2024-2025学年广西梧州市多校联考高二下学期5月段考生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1广西梧州市多校联考2024-2025学年高二下学期5月段考一、单项选择题（本大题共16小题，其中第1-12题每题2分，第13-16题每题4分，共40分）1.《齐民要术》中有关于泡菜制作技术的记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”下列关于泡菜制作的叙述错误的是（）A.发酵过程中会产生亚硝酸盐，其含量先增多后减少B.“于盐水中洗菜”的目的是抑制其他杂菌的生长C.发酵初期向发酵罐中通入氧气有利于乳酸菌快速繁殖D.在发酵后期，发酵罐中乳酸含量上升，乳酸菌的数量下降【答案】C〖祥解〗泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，最后会制作失败。【详析】A、泡菜发酵过程中会产生亚硝酸盐，其含量先增多后减少，A正确；B、在制作泡菜时，食盐用量过低，容易造成细菌大量繁殖，“于盐水中洗菜”的目的是可以抑制其他杂菌的生长，B正确；C、乳酸菌属于厌氧菌，向发酵罐中通入氧气不利于乳酸菌快速繁殖，C错误；D、发酵后期，乳酸生产过多，反而会使乳酸菌活动受到抑制，乳酸菌数量下降，D正确。故选C。2.以宣木瓜为材料制作果醋时，首先要对果实进行软化；然后在溶液中加入白砂糖，使糖的质量分数达到12%；再接入酵母菌，敞口培养一天左右，当有大量CO2产生时开始密闭发酵；最后接入醋酸菌，进行醋酸发酵。下列叙述正确的是（）A.加入白砂糖的目的是提高溶液的渗透压，特异性抑制杂菌的生长B.敞口的目的是提供氧气，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加C.密闭发酵时酵母菌在线粒体基质中产生了大量的酒精和CO2D.接入醋酸菌后要保持体系的密闭性，并定时放气排走CO2【答案】B〖祥解〗（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。（2）参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供碳源，有利于提高酒精的生成量，A错误；B、敞口的目的是提供氧气，为了酵母菌的繁殖，酵母菌有氧呼吸产生CO2，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加，B正确；C、密闭发酵时酵母菌进行无氧呼吸，在细胞质基质中产生了大量的酒精和CO2，C错误；D、醋酸菌为好氧菌，接入醋酸菌后要及时通气，D错误。故选B。3.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是（）A.倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染B.在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒C.若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌D.培养基可用高压蒸汽灭菌【答案】B〖祥解〗实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。【详析】A、实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；B、在接种箱或超净工作台的使用之前，可用紫外线照射30min来进行消毒，以保证进行无菌操作，B错误；C、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，C正确；D、灭菌包括湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）和干热灭菌，培养基使用高压蒸汽灭菌较合理，D正确。故选B。4.微生物接种的方法有很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是（）A.划线操作时，用蘸有菌种的接种环在培养基表面划线B.划线时不要将第④区域的划线与第①区域相连C.完成图中所示的平板划线实验，接种环共需灼烧4次D.完成平板划线后需要将平板倒置，放入恒温培养箱中培养【答案】C〖祥解〗平板划线的操作的基本步骤是：（一）、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。（二）、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。（三）、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（四）、将平板倒置，放入培养箱中培养。【详析】A、划线操作时，用蘸有菌种的接种环在培养基表面划线，避免将培养基划破，A正确；B、划线时不要将第④区域的划线与第①区域相连，相连就影响单菌落分离，B正确；C、每次划线前灼烧一次，所有划线结束再灼烧一次，图中共划线4次，因此接种环共需灼烧

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次，C错误；D、完成平板划线后需要将平板倒置，防止冷凝水落到培养基上影响单菌落的形成，且需要放入恒温培养箱中培养，D正确。故选C。5.蝴蝶兰开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐。利用组织培养技术可大规模生产蝴蝶兰。下列叙述错误的是（）A.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性B.使用体积分数为70%的酒精对外植体进行消毒C.组织培养可以保持蝴蝶兰优良品种的遗传特性D.用蝴蝶兰茎尖分生组织培养可获得抗病毒植株【答案】D〖祥解〗植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，故植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，A正确；B、组织培养的外植体需要用使用体积分数为70%的酒精消毒，B正确；C、组织培养获得的植物从繁殖的角度看，本质是无性繁殖，故组织培养可以保持蝴蝶兰优良品种的遗传特性，C正确；D、利用植物组织培养技术，以植物茎尖等分生区为实验材料可培育出脱毒苗，该方法利用了植物顶端分生组织具有带毒少或无毒的特点，因此该方法获得的苗木具有不含或很少含病毒，但不具有抗病毒的能力，D错误。故选D。6.中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA（嗜盐单胞菌H的代谢产物）等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。下列叙述正确的是（）A.发酵工程的中心环节是嗜盐单胞菌H菌种的选育B.发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等条件C.为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度D.发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀等方法直接获得产品PHA【答案】B〖祥解〗发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详析】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误；B、在发酵过程中，需随时监测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等条件，B正确；C、嗜盐单胞菌H需要一定的盐浓度，其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长，提高发酵液中盐的浓度，一定程度上可以避免杂菌污染，C错误；D、发酵结束之后，对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离；而对于菌体的代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D错误。故选B。7.