医用多聚核苷酸制剂和多聚脱氧核糖核苷酸(PDRN)组织修复与再生功效评价方法

3医用多聚核苷酸制剂和多聚脱氧核糖核苷酸（PDRN）组织修复与再生功效评价方法本文件规定了医用多聚核苷酸制剂和多聚脱氧核糖核苷酸（PDRN）组织修复与再生功效的评价原则、一般要求、评价指标与等级、评价方法、取值规则与评分方法、评价结果判定与报告要求、质量控制与复核。本文件适用于以多聚核苷酸或PDRN为主要活性成分，用于组织修复与再生（如创面愈合、皮肤再生等）的医用制剂的功效与生物安全性等级评价。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T7917.4化妆品卫生化学标准检验方法甲醇GB/T16886.1医疗器械生物学评价第1部分：风险管理过程中的评价与试验GB/T16886.3医疗器械生物学评价第3部分：遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验GB/T16886.5医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验GB/T16886.10医疗器械生物学评价第10部分：皮肤致敏试验GB/T31816水处理剂聚合物分子量及其分布的测定凝胶色谱法GB/T39730细胞计数通用要求流式细胞测定法YY/T0127.1口腔材料生物试验方法溶血试验YY/T1561组织工程医疗器械产品动物源性支架材料残留α-Gal抗原检测YY/T1571组织工程医疗器械产品透明质酸钠ISO/IEC17025检测和校准实验室能力的通用要求（Generalrequirementsforthecompetenceoftestingandcalibrationlaboratories）《中华人民共和国药典》（以下简称《药典》）3术语和定义GB/T16886.1、《药典》界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1医用多聚核苷酸制剂medicalpolynucleotidepreparation以多聚核苷酸为主要活性成分，用于组织修复与再生的医疗器械。3.2多聚脱氧核糖核苷酸polydeoxyribonucleotide;PDRN源自特定生物组织的脱氧核糖核苷酸聚合物，其平均分子量范围为0.05kg/mol～1.5kg/mol，具有组织修复与再生功能。3.3组织修复与再生tissuerepairandregeneration4生物体对受损组织进行修复和功能恢复的过程。注：其包括细胞增殖、迁移、分化及细胞外4评价原则医用多聚核苷酸制剂和PDRN评价符合下列基本原则。a）科学性原则：评价指标应覆盖制剂的关键特性（理化、功效、安全），采用国际或国家公认的标准化方法，确保结果可重复、可溯源。b）风险导向原则：评价应基于风险管理思路，重点关注与临床安全有效性密切相关的指标，如无菌、细菌内毒素、生物学反应等。c）全过程评价原则：评价应涵盖从原材料控制、生产过程到最终产品的全链条，确保质量一致性。d）证据权重原则：采用分级加权评分体系，综合产品表征、功效测试和生物学评价结果进行等级判定。安全性评价具有一票否决权。5一般要求5.1生产环境生产场地应符合医疗器械生产质量管理规范（GMP）要求，具备与产品生产规模相适应的洁净环境。关键检验设备应定期校准与维护，并保留记录。5.2原材料与试剂多聚核苷酸或PDRN原料应符合YY/T1561或相关药用要求。生产用水应符合《药典》中纯化水或注射用水要求。5.3生物安全与处置试验过程中产生的生物样品废弃物应按生物危害废弃物管理要求进行安全处置。6评价指标与等级6.1评价指标要求医用多聚核苷酸制剂和PDRN的评价指标要求应符合表1规定。表1评价指标要求生物相容性相关，《药典》通则0631生物相容性相关，《药典》通则0632安全性相关，参考《药典》通则0821重金属检查法），56.2评价等级划分各项指标的具体评价等级划分应符合表2规定。表2评价等级划分细则含量≥标示值的95%-->1.0（0分）60%～70%（不含80分）50%～60%（不含60分）<50%（0分）值100分）（不含80分）（不含60分）<5.5或＞8.5（不含80分）（不含60分）<240或＞36020～50（不含60分）>50（0分）5～10（不含80分）>20（0分）50～100（不含60分）>100（0分）30%～40%（不含80分）20%～30%（不含60分）<20%（0分）40%～50%（不含80分）30%～40%（不含60分）<30%（0分）50%～60%（不含80分）40%～50%（不含60分）<40%（0分）60%～70%（不含80分）50%～60%（不含60分）<50%（0分）-----7评价方法7.1样品准备与基本表征样品应来自连续生产的三个独立批次。应记录样品的批号、规格、生产日期及贮存条件。7.2理化特性试验方法理化特性试验方法应符合表3规定。表3理化特性试验方法采用薄膜过滤法（滤膜孔径0.45μm）或直接接种法，培养温度30℃~35℃,采用高效凝胶过滤色谱法（HPGFC）测定。色谱柱型号：TSKgelG4流动相：0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0）-乙腈（80:20）；6称取样品适量，溶解或分散于新沸放冷的纯化水中，制成适宜浓度的溶采用原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法，按《药典》通则采用气相色谱-质谱联用法，参考GB/T79177.3功效特性试验方法功效特性试验方法应符合表4规定。表4功效特性试验方法采用CCK-8法。以人皮肤成纤维细胞（HSF）或永生化角质形成细采用体外血管形成试验的方法。以人脐静脉内皮细胞（HU7.4生物安全性试验方法生物安全性试验方法应符合表5规定。表5生物安全性试验方法察细胞形态变化或采用MTT法等定量方法测推荐采用豚鼠最大化试验（GPMT）或局部淋巴结试采用家兔皮肤刺激试验。将样品或其浸提液作用于动物皮肤，观察采用AMES试验和体外哺乳动物细胞染色体畸变试验，按标准方7.5统计学处理计量资料以均值±标准差表示。如需比较，可采用t检验或单因素方差分析（ANOVA），显著性水平8取值规则与评分方法8.1单项得分转换每一项指标根据其测定结果，对照表2中的等级划分标准，转换为对应的得分（100，80，60，0分）。安全性指标“细胞毒性”“皮肤致敏性”“皮肤刺激性”“遗传毒性”若为“不合格”（0分），则直接判定产品综合等级为“不合格”。8.2加权合成分数加权合成分数计算方法按照式（1）执行。T=Σ(si×wi)································································(1)式中：T——加权合成分数；si——第i项指标的得分；wi——第i项指标的权重。8.3等级划分根据综合得分T和关键安全指标，划分产品等级如下。a）I级：T≥90分，且所有关键安全指标均为A级（100分）。7b）Ⅱ级：80≤T＜90分，且所有关键安全指标不低于B级（即无0分项）。c）Ⅲ级：60≤T＜80分，且所有关键安全指标不低于C级（即无0分项）。d）不合格：T＜60分，或任何一项关键安全指标得分为0分。9评价结果判定与报告要求9.1评价报告评价报告应至少包括以下内容。a）样品信息（名称、规格、批号、生产商）。b）检验依据（本标准编号及名称）。c）检验环境与条件。d）各项指标的检验结果、单项得分、加权得分及等级判定。e）完整的原始数据记录（如仪器输出文件、照片等）。f）评价结论与局限性说明。g）报告日期、检验人员、审核人员签字及检验机构盖章。9.2公开披露要求生产商在产品技术规格书或