idh1、ercc1和mgm在脑胶质瘤中的表达及其相关性研究

idh1、ercc1和mgm在脑胶质瘤中的表达及其相关性研究

脑胶原瘤是核电站脑肿瘤中发病率最高、预后最差的肿瘤，对人类健康构成了重大威胁。约占核电站脑肿瘤的35.26%60.69%（平均44.69%）。1数据和方法1.1胶质瘤的诊断收集2012年2月-2013年2月云南省肿瘤医院手术中切除的84例经病理学诊断为胶质瘤的肿瘤标本组织。84例患者中,男46例,女38例,年龄35~63岁,平均年龄44.6岁,病程2周至6个月。按照WHO关于中枢神经系统肿瘤分类法:Ⅰ级20例、Ⅱ级22例、Ⅲ级20例、Ⅳ级22例。1.2免疫药物的免疫组织化学所有标本均经过10%中性福尔马林处理固定,常规石蜡包埋,切片厚度4μm,进行HE染色,显微镜下观察并选取细胞形态良好的切片,进行目的蛋白的免疫组织化学SP法染色。浓缩型鼠抗人IDH1单克隆抗体购自广东深达生物公司,浓缩型鼠抗人ERCC1单克隆抗体购自云南晨绿生物公司,浓缩型鼠抗人MGMT单克隆抗体购自北京中山金桥生物公司。用已知阳性标本作阳性对照,以PBS代替一抗作阴性对照。1.3没有同时细胞发挥表达IDH1阳性表达以细胞核出现黄褐至蓝褐染色者为准,ERCC1阳性表达以细胞核出现棕黄色者为准,MGMT阳性表达以细胞浆出现淡黄至棕褐染色者为准;阳性率(阳性细胞总数与肿瘤细胞总数之比)≥20%为阳性表达,<20%则为阴性。1.4基因表达与病理分级的相关性采用SPSS17.0软件进行统计学处理,基因的表达在病理分级方面的差异性比较采用秩和检验,相关性采用Spearman相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1ercc1、memt突变阳性表达在细胞内的表达图1可见IDH1突变阳性表达主要位于细胞核内,免疫组化呈棕黄色。图2可见ERCC1突变阳性表达主要位于细胞核内,免疫组化亦呈棕黄色染色。图3可见MGMT突变阳性表达主要位于胞浆内,免疫组化呈棕黄色或棕褐色。以上阳性细胞呈均呈局灶性或分散性不均匀分布。2.2ercc1基因表达在病理分级和表1IDH1基因在Ⅰ级表达4例、Ⅱ级表达10例、Ⅲ级表达12例、Ⅳ级表达18例,IDH1基因的表达在病理分级方面差异有统计学意义;ERCC1基因在Ⅰ级表达2例、Ⅱ级表达10例、Ⅲ级表达14例、Ⅳ级表达18例,ERCC1基因的表达在病理分级方面差异有统计学意义;MGMT基因在Ⅰ级表达6例、Ⅱ级表达10例、Ⅲ级表达12例、Ⅳ级表达14例,MGMT基因的表达在病理分级方面差异无统计学意义(表1)。2.3idh1、memt基因表达与ercc1的相关性IDH1和ERCC1同时表达30例,同时不表达26例,经Spearman相关检验,γ=0.332,P=0.032,IDH1基因的表达与ERCC1基因的表达之间具有相关性(表2)。IDH1和MGMT同时表达32例,同时不表达30例,经Spearman相关检验,γ=0.477,P=0.002,IDH1基因的表达与MGMT基因的表达之间具有相关性(表3)。ERCC1和MGMT同时表达32例,同时不表达30例,经Spearman相关检验,γ=0.477,P=0.064,ERCC1基因的表达与MGMT基因的表达之间无相关性(表4)。3idh1、ercc1的基因表达与胶质瘤的关系最近发现的异柠檬酸脱氢酶1(IDHI)是体内重要的有脱羧作用的氧化还原酶,是三羧酸循环的关键酶之一。IDH1突变后会出现催化还原型辅酶Ⅱ(NADPH)依赖性的还原反应的能力,将α-酮戊二酸还原为2-羟基戊二酸,2-羟基戊二酸作为IDH突变后生成的代谢废物,一般在人体细胞中含量很低,如果大量累积,会直接抑制包括人体内组蛋白去甲基化酶与DNA去甲基化酶在内的多个重要双加氧酶的活力,改变细胞的增殖和生长方式,进而诱发肿瘤ERCC1基因位于人类染色体19q13.2,其作为核苷酸切除修复途径的关键基因,其高表达在肿瘤化疗耐药的产生中扮演了重要角色MGMT基因位于10q26,在DNA损伤的修复中起着极其重要的作用,主要通过不可逆地将烷化基团从O6-MG转移到MGMT蛋白145位的半胱氨酸残基上而保护细胞免受烷化剂的损伤本研究对IDH1突变与ERCC1进行经Spearman相关检验,表明IDH1突变和ERCC1在胶质瘤中的表达相关。结果提示IDH1、ERCC1在胶质瘤的发生、发展中有着相互作用、相互调节的关系,可作为一个潜在的早期诊断的分子标志。临床诊疗过程中可通过联合IDH1、ERCC1的检测判断神经胶质瘤恶性程度,可作为预测及早期诊断胶质瘤的潜在指标,并且可以将其作为判断预后的重要指标。本研究对IDH1突变与MGMT进行经Spearman相关检验,结果表明IDH1突变和MGMT在胶质瘤中的表达相关。结果提示IDH1突变、MGMT的表达在胶质瘤的发生、发展中可能有相互调节的作用;临床诊疗过程中可以通过联合检测IDH1突变、MGMT的表达来判断胶质瘤患者的预后及制定个性化治疗方案。在进行两个耐药基因ERCC1与MGMT间经Spearman相关检验,未发现有相关性,说明其耐药通过不同途径发挥作用,但通过联合检