研究人员发现堆肥中的固氮菌可有效减少堆肥过程中的氮损失，他们欲筛选出嗜热固氮菌。下列有关叙述不正确的是（）A.筛选实验中所用样品最好从处于高温期的堆肥中选取B.可用稀释涂布平板法对目的菌种进行计数C.筛选实验中需将样品适当稀释后涂布在含氮培养基上D.筛选所得目的菌需接种到堆肥中用以检测其保氮效果【答案】C〖祥解〗微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。【详析】A、由于堆肥中的固氮菌可有效减少堆肥过程中的氮损失，因此堆筛选实验中所用样品最好从处于高温期的堆肥中选取，A正确；B、稀释涂布平板法可以用于对目的菌种进行计数，B正确；C、固氮菌指的是可以固定空气中氮气的微生物，故筛选实验中需将样品适当稀释后涂布在不含氮培养基上，C错误；D、实验目的是筛选出了高效嗜热固氮菌，因此筛选所得目的菌需接种到堆肥中用以检测其保氮效果，D正确；故选C。8.三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（）A.①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成B.②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合C.杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变D.图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性【答案】D〖祥解〗图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④提取代谢产物。【详析】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误；B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，不然原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（PEG融合法）或物理法诱导原生质体融合，B错误；C、植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，而转变为未分化的细胞——愈伤组织的过程，因此杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，结构也发生改变，C错误；D、图中过程②原生质体融合体现了细胞膜的流动性；将杂种细胞培育成一个完整的新的植物体的过程才体现了植物细胞的全能性，故图中所示的生产流程没有体现植物细胞的全能性，D正确。故选D。9.被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼。如图是斑马鱼输卵管上皮细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是（）A.①→②过程可以用机械的方法或用胰蛋白酶处理的方法将组织分散成单个细胞B.③过程的合成培养基能提供细胞所需的全部营养物质C.③→④贴壁细胞直接用离心法收集后制成细胞悬液再分瓶培养D.避免培养过程中的杂菌污染，培养瓶盖必须旋紧不漏气【答案】A〖祥解〗动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。【详析】A、可以用机械的方法或用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理的方法将组织分散成单个细胞，A正确；B、由于人们对动物细胞所需营养物质没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B错误；C、传代培养时，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，C错误；D、动物细胞培养需要一定的气体条件，通常用松盖培养瓶，为避免培养过程中的杂菌污染，需要在培养液中添加一定量的抗生素，D错误。故选A。10.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（）A.细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞B.重构胚的遗传物质来自于患者正常体细胞和细胞AC.胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果D.该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术【答案】D〖祥解〗分析题图：图示表示治疗性克隆的过程，该过程利用了动物细胞核移植技术，该技术体现了动物细胞核的全能性；图中①表示细胞核移植，②过程表示胚胎干细胞的分裂和分化，由胚胎干细胞发育成组织。【详析】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确；B、重构胚遗传物质来自于患者正常体细胞和细胞A，B正确；C、细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，因此，胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果，C正确；D、①表示核移植，②表示胚胎干细胞的增殖分化，该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，D错误。故选D。11.美人鱼的原型儒艮是生活在海洋里的哺乳动物，近年由于栖息地被破坏导致数量逐年下降，2022年8月儒艮被科学家宣布在中国功能性灭绝（指自然条件下，种群数量减少到无法维持繁衍的状态）。下列“复活”的措施中，最可行的是（）A.将儒艮的体细胞取出，经动物细胞培养成新个体B.取出儒艮的体细胞两两融合，再经细胞培养培育成新个体C.将儒艮的性染色体导入近亲物种的受精卵中，培育成新个体D.取出儒艮的体细胞核移植到近亲物种的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体【答案】D〖祥解〗植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。【详析】A、组织培养技术是植物细胞工程的应用，目前尚不能应用到动物细胞培养中，A错误；B、由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞还不能培养成动物个体，B错误；C、将儒艮的性染色体导入近亲物种的受精卵中，会使受精卵发生染色体变异，不能让儒艮“复生”，C错误；D、动物细胞核具有全能性，将儒艮的体细胞核移植到近亲物种的去核卵母细胞中，在体外培养到早期胚胎再植入母体内发育，可以克隆形成儒艮，D正确。故选D。12.在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”，关于这三种工具的叙述，不正确的是（）A.“分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开DNA的磷酸二酯键B.“分子缝合针”指的是DNA聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键C.“分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体D.“分子手术刀”主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA【答案】B〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。【详析】A、“分子手术刀”是限制性内切核酸酶（限制酶/限制性核酸内切酶），能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割使磷酸二酯键断裂，A正确；B、“分子缝合针”是DNA连接酶，能将具有相同末端的DNA片段连接起来，B错误；C、基因工程中“运输车”即运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体，其中质粒是基因工程中最常用的运载体，C正确；D、“分子手术刀”，主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA，可能是不含有该序列或者含有该序列，但被修饰，D正确。