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文档简介
生物基尼龙材料发酵工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题(每题1分,共10分)1.生物基尼龙PA56的关键发酵单体之一是______。2.催化赖氨酸生成戊二胺的关键酶是______。3.好氧发酵过程中,溶解氧(DO)通常维持在______%左右。4.生物基己二酸发酵常用的碳源是______。5.戊二胺发酵中,常通过添加______调节pH。6.生物基尼龙材料的核心环境优势是______。7.发酵液中分离戊二胺常用的方法是______。8.产戊二胺工程菌的常见出发菌株是______。9.好氧发酵的温度一般控制在______℃左右。10.生物基尼龙聚合前需对单体进行______处理。一、填空题答案1.1,5-戊二胺(戊二胺)2.赖氨酸脱羧酶(LDC)3.20-304.葡萄糖5.氨水6.碳足迹低(或可再生)7.有机溶剂萃取(或双水相萃取)8.大肠杆菌(或谷氨酸棒杆菌)9.30-3710.纯化(精制)二、单项选择题(每题2分,共20分)1.适合生物基单体规模化生产的发酵方式是?A.分批发酵B.补料分批发酵C.连续发酵D.固态发酵2.戊二胺发酵中,抑制菌体生长的主要副产物是?A.乙酸B.乳酸C.柠檬酸D.琥珀酸3.属于生物基尼龙单体的是?A.己二胺(石化)B.戊二胺C.对苯二甲酸(石化)D.己二酸(石化)4.DO持续低于10%时,应采取的措施是?A.增加搅拌转速B.降低通气量C.减少补料D.提高温度5.分离生物基己二酸常用的方法是?A.结晶B.蒸馏C.电泳D.过滤6.产戊二胺工程菌常过表达的基因是?A.lysCB.ldcC.pykD.adh7.生物基尼龙碳减排率通常可达?A.10-20%B.30-50%C.60-80%D.90%以上8.发酵罐灭菌常用方法是?A.干热灭菌B.湿热灭菌C.紫外线灭菌D.过滤灭菌9.戊二胺发酵pH过高时,应添加?A.盐酸B.氨水C.氢氧化钠D.碳酸钠10.生物基尼龙聚合反应属于?A.缩聚反应B.加聚反应C.开环聚合D.配位聚合二、单项选择题答案1.B2.A3.B4.A5.A6.B7.B8.B9.A10.A三、多项选择题(每题2分,共20分)1.生物基尼龙常用发酵单体包括?A.戊二胺B.生物基己二酸C.生物基癸二酸D.己二胺E.对苯二甲酸2.发酵控制的关键参数有?A.温度B.pHC.DOD.搅拌转速E.补料速率3.戊二胺发酵代谢调控策略包括?A.强化赖氨酸合成B.敲除副产物基因C.过表达脱羧酶D.增加碳源浓度E.降低溶氧4.生物基单体分离方法有?A.萃取B.结晶C.离子交换D.蒸馏E.过滤5.适合的生物基尼龙发酵碳源有?A.葡萄糖B.木糖C.淀粉水解液D.甘油E.甲醇6.工程菌常用载体有?A.质粒B.噬菌体C.人工染色体D.病毒载体E.脂质体7.生物基尼龙应用领域包括?A.纺织纤维B.工程塑料C.汽车零部件D.包装材料E.医疗器械8.杂菌污染判断指标有?A.菌体形态异常B.pH骤变C.DO异常D.产物浓度骤降E.温度骤升9.影响戊二胺产量的因素有?A.碳氮比B.诱导剂浓度C.发酵时间D.搅拌强度E.初始菌浓度10.生物基尼龙优势包括?A.可再生B.可生物降解C.低毒性D.性能相当E.成本更低三、多项选择题答案1.ABC2.ABCDE3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABCDE8.ABCD9.ABCDE10.ABCD四、判断题(每题2分,共20分)1.生物基尼龙单体全部来自发酵。()2.补料分批发酵比连续发酵更易控制杂菌。()3.赖氨酸脱羧酶仅存在于工程菌中。()4.生物基己二酸发酵无需氧气。()5.戊二胺浓度越高,分离越容易。()6.敲除副产物基因可提高目标产物产量。()7.生物基尼龙性能比石化尼龙差。()8.温度越高,菌体生长越快。()9.双水相萃取可用于戊二胺分离。()10.生物基尼龙碳足迹为零。()四、判断题答案1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.×五、简答题(每题5分,共20分)1.简述生物基戊二胺发酵的核心流程。答案:核心流程为:①工程菌构建:以大肠杆菌为出发菌,过表达赖氨酸脱羧酶(ldc)基因,敲除乙酸合成基因(ackA);②种子培养:斜面→摇瓶→种子罐,获得高活性种子;③发酵罐发酵:补料分批发酵,控制温度30-37℃、pH6.5-7.5、DO20-30%,以葡萄糖为碳源,氨水调pH;④分离纯化:发酵液离心除菌体,经有机溶剂萃取→离子交换→蒸馏,获得纯度≥99%的戊二胺。2.发酵过程中如何控制溶解氧(DO)?答案:DO控制方法:①调节搅拌转速(100-800rpm),转速升高增加溶氧;②调节通气量(0.5-1.5vvm),提高空气流量;③补料策略:匀速流加葡萄糖,避免菌体过度生长耗氧;④罐压控制(0.05-0.1MPa),增加氧溶解度;⑤添加消泡剂(聚醚类),减少泡沫对溶氧的影响。在线监测DO,维持20-30%。3.工程菌构建中代谢调控的常用策略?答案:常用策略:①前体强化:过表达天冬氨酸激酶(lysC),增加赖氨酸供应;②关键酶过表达:强化ldc基因,提高戊二胺合成速率;③副产物敲除:敲除乙酸(ackA)、乳酸(ldh)合成基因,减少碳源浪费;④反馈抑制解除:突变lysC基因,避免赖氨酸反馈抑制;⑤转运蛋白调控:过表达戊二胺外排蛋白,降低胞内毒性。4.生物基尼龙的环境优势?答案:环境优势:①可再生:单体来自生物质(葡萄糖、淀粉),替代石化原料;②碳减排:比石化尼龙碳足迹低30-50%,部分可实现碳负排放;③可生物降解:如PA410可在自然环境中降解,减少塑料污染;④低毒性:生产无石化有害副产物;⑤循环利用:可通过化学回收或生物降解实现资源循环。六、讨论题(每题5分,共10分)1.如何优化生物基戊二胺的发酵产量和纯度?答案:优化方向:①菌株优化:用CRISPR编辑强化赖氨酸合成途径,筛选耐高浓度戊二胺突变株;②工艺优化:响应面法优化温度、pH、碳氮比,采用葡萄糖匀速流加,避免碳源抑制;③分离优化:结合双水相萃取与离子交换,提高纯度至99.5%以上;④过程控制:在线监测DO、产物浓度,实时调整补料速率;⑤下游整合:发酵液直接对接聚合,减少单体损失。通过优化,产量可从50g/L提升至80g/L以上。2.生物基尼龙工业应用的挑战及解决思路?答案:挑战:①成本高(发酵单体成本高于石化);②性能稳定性差;③市场接受度低;④标准缺失。解决思路:①规模化
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