中药制剂分析各类成分分析专家讲座

第五章

中药制剂中各类化学成份分析

药品分析学科第1页掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成份定性、定量原理与方法。熟悉中药制剂中挥发性成份、木质素类成份定性、定量原理与方法。了解其它成份（有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、单萜及二萜类、多糖类）分析方法。【目标要求】药品分析学科第2页第五章中药制剂中各类化学成份分析学习方法结构性质分析方法结构：母核、官能团、分子量等物理化学性质：溶解性、酸碱性、挥发性、氧化还原性、旋光性、光谱特征等分析方法：总类成份：化学分析法、分光光度法单一成份：各种色谱法（GC、HPLC、HPCE、TLCS、SFC等）药品分析学科第3页一、概述1、概念：生物碱是生物界除生物体必需含氮化合物（如氨基酸、蛋白质和B族维生素等）之外全部含氮有机化合物，因其结构中氮原子上未共享电子对而大多含有碱性。2、含生物碱成份惯用中药：第一节生物碱类成份分析第4页中药名称主要生物碱成份中药名称主要生物碱成份山豆根制川乌马钱子延胡索苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、金雀花碱乌头碱、次乌头碱、新乌头碱马钱子碱、番木鳖碱（士宁）、伪马钱子碱、伪番木鳖碱延胡索乙素、延胡索甲素、原阿片碱、黄连碱苦参麻黄黄连黄柏防己苦参碱、槐定碱、槐果碱、氧化苦参碱麻黄碱、伪麻黄碱、去甲麻黄碱、甲基麻黄碱小檗碱、巴马丁、药根碱、黄连碱小檗碱、药根碱、木兰花碱粉防己碱、防己诺林碱、轮环藤酚碱、木兰碱药品分析学科第5页第一节生物碱类成份分析二、理化性质1、溶解性大多数生物碱难溶于水，易溶于氯仿、乙醚、乙醇、丙酮及苯等有机溶剂；与酸结合成盐后水溶性增加，但酸不一样，生成盐水溶性有差异；季铵型生物碱、有氮氧配位键生物碱易溶于水液体生物碱及一些小分子固体生物碱则既溶于水也可溶于有机溶剂；含有酸性官能团或酯键生物碱还可溶于一些碱液或热苛性碱液。药品分析学科第6页第一节生物碱类成份分析二、理化性质2、沉淀反应大多数生物碱在酸性水溶液中能够与一些试剂生成不溶于水复盐或分子复合物。生物碱沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子有机酸马钱子散中生物碱成份判别取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时，滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。

药品分析学科第7页第一节生物碱类成份分析二、理化性质3、显色反应生物碱在一定pH条件下可与一些酸性染料（多为磺酸肽类）生成有色络合物，可被氯仿等有机溶剂定量提出结构中含有酯键酯碱如乌头碱等可与异羟肟酸铁试剂反应产生紫红色；这些特点可用于中药制剂中生物碱成份分析药品分析学科第8页第一节生物碱类成份分析二、理化性质4、紫外光谱特征结构中含有共轭体系生物碱都有紫外吸收结构中氮原子与发色团直接连接或参加发色团生物碱，其吸收峰位置与测定时溶剂pH相关。药品分析学科第9页第一节生物碱类成份分析三、定性判别1、普通理化判别沉淀反应是生物碱理化判别惯用方法，此反应普通在酸性水溶液中进行制备样品供试液时必须净化处理，预防假阳性结果药品分析学科第10页第一节生物碱类成份分析三、定性判别2、薄层色谱法①吸附剂：硅胶、氧化铝；②展开剂：多以氯仿、苯等低极性溶剂，加入其它溶剂调整展开剂极性；③因为硅胶显弱酸性，强碱性生物碱在硅胶色谱板上能形成盐，使Rf值很小或拖尾、形成复斑等。④显色剂：惯用改良碘化铋钾试剂，有时喷碘化铋钾试剂之后再喷硝酸钠试剂，可使样品斑点愈加清楚。如有荧光，不用显色⑤亦可用碘蒸汽、硫酸铈、碘铂酸等其它试剂显色。讨论：怎样改进？药品分析学科第11页第一节生物碱类成份分析三、定性判别3、纸色谱法可用于生物碱盐或游离碱判别4、HPLC：保留时间定性5、GC：可用于小分子生物碱判别药品分析学科第12页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（一）总生物碱含量测定1、化学分析法①主要使用酸碱滴定法。②强碱滴定生物碱盐时，在70%~90%乙醇介质中终点比在水中显著，所以常将生物碱盐溶于90%乙醇，再用标准碱乙醇液滴定。③若选择溶剂及指示终点方法适当，还可用非水滴定法进行④要求：总生物碱纯度较高，用于药味少成份简单制剂测定药品分析学科第13页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（一）总生物碱含量测定2、分光光度法（1）直接测定法①不经过化学反应、利用生物碱物质本身光吸收直接进行比色测定方法。②普通用于药味较少、干扰小中药制剂中总生物碱含量测定。药品分析学科第14页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（一）总生物碱含量测定（2）酸性染料比色法（例题P124）原理：