故选B。13.鞣质（单宁）是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分，在植物中广泛分布。为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力，某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察菌落大小，结果如图所示。下列相关说法不正确的是（）A.实验中用的培养皿等玻璃器材，可以采用干热灭菌的方法B.由图中结果可知，鞣质对丙细菌的杀伤能力最强C.为排除杂菌污染，本实验需设置对照组2D.若要计算菌液中细菌的数量，可以用显微镜直接计数【答案】B〖祥解〗利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。【详析】A、实验中用的培养皿等玻璃器材，一般选用的灭菌方法为干热灭菌；采用该灭菌方法灭菌的一般是能耐高温的、需要保持干燥的物品，A正确；B、将含鞣质的完全培养基与对照组1中菌落的大小比较可知，甲细菌的菌落最小，说明鞣质对甲细菌的杀伤能力最强，B错误；C、为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基（对照组2）作为空白对照，C正确；D、显微镜计数法是在显微镜下直接计数的一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，D正确。故选B。14.将物种①（2n=20）与物种②（2n=18）杂交可产生子代③，对③将作如图所示处理。（注:①的染色体和②的染色体在减数分裂中不会相互配对）。以下说法正确的是（）A.图中过程皆可发生B.⑥是一个新物种C.由③到④过程发生了等位基因分离D.由①②到③的过程代表植物体细胞杂交【答案】B〖祥解〗根据题意和图示分析可知：③→④是诱变育种，原理是基因突变；③→⑤→⑨是杂交育种，原理是基因重组；③→⑥、⑤×⑥→⑧是多倍体育种，原理是染色体变异；③→⑦是花药离体培养，原理是染色体变异。根据物种①（2n=20）与物种②（2n=18）杂交可产生子代③，且①的染色体和②的染色体在减数分裂中不会相互配对，可判断③的细胞中染色体数目为19，且不含同源染色体。【详析】A、根据分析可知③的细胞中不含同源染色体，自然生长产生的⑤植株，不能产生正常配子，图中①和②→③→⑤→⑨、⑤×⑥→⑧过程不能发生，A错误；B、因为③（或⑤）不育，而经秋水仙素处理产生的⑥植株可育，所以⑥是一个新物种，B正确；C、等位基因分离发生在减数分裂过程中，而由③到④过程是个体生长发育，只进行有丝分裂，没进行减数分裂，所以没有等位基因分离，C错误；D、由①②到③的过程代表植物自然杂交，而不是代表植物体细胞杂交，D错误。故选B。15.单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（）A.为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素B.为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术C.卵裂期，细胞体积和胚胎的总体积保持不变D.若①表示体外受精，可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与卵母细胞完成受精作用【答案】A〖祥解〗体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。【详析】A、为了使A野化单峰骆驼超数排卵，可对该个体注射适量的促性腺激素，A正确；B、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，体外受精是有性繁殖，B错误；C、卵裂期，胚胎的总体积不增加，细胞数量增加，细胞体积变小，C错误；D、若①表示体外受精，不可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与处于MII期卵母细胞完成受精作用，因为获能后的精子才具备受精能力，D错误。故选A。16.用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是（）A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图1中酶催化反应的化学键是氢键C.图2中②可能是用XhoI处理得到的酶切产物D.用XhoI和SalI同时处理该DNA，电泳后得到6种产物【答案】B〖祥解〗限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。【详析】A、酶具有专一性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A正确；B、图1中酶用来切割DNA，DNA单链是脱氧核苷酸通过磷酸二酯键相连，因此酶催化反应的化学键是磷酸二酯键，B错误；C、分析图1，限制酶XhoI有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoI处理得到的酶切产物，C正确；D、分析图1，限制酶XhoI和SalI有5处切割位点，切割后产生6个DNA片段，即用XhoI和SalI同时处理该DNA电泳后得到6种产物，D正确。故选B。二、非选择题（本大题共5大题，共60分）17.大熊猫可利用竹子中约8%的纤维素和约27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：（1）为了从大熊猫新鲜粪便中筛选出纤维素分解菌，需要配制_____的培养基，该培养基从功能上看属于_____培养基。（2）为了从样本中获取纤维素分解菌单菌落，该实验中的接种方法是_____；完成步骤④的操作，接种环共需要_____次灼烧处理，其中最后一次灼烧的目的是_____。（3）划线的某个平板经培养后，第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二次划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线上无菌落可能的操作失误有_____（回答2个即可）。（4）高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3种纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_____，理由是_____。菌株秸秆总重/g秸秆残重/g秸秆失重/%纤维素降解率/%A2．001．5124．5016．14B2．001．5323．5014．92C2．001．4229．0023．32【答案】（1）①.以纤维素为唯一碳源②.选择（2）①.平板划线法②.6##六③.杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者（3）接种环灼烧后未冷却划线未从第一次划线末端开始（4）①.C②.接种菌株C后秸秆失重最多，纤维素降解率最大〖祥解〗（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。【解析】（1）要筛选纤维素分解菌，需要配制以纤维素为唯一碳源，只有能利用纤维素的菌才能够在培养基上生存，功能上，这种培养基允许纤维素分解菌生长，而抑制其他不能利用纤维素的微生物生长，所以从功能上看属于选择培养基。（2）根据步骤④可知，该实验中纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法；由图观察可知，图中进行了5次划线，第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌，故完成步骤④的操作，接种共需要6次灼烧处理，最后一次灼烧的目的是杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。（3）划线的某个平板经培养后，第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二次划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线上无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却或者划线未从第一区域末端开始。