨基酸自动分析仪，721型可见分光光度计上海第三分析仪器厂。所有试剂均为A.R级。2方法与结果2.1检测液的制备2.1.1水解液的制备称取穿山甲I粉末50.0g，参加6l/L的Hl250l，回流48h7，将水解液置于水浴上加热挥去Hl，取出参加活性炭，趁热抽滤，浓缩，定容，摇匀，灌装，密封，高温灭菌，备用。称取猪蹄甲II粉末50.0g，参加6l/L的Hl250l，同穿山甲水解液的制备，得猪蹄甲水解液。2.1.2醇提液的制备称取I粉末30.0g，参加70%乙醇240l8，回流1h，趁热

4、抽滤，滤液浓缩到一定量，定容50l，摇匀，灌装，备用。称取II粉末30.0g，照上法制得醇提液。2.1.3水提液的制备称取I粉末20.0g参加蒸馏水200l，煎煮1h，抽滤，滤渣中再加蒸馏水200l，煎煮1h，抽滤，合并两次滤液，浓缩，定容，摇匀灌装，密封后高温来灭菌，备用。称取II粉末20.0g，照上法制得水提液。2.2薄层分析2.2.1层析板的制备玻璃规格厚2左右，光滑清洁，210或420。铺板：硅胶G300g，参加0.7%-Na上清液60l，研钵中研成均匀糊状，立即铺层，凉干，105活化1h，枯燥器中备用。2.2.2点样液的制备将以上I、II醇提液、水提液各取40l浓缩至10l，装入小锥

5、形瓶中塞紧备用，水提液置冰箱中保存。2.2.3点样分别用微量进样器取上述I、II醇提液的浓缩制品15l，点样于硅胶G板上，分别以A、B、3种不同溶剂系统展开8，结果见图13。转贴于论文联盟.ll.A溶剂系统：展开剂正丁醇水饱和液无水乙醇31显示剂5%茚三酮无水乙醇液各点Rf值1I=0.1471II=0.1472I=0.2242II=0.2243I=0.3453II=0.3494I=0.4574II=0.4485I=0.7415II=0.7166II点为绿色，其它各荧光点均为淡紫色。B溶剂系统：展开剂正丁醇乙醇NH3H2411显色剂5%茚三酮无水醇液各点Rf值：1I=0.08221II=0.08

6、222I=0.2192II=0.2183I=0.2793II=0.2834I=0.6274II=0.6305I=0.9775II=0.9775I、5II、6II为紫色点，其它各荧光点均为黄绿色。由以上数据可看出，I、II醇提液或水提液在不同溶剂系统下展开后，其相应各点Rf值根本一样，荧光点的颜色也根本一致，说明二者成分根本一样。在上述两种提取液的薄层层析中，有一明显现象是II的斑点颜色和荧光点亮度均深于I的斑点，因在同一浓度下，说明II含有的成分量可能高于I。2.3紫外分析分别取I、II的醇提物和水提物于721型可分光光度计中，在不同波长处测其吸收度A，醇提物以70%乙醇为空白，水提物以蒸馏水

7、为空白，结果醇提物无吸收，水提物结果如图67。上图可看出I、II水提液在400n左右都有强吸收峰，二者波形相似，说明I、II含的成分相近。在两次测量中，AIIax-AIax最大吸收处A的差根本相等且左右图峰相似，说明I、II水提物最大吸收受时间影响不大，水提的方法得到的组分稳定性较好。2.4氨基酸含量的测定将I水解液0.2g/l，水提液0.4g/l，醇提液0.6g/l；II水提液0.2g/l，水提液0.4g/l，醇提液0.6g/l共6种样品取出一定量，用日立835-50型氨基酸自动分析仪测出其含游离氨基酸的量浙江医学科学院食品研究所测。结果见表12。表1必需氨基酸含量比拟略表2非必需氨基酸含量

8、比拟略由表12可以看出II水解液中必需氨基酸总量高于I水解液的必需氨基酸总量；I、II水解液中天氨酸、苏氨酸、丝氨酸、赖氨酸等含量根本一样，其它各种氨基酸含量也非常接近；所测的7种必需氨基酸中有5种的含量根本一致，说明I、II含有相似的肽类或蛋白质且含量相近。I、II水提液和醇提液中，各类氨基酸相对应的含量接近；必需氨基酸总量水提液中III。表中数据还可看出，水提方法所得的I、II的氨基酸总量远远高于70%乙醇提取液中的氨基酸总量。3讨论在TL、UV以及氨基酸检测中皆显示I、II两种供试液的成分根本一样，这为猪蹄甲代替穿山甲药用提供了一定的理论根据10。由氨基酸的测定结果可得，I、II水提液中

9、氨基酸含量均高于它们各自醇提液，说明水提效率高于醇提，这为在提取工艺中选择适宜的溶剂提供了一定的参考。在后续的工作中，我们将采用其他一系列的分析方法对穿山甲和猪蹄甲的成分作更深化全面的分析比拟。【参考文献】1江苏新医学院中药大辞典上海：上海科学技术出版社,1977：1728，3549.2敖保世穿山甲散治疗卵巢肿瘤8例报告J江西中医药，1981，31(3)：35.3杨立权，迟程穿山甲的研究概况与展望J云南中医学院学报，1994，174：46.4赵宜红,李寅超猪蹄甲、穿山甲的消痈作用J中医研究,2001,14(6):60.5付丽浅谈猪蹄甲与穿山甲的炮制方法J内蒙古药学，1985,(1)：44.6边振考,胡春光,吕晓顺猪蹄甲用于催乳的研究J中国药学杂志,1991,26(11)：663.7刘世勤穿山甲的化学成分J中药通报,1988,13(8):33.8高英，吕