BH++In-

→BH+·In-（水相）→BH+·In-（有机相）关键：酸性染料选择：甲基橙、溴麝香草酚兰（BTB）和溴甲酚绿等；pH值选择：与生物碱和酸性染料性质相关。有机溶剂选择：普通用氯仿、二氯甲烷水分干扰及消除药品分析学科第15页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（一）总生物碱含量测定（3）雷氏盐比色法（注意事项p126）原理：

BH++[Cr(NH3)2(SCN)4]-→

BH[Cr(NH3)2(SCN)4]测定方法：（复盐沉淀）复盐沉淀→溶于丙酮（或甲醇）→直接比色测定样品＋定量过量雷氏盐→过滤→滤液→比色测定λmax=520nm（4）异羟肟酸铁比色法用于含有酯键结构生物碱测定药品分析学科第16页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（二）单体生物碱成份含量测定1、TLCS①生物碱不含有紫外吸收或挥发性时可用本法测定；②选取吸附剂、展开剂及显色方法与判别相同；③使用改良碘化铋钾等作为显色剂时，必须完全挥干展开剂后（尤其在碱性环境下展开）才可喷洒，不然背景深、反差小，影响测定。药品分析学科第17页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（二）单体生物碱成份含量测定2、HPLC(例题P128)①以反相高效液相色谱应用较多；②在反相高效液相色谱中，因为硅胶表面残留硅醇基影响，使生物碱分析易产生保留时间延长、峰形变宽、拖尾；③可在流动相中加入硅醇基抑制剂、离子对试剂等办法以克服游离硅醇基影响，满足定量分析要求；④中药制剂中生物碱成份进行高效液相色谱法测定时，使用较多是紫外检测器。药品分析学科第18页第一节生物碱类成份分析四、含量测定（二）单体生物碱成份含量测定3、GC①只适合用于有挥发性，遇热不分解生物碱类，如麻黄碱、槟榔碱、苦参碱和颠茄类生物碱等②制备供试品溶液时普通应采取冷提取，净化过程也要防止加热以防成份流失，最终需用氯仿等低极性有机溶剂为溶媒制备成供试液。药品分析学科第19页第一节生物碱类成份分析五、常见生物碱成份分析化合物名称结构式理化性质、结构及光谱特征惯用定量分析方法小檗碱（黄连素）Berberine(Umbellatine)（C20H18NO4；336.37）异喹啉类原小檗碱型生物碱、季铵型生物碱、有共轭体系。黄色结晶、碱性较强，易溶于热水或热乙醇，微溶或不溶于苯、氯仿、丙酮，其盐酸盐水中溶解度小。mp：1450℃UV：225，270，331。重量法、滴定法分光光度法薄层扫描法薄层荧光扫描法高效液相色谱法脉冲极谱法流动色谱分析法酶法第20页第一节生物碱类成份分析五、常见生物碱成份分析化合物名称结构式理化性质、结构及光谱特征惯用定量分析方法士宁（番木鳖碱）Strychnine（C21H20N2O2;334.40）单萜吲哚类生物碱、环叔胺显碱性、酰胺不显碱性。难溶于水，可溶于乙醇，甲醇。易溶于氯仿，微溶于乙醚。mp：268～290℃。UV：282。重量法滴定法分光光度法一阶导数分光光度法薄层扫描法高效液相色谱法第21页第一节生物碱类成份分析五、常见生物碱成份分析化合物名称结构式理化性质、结构及光谱特征惯用定量分析方法乌头碱Aconitine（C34H47NO11;645.76）二萜类酯型生物碱。易溶于氯仿、苯、无水乙醇和乙醚，难溶于水、微溶石油醚mp：204℃UV:281,273,230,202．滴定法酸性染料比色法一阶导数紫外分光光度法薄层扫描法高效液相色谱法药品分析学科第22页第二节黄酮类成份分析一、概述1、定义：黄酮类化合物是指基本母核为2-苯基色原酮（2-phenylchromone）类化合物，现在则是泛指两苯环经过中央三碳链相互联结而成一系列化合物。2、含黄酮类成份常见中药药品分析学科第23页中药名称主要黄酮类成份中药名称主要黄酮类成份黄芩黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素山柰山柰酚、山柰素槐米芦丁、槲皮素广藿香商陆素、芹菜素葛根葛根素、大豆苷、大豆苷元、7-木糖苷葛根素白果山奈酚、槲皮素、芦丁枳实橙皮苷、川陈皮素、新橙皮苷、5-邻-去甲基川陈皮素高良姜高良姜素、山奈素、槲皮素茵陈茵陈黄酮、芫花素、槲皮素补骨脂补骨脂查耳酮、异补骨脂查耳酮山楂槲皮素、金丝桃苷金线草槲皮素、山奈酚第24页第二节黄酮类成份分析二、结构特征及理化性质1、结构特征苯甲酰基桂皮酰基240~280nm300~400nm药品分析学科第25页第二节黄酮类成份分析二、理化性质2、溶解度①黄酮类化合物溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不一样而有很大差异。②游离苷元难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂及稀碱液中；③黄酮苷普通易溶于水、甲醇、乙醇等强极性溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等。药品分析学科第26页第二节黄酮类成份分析二、理化性质3、酸碱性酸性：黄酮类化合物因分子中多有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酸性强弱：7,4‘-二羟基>7-或4‘-羟基>普通酚>5-羟基碱性氧原子性质