（4）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。18.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：（1）与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是_____，过程②选用的骨髓瘤细胞_____（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_____。（3）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。（4）假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是_____。A.该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合B.双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用C.该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术D.双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性【答案】（1）①.灭活病毒诱导法②.不能（2）①.克隆化培养②.抗体检测③.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）（3）刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞/浆细胞（4）ABCD〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【解析】（1）诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比特有的方法是灭活的病毒诱导法；在HAT培养基上未融合的细胞（B细胞和骨髓瘤细胞）都不能生存，只有杂交瘤细胞能存活。（2）为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，即需要进行克隆化培养和抗体检测，进行克隆化培养；与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）。（3）一种抗原可诱导产生一种特定抗体，图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。（4）A、该特异性抗体可以识别两种抗原—癌胚抗原和长春碱，不识别所有的肿瘤细胞，A错误；B、不同的抗体在人体内存留的时间长短不同，抗体不一定在人体内持续发挥作用，B错误；C、该抗体的制备过程用到了动物细胞培养技术和动物细胞融合技术，C错误；D、双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，具有特异性，D错误。故选ABCD。19.某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题：（1）选择花菜等植物材料时，为了使研磨的效果更好，可以在处理材料的过程中加入适量的______（填酶的名称）。（2）图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取______（填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是______。（3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入______试剂，在______条件下进行鉴定。（4）DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析，相同温度条件下，______的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在______℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能是______（从酶的角度作答）。【答案】（1）纤维素酶（和果胶酶）（2）①.上清液②.DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精（3）①.二苯胺②.沸水浴（4）①.蒜黄②.-20③.与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢〖祥解〗DNA粗提取和鉴定的原理：DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。【解析】（1）由于菜花细胞含有细胞壁，可在研磨过程中加入适量的纤维素酶和果胶酶，以缩短研磨时间，避免研磨时间过长，影响DNA的提取量。（2）将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取上清液放入烧杯中。DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，因此加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA。（3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，在沸水浴条件下进行鉴定。（4）据图2分析，相同温度条件下，蒜黄的DNA粗提取含量最高。同种实验材料在-20℃条件下DNA粗提取含量更高，其原因可能是与20℃相比，-20℃的低温抑制了酶的活性，DNA的降解速率更慢。20.近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体外受精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。请回答下列问题：（1）若过程①代表体外受精，黑熊A通过超数排卵获得的细胞需要培养到_______期，受精过程中防止多精入卵的两道屏障是_______反应和_______反应。（2）D受体雌性在接受来自黑熊♀A体内的胚胎之前，须和黑熊♀A进行_______处理。胚胎移植的优势是_______（答出一点即可）。（3）过程②普遍使用的方法是通过_______得到无核的卵母细胞。最终F的遗传物质来自于_______。（4）为了获得更多的胚胎，可以对过程①得到的胚胎进行胚胎分割，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将_______。【答案】（1）①.MⅡ②.透明带③.卵细胞膜（2）①.同期发情②.可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；使供体的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍（3）①.显微操作②.黑熊A和黑熊B（4）内细胞团均等分割〖祥解〗胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。【解析】（1）超数排卵排出的细胞必须生长到MⅡ期才具有受精能力，故黑熊A通过超数排卵获得的细胞必须培养到MII期。受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是①透明带反应，②卵细胞膜反应。（2）D受体雌性接受来自黑熊♀A体内胚胎，所以必须和黑熊♀A进行同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率；受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应，这是移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础。胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；使供体的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。