2025年药品检验比赛试题及答案

2025年药品检验比赛试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1.依据《中国药典》2025年版四部通则0512高效液相色谱法，测定某难溶性药物的有关物质时，若流动相pH需调节至3.0（药物pKa为2.8），应优先选择的缓冲盐体系是（）A.磷酸盐缓冲液（pH3.0）B.醋酸盐缓冲液（pH3.0）C.枸橼酸盐缓冲液（pH3.0）D.三乙胺-磷酸盐缓冲液（pH3.0）答案：B解析：当流动相pH接近药物pKa时（相差≤0.2），药物解离状态易受pH微小波动影响，导致保留时间漂移。醋酸盐缓冲液的缓冲范围为pH2.5-4.0，在此pH3.0时缓冲能力强，且与C18色谱柱兼容性好；磷酸盐缓冲液在低pH（<3.0）下可能腐蚀色谱柱金属部件；枸橼酸盐缓冲液黏度较高，易堵塞系统；三乙胺常用于改善碱性药物峰形，本题未提及峰形问题，故优先选B。2.某中药注射剂需进行异常毒性检查，按《中国药典》2025年版通则1141，应选用的实验动物及给药途径为（）A.体重18-22g小鼠，尾静脉注射B.体重2.5-3.5kg家兔，耳缘静脉注射C.体重18-22g小鼠，腹腔注射D.体重300-400g大鼠，皮下注射答案：A解析：异常毒性检查适用于非静脉注射给药的制剂时，小鼠常用腹腔注射；但中药注射剂多为静脉给药，需模拟临床给药途径，故采用小鼠尾静脉注射（与临床给药途径一致）。家兔主要用于热原检查（通则1142），大鼠一般不用于异常毒性常规检查，故选A。3.采用原子吸收分光光度法（AAS）测定某原料药中的重金属铅（Pb），若样品中含有大量铁（Fe）离子，为消除其干扰，应采取的措施是（）A.加入氯化锶作为释放剂B.采用氘灯背景校正C.调节火焰类型为富燃火焰D.稀释样品至Fe浓度低于100μg/mL答案：A解析：Fe对Pb的干扰属于化学干扰（形成难挥发的铁铅复合氧化物），释放剂（如氯化锶）可与Fe结合，释放出Pb离子；氘灯背景校正主要消除背景吸收（如分子吸收）；富燃火焰（还原性火焰）主要用于易形成氧化物的元素（如Cr）；稀释可能导致Pb浓度低于检测限，故正确答案为A。4.某生物制品（重组人干扰素α-2b注射液）需进行纯度检查，《中国药典》2025年版要求采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS）法，其非还原型电泳的目的是（）A.检测二聚体、多聚体等聚合产物B.确认蛋白质一级结构完整性C.分离糖基化异构体D.验证二硫键连接方式答案：A解析：非还原型SDS（不加入β-巯基乙醇或DTT）可保持蛋白质分子内二硫键，若存在二聚体（通过二硫键连接）或多聚体（非共价结合），则迁移率降低，表现为高分子量条带；还原型电泳（破坏二硫键）用于检测单体纯度及一级结构。糖基化异构体分离需用毛细管电泳-电荷异质性方法，二硫键验证需质谱或氨基酸测序，故选A。5.对某固体制剂进行溶出度检查，采用桨法（转速50转/分钟），介质为900mLpH6.8磷酸盐缓冲液，30分钟时取溶液过滤，滤液在254nm处测定吸光度。若实验中误将转速调至75转/分钟，可能导致的结果是（）A.溶出度测定值偏高B.溶出度测定值偏低C.无显著影响D.介质体积减少答案：A解析：溶出度试验中，转速增加会加快药物从制剂中的释放（尤其对难溶性药物或骨架型制剂），导致单位时间内溶出量增加，测定值偏高。介质体积减少需通过补液操作，与转速无关，故选A。二、多项选择题（每题3分，共15分，错选、漏选均不得分）1.关于《中国药典》2025年版中“残留溶剂”的分类及限度要求，下列说法正确的有（）A.