药品分析学科第27页第二节黄酮类成份分析二、理化性质4、显色反应盐酸-镁粉（锌粉）反应金属盐类试剂配合反应可用于判别，但要防止假阳性结果

5、紫外光谱特征

药品分析学科第28页第二节黄酮类成份分析三、定性判别1、理化判别盐酸-镁粉（锌粉）反应金属盐类试剂配合反应2、色谱判别吸附剂：硅胶、聚酰胺硅胶色谱分离弱极性化合物很好；聚酰胺色谱分离含游离酚羟基黄酮及其苷为佳；纤维素薄层则适合用于分离多糖苷混合物。显色反应：采取在紫外光下观察荧光和喷显色剂相配合方法。药品分析学科第29页第二节黄酮类成份分析四、含量测定1、总成份含量测定直接测定：惯用芦丁作对照测定显色测定：惯用铝盐做显色剂2、单体黄酮成份含量测定TLCSHPLC（05版药典全部使用此法）五、常见黄酮类成份（略）药品分析学科第30页第三节三萜皂苷类成份分析一、概述1、概念2、含三萜皂苷类成份惯用中药

第31页第三节三萜皂苷类成份分析二、结构及理化性质甘草酸人参皂甙(A型)1、溶解度：①可溶于水，易溶于热水、含水稀醇、热甲醇和热乙醇中，几不溶于或难溶于乙醚、苯等极性小有机溶剂；②在含水丁醇或戊醇中溶解度很好药品分析学科第32页第三节三萜皂苷类成份分析二、结构及理化性质甘草酸人参皂甙(A型)1、溶解度皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等，在丁醇、戊醇中溶解性很好。2、紫外光谱特征药品分析学科第33页第三节三萜皂苷类成份分析二、结构及理化性质3、显色反应醋酐-浓硫酸反应冰醋酸-乙酰氯反应氯仿-硫酸反应金属盐类反应：+铅、钡、铜盐→沉淀药品分析学科第34页第三节三萜皂苷类成份分析三、定性判别1、理化判别①泡沫反应：多用于检验含有皂苷原料药；②化学显色反应：仅在组成药品较少中药制剂中使用。2、TLC吸附剂：硅胶，氧化铝、硅藻土等。展开剂：氯仿-甲醇-水（13：7：2）（10℃以下放置，下层）氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）（同上）显色剂：不一样浓度硫酸乙醇液最惯用。药品分析学科第35页第三节三萜皂苷类成份分析四、定量分析（一）总成份分析1、重量法

①该法主要用于含皂苷原料药质量控制。②在中药制剂中，当处方中药味含皂苷类成份较多时，惯用正丁醇作溶剂，测定正丁醇浸出物。2、比色法：①惯用显色剂有：香草醛-硫酸、香草醛-高氯酸、醋酐-硫酸、高氯酸、浓硫酸以及亚甲蓝等。②注意测定单体皂苷（或皂苷元）与总皂苷关系药品分析学科第36页第三节三萜皂苷类成份分析四、定量分析（二）单体成份分析1、TLC薄层洗脱-比色法薄层扫描法2、HPLCHPLC-UV：人参皂苷、三七皂苷等可利用其在紫外区末端；有紫外吸收甘草酸、远志皂苷，灵敏度高。HPLC-ELSD：检测三萜皂苷类成份应用日渐广泛五、常见三萜皂苷类成份药品分析学科第37页第四节醌类成份分析一、概述1、概念：中药中醌类化合物主要有苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌四种类型可游离存在，也可与糖结合成苷，称为蒽苷。2、含醌类成份惯用中药药品分析学科第38页第四节醌类成份分析二、结构及理化性质丹参醌IIA大黄素1、物理性质：存在形态，升华性，光不稳定性2、溶解性：游离醌类多溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿等有机溶剂，微溶于或不溶于水。结合成苷后极性增大，易溶于甲醇、乙醇中，在热水中也可溶解，几乎不溶于苯、乙醚、氯仿等非极性溶剂中。药品分析学科第39页第四节醌类成份分析二、结构及理化性质3、酸性：酚羟基酸性→碱提酸沉法4、显色反应羟基蒽醌+碱→橙，红，紫红，蓝+Pb2+/Mg2+→配合物9、10位未取代羟基蒽酮化合物+对亚硝基二甲基苯胺