（3）体细胞核移植普遍使用的方法是通过显微操作去掉卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物得到无核的卵母细胞。最终F的遗传物质来自于黑熊A（细胞质遗传物质）和黑熊B（细胞核遗传物质）。（4）为了获得更多的胚胎，可以对过程①得到的胚胎进行胚胎分割，胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作，选择对象应是发育良好、形态正常，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。21.棉铃虫和蚜虫是常见的植物害虫，为减少农药的使用量，我国科学家利用基因工程培育出一些能抵抗虫害的植物新品种。Cry1A基因的表达产物对棉铃虫等鳞翅目昆虫有较强的毒性，GNA基因的表达产物对蚜虫等刺吸式口器的昆虫有较强的毒性。科研人员将Cry1A基因与GNA基因连接在一起，构建了双抗虫基因的重组表达载体，并转入烟草细胞，获得了具有双抗性的转基因烟草，其部分过程如图1所示，请分析并回答以下问题：注:图中PstⅠ、KpnⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ表示限制酶，不同限制酶切出的黏性末端均不同;Klenow能将黏性末端转变为平末端。（1）过程③将Cry1A基因与GNA基因相连，可选用_______（填“EcoliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”），以保证连接效率。（2）过程④应该选用_______（填图中限制酶）切割植物表达载体，以便与目的基因相连，形成重组表达载体。将重组表达载体转入农杆菌之前，一般先用_______处理农杆菌，使细胞处于一种容易吸收周围环境中DNA分子的生理状态。（3）让农杆菌侵染烟草叶片前，需要通过实验筛选农杆菌：将培养农杆菌的培养基倒平板后均分为A、B两组，在A组培养基中涂布一定量的链霉素，在B组培养基中涂布等量的卡那霉素和链霉素。往A组培养基中接种适量农杆菌，待长出菌落后，用影印法接种到B组培养基上，实验结果如图2，其中_______（填图中对应的数字）菌落对应的农杆菌可能是符合要求的，即含有_______的农杆菌。（4）欲从个体生物学水平鉴定这些转基因烟草是否具有双抗虫特性以及抗性的程度，请你简述该鉴定方法：_______。【答案】（1）T4DNA连接酶（2）①.EcoRⅠ和HindⅢ②.Ca2+（3）①.1、3②.重组表达载体（或目的基因）（4）使用转基因烟草的叶片，饲喂棉铃虫和蚜虫，统计棉铃虫和蚜虫的存活率（或死亡率或叶片被啃食的面积等观测指标）〖祥解〗基因工程技术的基本步骤：目的基因的筛选和获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。【解析】（1）分析图可知，过程①和②分别用不同的限制酶切割Cry1A基因与GNA基因，形成的黏性末端是不同的，故两个基因无法直接相连，经Klenow处理后，两个基因片段一端的黏性末端变为平末端，E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端，T4DNA连接酶可以连接黏性末端，也可以连接平末端，故过程③将Cry1A基因与GNA基因相连，应选用T4DNA连接酶。（2）分析图可知，通过过程③得到的双抗虫基因(Cry1A基因+GNA基因)两侧分别是EcoRⅠ和HindⅢ切出的黏性末端，故过程④应该选用EcoRⅠ和HindⅢ切割植物表达载体，形成和目的基因相同的黏性末端，以便让植物表达载体与目的基因相连，形成重组表达载体。将重组表达载体转入农杆菌之前，一般先用Ca2+处理农杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，以利于重组表达载体进入农杆菌。（3）让农杆菌侵染烟草叶片前，需要通过实验筛选农杆菌，获得含有重组表达载体的农杆菌。由于HindⅢ的切割位点在抗卡那霉素基因内部，故含有重组表达载体的农杆菌可以在含有链霉素的培养基上生长，不能在含有卡那霉素的培养基上生长。据此分析可知，A组中1、3对应的菌株为含有重组表达载体的农杆菌，2、4、5对应的菌株为含有基因表达载体的农杆菌，所以1、3菌落对应的农杆菌可能是符合要求的。（4）使用转基因烟草的叶片，饲喂棉铃虫和蚜虫，统计棉铃虫和蚜虫的存活率，从个体水平上鉴定这些转基因烟草是否具有双抗虫特性及抗性的程度。广西梧州市多校联考2024-2025学年高二下学期5月段考一、单项选择题（本大题共16小题，其中第1-12题每题2分，第13-16题每题4分，共40分）1.《齐民要术》中有关于泡菜制作技术的记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内雍中。”下列关于泡菜制作的叙述错误的是（）A.发酵过程中会产生亚硝酸盐，其含量先增多后减少B.“于盐水中洗菜”的目的是抑制其他杂菌的生长C.发酵初期向发酵罐中通入氧气有利于乳酸菌快速繁殖D.在发酵后期，发酵罐中乳酸含量上升，乳酸菌的数量下降【答案】C〖祥解〗泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的过程中，要注意控制腌制的时间、温度和食盐用量。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，最后会制作失败。【详析】A、泡菜发酵过程中会产生亚硝酸盐，其含量先增多后减少，A正确；B、在制作泡菜时，食盐用量过低，容易造成细菌大量繁殖，“于盐水中洗菜”的目的是可以抑制其他杂菌的生长，B正确；C、乳酸菌属于厌氧菌，向发酵罐中通入氧气不利于乳酸菌快速繁殖，C错误；D、发酵后期，乳酸生产过多，反而会使乳酸菌活动受到抑制，乳酸菌数量下降，D正确。故选C。2.以宣木瓜为材料制作果醋时，首先要对果实进行软化；然后在溶液中加入白砂糖，使糖的质量分数达到12%；再接入酵母菌，敞口培养一天左右，当有大量CO2产生时开始密闭发酵；最后接入醋酸菌，进行醋酸发酵。下列叙述正确的是（）A.加入白砂糖的目的是提高溶液的渗透压，特异性抑制杂菌的生长B.敞口的目的是提供氧气，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加C.密闭发酵时酵母菌在线粒体基质中产生了大量的酒精和CO2D.接入醋酸菌后要保持体系的密闭性，并定时放气排走CO2【答案】B〖祥解〗（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。（2）参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详析】A、酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供碳源，有利于提高酒精的生成量，A错误；B、敞口的目的是提供氧气，为了酵母菌的繁殖，酵母菌有氧呼吸产生CO2，当大量CO2产生时表明酵母菌的数量已大幅增加，B正确；C、密闭发酵时酵母菌进行无氧呼吸，在细胞质基质中产生了大量的酒精和CO2，C错误；D、醋酸菌为好氧菌，接入醋酸菌后要及时通气，D错误。故选B。3.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是（）A.倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染B.在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒C.若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌D.培养基可用高压蒸汽灭菌【答案】B〖祥解〗实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。【详析】A、实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；B、在接种箱或超净工作台的使用之前，可用紫外线照射30min来进行消毒，以保证进行无菌操作，B错误；C、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，C正确；D、灭菌包括湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）和干热灭菌，培养基使用高压蒸汽灭菌较合理，D正确。