第一类溶剂（如苯）为人体致癌物，需严格控制，限度一般≤2ppmB.第二类溶剂（如甲醇）为非遗传毒性动物致癌物，限度一般≤3000ppmC.第三类溶剂（如乙酸）为低毒性溶剂，限度一般≤5000ppmD.第四类溶剂（如1,1-二氯乙烷）无足够毒理学数据，需根据生产工艺评估答案：ACD解析：第二类溶剂的限度通常≤1000ppm（如甲醇为3000ppm是特例，因毒性较低），多数第二类溶剂（如乙腈）限度为410ppm；第三类溶剂限度为5000ppm（ICHQ3C标准）；第四类溶剂需根据具体情况评估，故选ACD。2.采用高效液相色谱法测定某化学药的含量时，系统适用性试验需验证的参数包括（）A.理论板数B.分离度C.拖尾因子D.重复性答案：ABCD解析：《中国药典》2025年版通则0512明确规定，系统适用性试验应包括理论板数（柱效）、分离度（相邻峰分离程度）、拖尾因子（峰对称性）、重复性（连续进样RSD），必要时还需检查灵敏度（检测限），故选ABCD。3.中药饮片“大黄”的鉴别项目中，《中国药典》2025年版可能采用的方法有（）A.基源鉴定（检查原植物是否为掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄）B.薄层色谱鉴别（以大黄素、大黄酚为对照品）C.红外光谱鉴别（比对大黄饮片的指纹图谱）D.含量测定（测定总蒽醌和游离蒽醌的含量）答案：ABCD解析：中药鉴别需结合基源（来源）、性状、显微、理化（TLC、HPLC、IR）等方法。大黄的TLC鉴别以大黄素、大黄酚等蒽醌类成分为对照；红外指纹图谱可用于品种鉴别；含量测定要求总蒽醌（包括结合型）和游离蒽醌的含量，故选ABCD。4.关于生物制品“无菌检查”的说法，正确的有（）A.需同时进行需氧菌、厌氧菌和真菌检查B.采用薄膜过滤法时，若供试品有抑菌性，需冲洗膜至少3次C.阳性对照菌为金黄色球菌（需氧）、生孢梭菌（厌氧）、白色念珠菌（真菌）D.培养时间为需氧/厌氧菌5天，真菌7天答案：ABC解析：《中国药典》2025年版通则1101规定，无菌检查培养时间为需氧/厌氧菌14天，真菌14天（特殊情况可缩短至7天，但需验证）；阳性对照菌分别为金黄色球菌（需氧）、生孢梭菌（厌氧）、白色念珠菌（真菌）；薄膜过滤法冲洗次数需根据抑菌性确定，一般≥3次，故选ABC。5.某注射用盐酸头孢哌酮钠的检验项目中，属于“安全性检查”的有（）A.细菌内毒素检查（通则1143）B.异常毒性检查（通则1141）C.降压物质检查（通则1145）D.可见异物检查（通则0904）答案：ABC解析：安全性检查包括细菌内毒素（热原）、异常毒性、降压物质、过敏反应等；可见异物属于“制剂通则检查”（控制物理性杂质），不属于安全性范畴，故选ABC。三、判断题（每题2分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）1.采用紫外-可见分光光度法（UV-Vis）测定药物含量时，若供试品溶液浓度超过线性范围，可直接稀释后测定，无需重新绘制标准曲线。（）答案：×解析：稀释后浓度需在线性范围内，且标准曲线的线性范围应覆盖供试品浓度的稀释倍数。若稀释倍数过大（如超过标准曲线最高浓度的10倍），可能引入稀释误差，需重新验证线性或调整标准曲线范围。2.中药“黄曲霉毒素”检查需采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS），可同时检测黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的总量。