→紫，绿，蓝，灰药品分析学科第40页第四节醌类成份分析三、定性判别1、显色反应2、升华法3、TLC吸附剂：硅胶展开剂：乙酸乙酯-甲醇-水（100︰16.5︰13.5）适于分离蒽醌苷元和蒽醌苷，不含水或甲醇混合溶媒适合于分离蒽醌类苷元。显色方法：喷碱性试剂，喷醋酸镁甲醇液、氨气熏及在紫外灯下观察荧光，可见光下直接观察色斑。药品分析学科第41页第四节醌类成份分析四、含量测定1、游离蒽醌测定：弱极性溶剂提取后，加碱比色2、结合蒽醌测定：极性溶剂提取，水解测苷元先酸水解后，非极性溶剂提取苷元后测定3、单体成份含量测定TLCSHPLC-UV药品分析学科第42页第四节醌类成份分析四、含量测定例1、牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌测定—混合碱液比色法对照品溶液测定：以1，8-二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度（100µg/mL）。取1mL对照品液于10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱溶解并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm波优点测定。样品测定：⑴游离蒽醌测定：取牛黄解毒片10片，刮去糖衣，精密称定重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，称重，水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量，滤过，吸收滤液50mL于分液漏斗中，用蒸馏水20mL洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿层用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，直至混合碱液无色，合并碱液，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿层。将混合碱液在水浴上加热数分钟至氯仿挥尽，冷却，移入100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。药品分析学科第43页第四节醌类成份分析四、含量测定例1、牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌测定—混合碱液比色法⑵总蒽醌测定：精密称取游离蒽醌项下牛黄解毒片粉一片置于150mL烧瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小时，放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小时，放冷，吸出氯仿液，再加氯仿，反复操作至氯仿无色为止。合并氯仿层液，用蒸馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。将碱液置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中，用混合碱液稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌含量（相当于1，8-二羟基蒽醌含量）。⑶结合蒽醌计算：每片含结合蒽醌量=每片含总蒽醌量—每片含游离蒽醌量。药品分析学科第44页第四节醌类成份分析四、含量测定例2、复方丹参片中丹参酮ⅡA含量测定—高效液相色谱法色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270nm。对照品溶液制备：精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg，置50mL棕色量瓶中用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5mL，置25mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得（每1mL中含丹参酮ⅡA40µg）供试品溶液制备：取本品10片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸收对照品溶液与供试品溶液各10µL，注入液相色谱仪，测定，即得。药品分析学科第45页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份化合物名称