故选B。4.微生物接种的方法有很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是（）A.划线操作时，用蘸有菌种的接种环在培养基表面划线B.划线时不要将第④区域的划线与第①区域相连C.完成图中所示的平板划线实验，接种环共需灼烧4次D.完成平板划线后需要将平板倒置，放入恒温培养箱中培养【答案】C〖祥解〗平板划线的操作的基本步骤是：（一）、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。（二）、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处将接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。（三）、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（四）、将平板倒置，放入培养箱中培养。【详析】A、划线操作时，用蘸有菌种的接种环在培养基表面划线，避免将培养基划破，A正确；B、划线时不要将第④区域的划线与第①区域相连，相连就影响单菌落分离，B正确；C、每次划线前灼烧一次，所有划线结束再灼烧一次，图中共划线4次，因此接种环共需灼烧

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次，C错误；D、完成平板划线后需要将平板倒置，防止冷凝水落到培养基上影响单菌落的形成，且需要放入恒温培养箱中培养，D正确。故选C。5.蝴蝶兰开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐。利用组织培养技术可大规模生产蝴蝶兰。下列叙述错误的是（）A.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性B.使用体积分数为70%的酒精对外植体进行消毒C.组织培养可以保持蝴蝶兰优良品种的遗传特性D.用蝴蝶兰茎尖分生组织培养可获得抗病毒植株【答案】D〖祥解〗植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，故植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性，A正确；B、组织培养的外植体需要用使用体积分数为70%的酒精消毒，B正确；C、组织培养获得的植物从繁殖的角度看，本质是无性繁殖，故组织培养可以保持蝴蝶兰优良品种的遗传特性，C正确；D、利用植物组织培养技术，以植物茎尖等分生区为实验材料可培育出脱毒苗，该方法利用了植物顶端分生组织具有带毒少或无毒的特点，因此该方法获得的苗木具有不含或很少含病毒，但不具有抗病毒的能力，D错误。故选D。6.中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA（嗜盐单胞菌H的代谢产物）等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图。下列叙述正确的是（）A.发酵工程的中心环节是嗜盐单胞菌H菌种的选育B.发酵罐内发酵要严格控制温度、pH和溶解氧等条件C.为避免杂菌污染，可适当降低发酵液中盐的浓度D.发酵结束之后，采取适当的过滤、沉淀等方法直接获得产品PHA【答案】B〖祥解〗发酵工程，是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详析】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵，A错误；B、在发酵过程中，需随时监测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，还要及时添加必需的营养组分，严格控制温度、pH和溶解氧等条件，B正确；C、嗜盐单胞菌H需要一定的盐浓度，其他微生物则不能在较高的盐浓度下生长，提高发酵液中盐的浓度，一定程度上可以避免杂菌污染，C错误；D、发酵结束之后，对于菌体可采取适当的过滤、沉淀措施来分离；而对于菌体的代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品，D错误。故选B。7.研究人员发现堆肥中的固氮菌可有效减少堆肥过程中的氮损失，他们欲筛选出嗜热固氮菌。下列有关叙述不正确的是（）A.筛选实验中所用样品最好从处于高温期的堆肥中选取B.可用稀释涂布平板法对目的菌种进行计数C.筛选实验中需将样品适当稀释后涂布在含氮培养基上D.筛选所得目的菌需接种到堆肥中用以检测其保氮效果【答案】C〖祥解〗微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。【详析】A、由于堆肥中的固氮菌可有效减少堆肥过程中的氮损失，因此堆筛选实验中所用样品最好从处于高温期的堆肥中选取，A正确；B、稀释涂布平板法可以用于对目的菌种进行计数，B正确；C、固氮菌指的是可以固定空气中氮气的微生物，故筛选实验中需将样品适当稀释后涂布在不含氮培养基上，C错误；D、实验目的是筛选出了高效嗜热固氮菌，因此筛选所得目的菌需接种到堆肥中用以检测其保氮效果，D正确；故选C。8.三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是（）A.①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成B.②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合C.杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变D.图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性【答案】D〖祥解〗图示为三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③脱分化形成愈伤组织，④提取代谢产物。【详析】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①三白草和鱼腥草体细胞杂交过程中要利用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁获得原生质体，盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液会杀死细胞，A错误；B、过程②通常在等渗或略高渗溶液中，不能用低渗溶液，不然原生质体会吸水涨破；可以采用化学法（PEG融合法）或物理法诱导原生质体融合，B错误；C、植物细胞的脱分化就是让已分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能，而转变为未分化的细胞——愈伤组织的过程，因此杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，结构也发生改变，C错误；D、图中过程②原生质体融合体现了细胞膜的流动性；将杂种细胞培育成一个完整的新的植物体的过程才体现了植物细胞的全能性，故图中所示的生产流程没有体现植物细胞的全能性，D正确。故选D。9.被称为“水中小白鼠”的斑马鱼是一种体长4厘米左右的热带淡水鱼。如图是斑马鱼输卵管上皮细胞培养过程示意图，下列叙述正确的是（）A.①→②过程可以用机械的方法或用胰蛋白酶处理的方法将组织分散成单个细胞B.③过程的合成培养基能提供细胞所需的全部营养物质C.③→④贴壁细胞直接用离心法收集后制成细胞悬液再分瓶培养D.避免培养过程中的杂菌污染，培养瓶盖必须旋紧不漏气【答案】A〖祥解〗动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。【详析】A、可以用机械的方法或用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理的方法将组织分散成单个细胞，A正确；B、由于人们对动物细胞所需营养物质没有完全搞清楚，在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，B错误；C、传代培养时，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，C错误；D、动物细胞培养需要一定的气体条件，通常用松盖培养瓶，为避免培养过程中的杂菌污染，需要在培养液中添加一定量的抗生素，D错误。