（）答案：×解析：《中国药典》2025年版通则2351规定，黄曲霉毒素检查需分别测定B1、B2、G1、G2的含量（B1为主要毒性成分，限度≤5μg/kg；总量≤10μg/kg），HPLC-MS/MS可同时检测四种毒素，但需分别定量，而非总量。3.生物制品“效价测定”若采用酶联免疫吸附试验（ELISA），需设置空白对照、阴性对照、阳性对照和标准品系列，其中标准品需与供试品具有相同的免疫反应性。（）答案：√解析：ELISA效价测定的关键是标准品与供试品的免疫原性一致，否则会导致定量偏差。对照设置需包括空白（排除试剂干扰）、阴性（排除非特异性反应）、阳性（验证方法有效性）及标准品（绘制标准曲线）。4.某原料药的炽灼残渣检查中，若残渣经酸处理后仍有黑色颗粒，说明存在未灰化的有机物，需继续炽灼至完全灰化。（）答案：√解析：炽灼残渣检查的目的是控制无机杂质（如金属氧化物、盐类），若有黑色颗粒（碳化物），表明有机物未完全分解，需继续炽灼（通常在700-800℃）至恒重，否则残渣量会偏高（包含未灰化的碳）。5.气相色谱法（GC）测定残留溶剂时，若采用顶空进样，平衡温度越高越好，可提高灵敏度。（）答案：×解析：顶空平衡温度需根据溶剂的沸点和热稳定性选择。过高温度可能导致供试品分解（如产生挥发性降解产物），或使顶空气体压力过大（超过进样阀耐受范围），一般选择比溶剂沸点低10-20℃，或通过方法学验证确定最佳温度。四、简答题（每题8分，共24分）1.简述高效液相色谱法中“梯度洗脱”的适用场景及操作注意事项。答案：适用场景：①样品中各组分极性差异大（如同时含强极性和弱极性成分），等度洗脱无法在合理时间内完成分离；②复杂样品（如中药提取物、生物样品），需提高分离效率和峰容量；③缩短分析时间（强保留组分在高有机相比例下快速洗脱）。注意事项：①流动相需互溶（如水系与有机相），避免混合时产生沉淀（如磷酸盐缓冲液与高比例乙腈混合可能析出结晶）；②梯度变化需平缓（尤其在低波长检测时），避免基线漂移（由流动相紫外吸收差异引起）；③平衡时间需足够（通常为色谱柱体积的3-5倍），确保下一针进样前柱内流动相比例恢复初始状态；④需使用二元或多元高压泵，避免低压梯度混合时的气泡问题；⑤高比例有机相（如>90%乙腈）可能导致键合相收缩（C18柱），影响分离重复性。2.某中药制剂（颗粒剂）需进行“水分”检查，《中国药典》2025年版规定采用卡尔·费休法，简述其测定原理及操作中需注意的干扰因素。答案：测定原理：卡尔·费休法基于碘氧化二氧化硫时需要定量的水，反应式为：I₂+SO₂+H₂O+3C₅H₅N+CH₃OH→2C₅H₅N·HI+C₅H₅N·HSO₄CH₃通过电量法或容量法测定消耗的碘量，换算成水分含量。干扰因素及注意事项：①样品中的还原性物质（如亚硫酸盐、硫化物）会与碘反应，导致结果偏高，需预处理（如加入掩蔽剂）；②样品中的强氧化剂（如过氧化物）会氧化碘离子，使终点延迟，需避免或采用其他方法（如干燥失重法）；③样品中的弱碱性物质（如胺类）可能与卡尔·费休试剂中的甲醇反应提供水，需降低滴定速度或更换溶剂（如乙二醇甲醚）；④环境湿度需控制（≤60%），避免空气中水分进入滴定池；⑤颗粒剂需粉碎均匀，避免大颗粒包裹水分（影响溶解速度）；⑥卡尔·费休试剂需定期标定（每天至少1次），确保滴定度准确。3.简述生物制品“外源性病毒因子检查”的主要内容及常用方法。答案：主要内容：①细胞基质相关病毒（如生产用细胞系自带的内源性病毒，如小鼠杂交瘤细胞的逆转录病毒）；②原材料引入的病毒（如牛血清中的牛细小病毒、猪源性胰酶中的猪圆环病毒）；③生产过程污染的病毒（如操作不当引入的人源病毒，如HIV、HBV）。