结构式

理化特征

惯用定量方法大黄酸(Rhein)（C15H8O6，284.21）

为黄色针状结晶（升化法），mp321℃～322℃，330℃分解。几乎不溶于水，溶于碱和吡啶，略溶于乙醇、苯、氯仿、乙醚和石油醚。UVλmaxMeOHnm(ε)：229(36800),258(0),435(11100)。高效液相色谱法薄层扫描法

药品分析学科第46页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份化合物名称

结构式

理化特征

惯用定量方法大黄素(Emodin)（C15H10O5，270.23）为橙色针状结晶，mp265℃～267℃。几乎不溶于水，溶于乙醇及氢氧化钠、碳酸钠、氨水等碱液中。25℃时溶于（g/100mL）:乙醚0.140、氯仿0.071、四氯化碳0.010、二硫化碳0.009。UVλmaxEtOHnm(Logε)：220（4.55），252（4.26），265（4.34），289（4.34），437（4.10）。

高效液相色谱法薄层扫描法

药品分析学科第47页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份药品分析学科第48页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份药品分析学科第49页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份药品分析学科第50页第四节醌类成份分析五、常见醌类成份药品分析学科第51页第五节挥发性成份分析一、概述挥发性成份是指中药中一类含有芳香气并易挥发成份，其化学组成复杂，主要包含挥发油类成份和其它分子量较小、易挥发化合物。萜类化合物芳香族化合物脂肪族化合物含挥发油成份惯用中药药品分析学科第52页中药名称

挥发油中主要成份中药名称

挥发油中主要成份厚朴辛夷肉桂陈皮川芎薄荷广霍香β-桉油醇、α-蒎烯、柠檬烯、醋酸龙脑酯柠檬烯、丁香酚、桉油精、α-蒎烯桂皮醛、桂皮酸、乙酸苯丙酯柠檬烯、柠檬醛藁本内酯、3-丁叉苯酞、香桧烯薄荷酮、薄荷脑、乙酸薄荷酯广霍香醇、苯甲醛、丁香酚、桂皮醛羌活

细辛

豆蔻

丁香

α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯、萜品烯醇-4、甲基丁香酚、黄樟醚、细辛醚优香芹酮、α-蒎烯、β-蒎烯桉油精、龙脑、樟脑、草烯松油烯、蒎烯丁香酚、水杨酸甲酯、α-蒎烯、β-蒎烯、乙酰丁香酚第53页第五节挥发性成份分析二、结构及理化性质薄荷醇桂皮醛柠檬烯1、溶解性：易溶于有机溶剂2、显色反应：酚类+三氯化铁→蓝，蓝紫，绿羰基+苯肼、羟胺→结晶体醛类+硝酸银胺→银镜内酯类+亚硝酰铁氰化钠+NaOH→红色并逐步消失药品分析学科第54页第五节挥发性成份分析三、定性判别TLC吸附剂：硅胶、氧化铝展开剂：石油醚、正己烷（加少许乙酸乙酯或苯）显色剂：茴香醛-浓硫酸试剂（通用型），若干扰较多，选取专属性强显色剂GC：对照品对照法定性GC-MSGC-FTIR药品分析学科第55页第五节挥发性成份分析四、定量分析总成份分析：蒸馏法单体成份分析：GC（首选）HPLCTLCSGC-MSGC-FTIR药品分析学科第56页第六节木脂素成份分析一、概述木脂素是一类在生物体内由二分子苯丙素衍生物聚合而成化合物。含木脂素类成份惯用中药：中药名称