故选A。10.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误的是（）A.细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞B.重构胚的遗传物质来自于患者正常体细胞和细胞AC.胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果D.该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术【答案】D〖祥解〗分析题图：图示表示治疗性克隆的过程，该过程利用了动物细胞核移植技术，该技术体现了动物细胞核的全能性；图中①表示细胞核移植，②过程表示胚胎干细胞的分裂和分化，由胚胎干细胞发育成组织。【详析】A、细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞，因为去核卵母细胞有激活动物细胞全能性的物质，且细胞体积大，易操作，所含营养物质丰富，A正确；B、重构胚遗传物质来自于患者正常体细胞和细胞A，B正确；C、细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，因此，胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果，C正确；D、①表示核移植，②表示胚胎干细胞的增殖分化，该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养技术，并未涉及胚胎移植技术，D错误。故选D。11.美人鱼的原型儒艮是生活在海洋里的哺乳动物，近年由于栖息地被破坏导致数量逐年下降，2022年8月儒艮被科学家宣布在中国功能性灭绝（指自然条件下，种群数量减少到无法维持繁衍的状态）。下列“复活”的措施中，最可行的是（）A.将儒艮的体细胞取出，经动物细胞培养成新个体B.取出儒艮的体细胞两两融合，再经细胞培养培育成新个体C.将儒艮的性染色体导入近亲物种的受精卵中，培育成新个体D.取出儒艮的体细胞核移植到近亲物种的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体【答案】D〖祥解〗植物组织培养的过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化（避光）形成愈伤组织；愈伤组织经过再分化（需光）过程形成胚状体，进一步发育形成植株。【详析】A、组织培养技术是植物细胞工程的应用，目前尚不能应用到动物细胞培养中，A错误；B、由于动物细胞的全能性受到限制，目前动物细胞还不能培养成动物个体，B错误；C、将儒艮的性染色体导入近亲物种的受精卵中，会使受精卵发生染色体变异，不能让儒艮“复生”，C错误；D、动物细胞核具有全能性，将儒艮的体细胞核移植到近亲物种的去核卵母细胞中，在体外培养到早期胚胎再植入母体内发育，可以克隆形成儒艮，D正确。故选D。12.在基因工程的操作中，需要三种工具，分别是“分子手术刀”、“分子缝合针”和“分子运输车”，关于这三种工具的叙述，不正确的是（）A.“分子手术刀”指的是限制性内切核酸酶，可以断开DNA的磷酸二酯键B.“分子缝合针”指的是DNA聚合酶，可以催化生成断裂的磷酸二酯键C.“分子运输车”指的是载体，常用的载体有质粒、动植物病毒和噬菌体D.“分子手术刀”主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA【答案】B〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂；（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键；（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体、动植物病毒。【详析】A、“分子手术刀”是限制性内切核酸酶（限制酶/限制性核酸内切酶），能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割使磷酸二酯键断裂，A正确；B、“分子缝合针”是DNA连接酶，能将具有相同末端的DNA片段连接起来，B错误；C、基因工程中“运输车”即运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体，其中质粒是基因工程中最常用的运载体，C正确；D、“分子手术刀”，主要来自于原核生物，它一般不会切割该生物自己的DNA，可能是不含有该序列或者含有该序列，但被修饰，D正确。故选B。13.鞣质（单宁）是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分，在植物中广泛分布。为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力，某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上，在相同且适宜的条件下培养一段时间，观察菌落大小，结果如图所示。下列相关说法不正确的是（）A.实验中用的培养皿等玻璃器材，可以采用干热灭菌的方法B.由图中结果可知，鞣质对丙细菌的杀伤能力最强C.为排除杂菌污染，本实验需设置对照组2D.若要计算菌液中细菌的数量，可以用显微镜直接计数【答案】B〖祥解〗利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目。【详析】A、实验中用的培养皿等玻璃器材，一般选用的灭菌方法为干热灭菌；采用该灭菌方法灭菌的一般是能耐高温的、需要保持干燥的物品，A正确；B、将含鞣质的完全培养基与对照组1中菌落的大小比较可知，甲细菌的菌落最小，说明鞣质对甲细菌的杀伤能力最强，B错误；C、为排除杂菌污染，本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基（对照组2）作为空白对照，C正确；D、显微镜计数法是在显微镜下直接计数的一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，D正确。故选B。14.将物种①（2n=20）与物种②（2n=18）杂交可产生子代③，对③将作如图所示处理。（注:①的染色体和②的染色体在减数分裂中不会相互配对）。以下说法正确的是（）A.图中过程皆可发生B.⑥是一个新物种C.由③到④过程发生了等位基因分离D.由①②到③的过程代表植物体细胞杂交【答案】B〖祥解〗根据题意和图示分析可知：③→④是诱变育种，原理是基因突变；③→⑤→⑨是杂交育种，原理是基因重组；③→⑥、⑤×⑥→⑧是多倍体育种，原理是染色体变异；③→⑦是花药离体培养，原理是染色体变异。根据物种①（2n=20）与物种②（2n=18）杂交可产生子代③，且①的染色体和②的染色体在减数分裂中不会相互配对，可判断③的细胞中染色体数目为19，且不含同源染色体。【详析】A、根据分析可知③的细胞中不含同源染色体，自然生长产生的⑤植株，不能产生正常配子，图中①和②→③→⑤→⑨、⑤×⑥→⑧过程不能发生，A错误；B、因为③（或⑤）不育，而经秋水仙素处理产生的⑥植株可育，所以⑥是一个新物种，B正确；C、等位基因分离发生在减数分裂过程中，而由③到④过程是个体生长发育，只进行有丝分裂，没进行减数分裂，所以没有等位基因分离，C错误；D、由①②到③的过程代表植物自然杂交，而不是代表植物体细胞杂交，D错误。故选B。15.单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（）A.为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素B.为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术C.卵裂期，细胞体积和胚胎的总体积保持不变D.若①表示体外受精，可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与卵母细胞完成受精作用【答案】A〖祥解〗体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。