常用方法：①细胞培养法（直接接种敏感细胞，观察细胞病变效应CPE）；②动物试验（接种小鼠、大鼠、家兔等，观察发病或死亡情况）；③鸡胚接种法（检测流感病毒等嗜禽类病毒）；④免疫荧光法（IFA，用病毒特异性抗体检测感染细胞中的病毒抗原）；⑤核酸检测法（PCR或qPCR，检测病毒特异性核酸片段）；⑥电镜检查（负染电镜观察病毒颗粒形态）；⑦血清学方法（中和试验，检测病毒抗体或中和活性）。五、综合分析题（共31分）背景：某企业申报的“注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠（质量比8:1）”需进行上市前检验，检验项目包括鉴别、有关物质、含量测定、细菌内毒素、无菌检查等。请根据《中国药典》2025年版及相关指导原则，完成以下问题：1.（10分）设计“有关物质”的高效液相色谱检测方法（需明确色谱柱、流动相、检测波长、系统适用性要求及杂质来源分析）。答案：（1）色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（C18柱，4.6mm×250mm，5μm），因哌拉西林（β-内酰胺类）和他唑巴坦（青霉烷砜类）均为极性中等的化合物，C18柱可提供合适保留。（2）流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH至3.5）-乙腈（85:15，V/V），等度洗脱。β-内酰胺类药物在酸性条件下稳定（pH3-5），可减少降解；乙腈比例15%可确保主成分保留时间适中（8-15分钟）。（3）检测波长：220nm（哌拉西林的最大吸收波长约220nm，他唑巴坦在220nm处有较强吸收）。（4）系统适用性要求：①理论板数：按哌拉西林峰计算≥3000；②分离度：哌拉西林峰与他唑巴坦峰的分离度≥2.0，哌拉西林峰与相邻杂质峰的分离度≥1.5；③拖尾因子：哌拉西林峰和他唑巴坦峰的拖尾因子均≤1.5；④重复性：取对照溶液连续进样6次，哌拉西林峰面积的RSD≤2.0%。（5）杂质来源分析：①工艺杂质：哌拉西林合成中的中间体（如6-APA衍生物）、他唑巴坦合成中的副产物（如青霉烷砜开环物）；②降解杂质：β-内酰胺环水解产生的青霉酸、青霉噻唑酸；他唑巴坦砜基氧化产生的亚砜或砜类衍生物；③交叉反应杂质：哌拉西林与他唑巴坦在混合制剂中可能发生的酰胺键交换产物。2.（10分）若含量测定采用高效液相色谱外标法，简述其操作步骤及数据处理方法，并说明如何验证方法的准确性。答案：操作步骤：①对照品溶液制备：精密称取哌拉西林钠对照品（按无水物计）和他唑巴坦钠对照品（按无水物计），加流动相溶解并定量稀释成浓度约为0.5mg/mL（哌拉西林）和0.0625mg/mL（他唑巴坦，8:1比例）的混合溶液。②供试品溶液制备：取本品适量（约相当于哌拉西林0.5g），精密称定，加流动相溶解并稀释至1000mL，摇匀，滤过（0.45μm滤膜）。③色谱条件：同“有关物质”检测（确保保留时间一致）。④进样：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。数据处理：按外标法以峰面积计算含量：哌拉西林含量（%）=（A样×C对×稀释倍数×平均装量）/（A对×供试品取样量×（1-水分%））×100%他唑巴坦含量（%）=（A’样×C’对×稀释倍数×平均装量）/（A’对×供试品取样量×（1-水分%））×100%（注：A为哌拉西林峰面积，A’为他唑巴坦峰面积；C对、C’对为对照品浓度）准确性验证方法：①加样回收率试验：取已知含量的供试品（n=9），分别加入80%、100%、120%的对照品，按供试品溶液制备方法处理，测定含量，计算回收率（哌拉西林和