主要成份中药名称

主要成份五味子

牛蒡子连翘远志

五味子甲素五味子乙素五味子醇甲五味子醇乙牛蒡子苷牛蒡子苷元拉帕酚连翘脂素连翘脂苷中国远志脂酚厚朴细辛杜仲黑芝麻厚朴酚

和厚朴酚细辛脂素

芝麻脂素（+）-1-羟基松脂素葡萄糖苷芝麻脂素

药品分析学科第57页第六节木脂素成份分析二、结构及理化性质CH3CH3OCH3OCH3H3COH3COH3COH3CO牛蒡子苷(元)五味子甲素1、溶解性游离—易溶于苯、乙醚、氯仿、丙酮、乙醇等成苷时—可溶于甲醇、乙醇等药品分析学科第58页第六节木脂素成份分析二、结构及理化性质2、紫外光谱特征λmax=250-350nm3、显色反应通用型显色剂：磷钼酸乙醇、硫酸乙醇Labat反应：+硫酸+没食子酸→蓝绿Ecgrine反应：+硫酸+变色酸→蓝紫药品分析学科第59页第六节木脂素成份分析三、定性分析TLC吸附剂：硅胶展开剂：亲脂性溶剂（苯、氯仿，加甲醇等）显色：香草醛试液，浓硫酸试液，磷钼酸乙醇溶液、碘熏四、含量测定总成份：变色酸比色法单体成份：TLCSHPLC药品分析学科第60页第六节木脂素成份分析五、常见木脂素类成份药品分析学科第61页第七节其它成份分析一、香豆素类成份香豆素是含有苯骈吡喃酮母核内酯类衍生物广泛存在于芸香科和伞形科植物中。1、主要结构及理化性质补骨脂素茵陈内酯异羟肟酸铁反应：酚羟基-三氯化铁显色反应：紫外光谱特征：λmax=300nm，母核有供电子基团取代可产生荧光药品分析学科第62页第七节其它成份分析一、香豆素类成份2、定性判别荧光法薄层荧光判别七宝美髯颗粒中补骨脂素、异补骨脂素判别取本品10g，研细，加醋酸乙酯20ml、盐酸0.5ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。薄层条件：硅胶G薄层板，展开剂正已烷—醋酸乙酯（4:1），显色剂为10%氢氧化钾甲醇溶液，紫外光灯365nm下检视。药品分析学科第63页第七节其它成份分析一、香豆素类成份3、含量测定可见-紫外分光光度法：荧光光度法：专属性强TLCS：薄层荧光扫描HPLC：C18，甲醇-水，UVDorFDGC：分子量小，含有挥发性药品分析学科第64页第七节其它成份分析一、香豆素类成份乌蛇止痒丸中蛇床子素含量测定色谱条件固定相：OV-1，2m×3mmID玻璃柱；气体流速：N230ml/min，H250ml/min，Air500ml/min；柱温：200℃；进样器和检测器温度：260℃。供试品溶液和对照品溶液制备精密称取内标物正廿三烷适量，加氯仿溶解，制成每1ml约含6mg溶液，作为内标溶液。取乌蛇止痒丸适量，研成细粉，精密称取约5g，置索氏提取器中，精密加入内标溶液5.0ml，加氯仿80ml，回流至近无色。将提取液浓缩至数毫升，经过3g小型硅胶柱，用氯仿洗脱至10ml量瓶中，加氯