【详析】A、为了使A野化单峰骆驼超数排卵，可对该个体注射适量的促性腺激素，A正确；B、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，体外受精是有性繁殖，B错误；C、卵裂期，胚胎的总体积不增加，细胞数量增加，细胞体积变小，C错误；D、若①表示体外受精，不可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与处于MII期卵母细胞完成受精作用，因为获能后的精子才具备受精能力，D错误。故选A。16.用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切开），酶切位点及酶切产物分离结果如图。下列叙述错误的是（）A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图1中酶催化反应的化学键是氢键C.图2中②可能是用XhoI处理得到的酶切产物D.用XhoI和SalI同时处理该DNA，电泳后得到6种产物【答案】B〖祥解〗限制酶：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。【详析】A、酶具有专一性，不同的限制酶识别并切割不同的核苷酸序列，A正确；B、图1中酶用来切割DNA，DNA单链是脱氧核苷酸通过磷酸二酯键相连，因此酶催化反应的化学键是磷酸二酯键，B错误；C、分析图1，限制酶XhoI有2处切割位点，切割后产生3个DNA片段，泳道②中是用XhoI处理得到的酶切产物，C正确；D、分析图1，限制酶XhoI和SalI有5处切割位点，切割后产生6个DNA片段，即用XhoI和SalI同时处理该DNA电泳后得到6种产物，D正确。故选B。二、非选择题（本大题共5大题，共60分）17.大熊猫可利用竹子中约8%的纤维素和约27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：（1）为了从大熊猫新鲜粪便中筛选出纤维素分解菌，需要配制_____的培养基，该培养基从功能上看属于_____培养基。（2）为了从样本中获取纤维素分解菌单菌落，该实验中的接种方法是_____；完成步骤④的操作，接种环共需要_____次灼烧处理，其中最后一次灼烧的目的是_____。（3）划线的某个平板经培养后，第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二次划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线上无菌落可能的操作失误有_____（回答2个即可）。（4）高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3种纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_____，理由是_____。菌株秸秆总重/g秸秆残重/g秸秆失重/%纤维素降解率/%A2．001．5124．5016．14B2．001．5323．5014．92C2．001．4229．0023．32【答案】（1）①.以纤维素为唯一碳源②.选择（2）①.平板划线法②.6##六③.杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者（3）接种环灼烧后未冷却划线未从第一次划线末端开始（4）①.C②.接种菌株C后秸秆失重最多，纤维素降解率最大〖祥解〗（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）平板划线操作的注意事项：①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。【解析】（1）要筛选纤维素分解菌，需要配制以纤维素为唯一碳源，只有能利用纤维素的菌才能够在培养基上生存，功能上，这种培养基允许纤维素分解菌生长，而抑制其他不能利用纤维素的微生物生长，所以从功能上看属于选择培养基。（2）根据步骤④可知，该实验中纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法；由图观察可知，图中进行了5次划线，第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌，故完成步骤④的操作，接种共需要6次灼烧处理，最后一次灼烧的目的是杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。（3）划线的某个平板经培养后，第一次划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二次划线区域的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成划线上无菌落可能的操作失误是接种环灼烧后未冷却或者划线未从第一区域末端开始。（4）测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。18.双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：（1）与植物体细胞杂交相比，图1中过程②特有的诱导融合的方法是_____，过程②选用的骨髓瘤细胞_____（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行_____和_____，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是_____。（3）图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是_____。（4）假设图2中双特异性抗体分子是由若干个氨基酸形成的，下列叙述不正确的是_____。A.该特异性抗体能与人体内各类肿瘤细胞结合B.双特异性抗体可以在人体内持续发挥作用C.该双特异性抗体的制备过程中只用到了动物细胞融合技术D.双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，因而不具有特异性【答案】（1）①.灭活病毒诱导法②.不能（2）①.克隆化培养②.抗体检测③.单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）（3）刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞/浆细胞（4）ABCD〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【解析】（1）诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒），与植物体细胞杂交相比特有的方法是灭活的病毒诱导法；在HAT培养基上未融合的细胞（B细胞和骨髓瘤细胞）都不能生存，只有杂交瘤细胞能存活。（2）为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈阳性的细胞，即需要进行克隆化培养和抗体检测，进行克隆化培养；与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）。（3）一种抗原可诱导产生一种特定抗体，图1中①步骤注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。（4）A、该特异性抗体可以识别两种抗原—癌胚抗原和长春碱，不识别所有的肿瘤细胞，A错误；B、不同的抗体在人体内存留的时间长短不同，抗体不一定在人体内持续发挥作用，B错误；C、该抗体的制备过程用到了动物细胞培养技术和动物细胞融合技术，C错误；D、双特异性抗体能与药物和肿瘤细胞结合，具有特异性，D错误。故选ABCD。19.某小组开展了DNA的粗提取与鉴定实验，选择了不同温度（20℃、-20℃）条件下保存的花菜、辣椒和蒜黄作为实验材料，部分实验步骤如图1所示。回答下列问题：（1）选择花菜等植物材料时，为了使研磨的效果更好，可以在处理材料的过程中加入适量的______（填酶的名称）。（2）图1中，将获取的研磨液直接倒入塑料离心管中，然后进行离心处理，再取______（填“上清液”或“沉淀物”）放入烧杯中。加入体积分数为95%的预冷酒精溶液来初步提取DNA，这样做的原理是______。（3）将DNA粗提取物溶于2mol·L-1的NaCl溶液中，加入______试剂，在______条件下进行鉴定。（4）DNA鉴定结果如图2所示。据图2分析，相同温度条件下，______的DN