兽医化验员考试真题及答案

兽医化验员考试真题及答案一、单项选择题（共25题，每题1分，总计25分）1.兽医实验室中操作二类动物病原微生物，应符合哪一级生物安全实验室要求（）A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-42.革兰氏染色的正确操作顺序是（）A.结晶紫→碘液→95%乙醇→沙黄B.碘液→结晶紫→95%乙醇→沙黄C.结晶紫→95%乙醇→碘液→沙黄D.沙黄→碘液→95%乙醇→结晶紫3.要准确移取150μL感染性液体，应选择下列哪种量程的移液器（）A.0.5-10μLB.10-100μLC.20-200μLD.100-1000μL4.大肠杆菌在麦康凯琼脂平板上的菌落颜色为（）A.无色半透明B.红色C.黑色D.黄色5.新城疫血凝抑制试验中，抗原的标准工作浓度为（）A.2个血凝单位B.4个血凝单位C.8个血凝单位D.16个血凝单位6.下列寄生虫虫卵检查方法中，适用于肝片吸虫卵检查的是（）A.饱和盐水漂浮法B.饱和蔗糖溶液漂浮法C.粪便沉淀法D.幼虫培养法7.血清中谷丙转氨酶（ALT）活性显著升高，最可能提示下列哪个器官损伤（）A.心脏B.肝脏C.肾脏D.肺脏8.含糖培养基高压灭菌的最佳参数是（）A.121℃，103kPa，15分钟B.115℃，68kPa，15-20分钟C.100℃，101kPa，30分钟D.134℃，137kPa，5分钟9.显微镜油镜物镜的标准放大倍数为（）A.40倍B.100倍C.400倍D.1000倍10.下列哪种培养基属于选择培养基（）A.普通肉汤培养基B.血琼脂平板C.麦康凯琼脂培养基D.巧克力琼脂平板11.高压灭菌效果监测最常用的生物指示剂是（）A.嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢B.枯草芽孢杆菌芽孢C.大肠杆菌D.金黄色葡萄球菌12.下列属于一类动物疫病的是（）A.猪丹毒B.非洲猪瘟C.鸡白痢D.牛结核病13.ELISA试验中常用的固相载体是（）A.硝酸纤维素膜B.聚苯乙烯微孔板C.玻璃载玻片D.尼龙膜14.细菌活菌计数常用的接种方法是（）A.平板划线分离法B.稀释涂布平板法C.斜面接种法D.穿刺接种法15.下列关于血凝试验结果的描述，属于完全凝集的是（）A.红细胞全部沉于孔底，呈圆点状B.红细胞大部分凝集，少量沉于孔底C.红细胞均匀铺于孔底，呈伞状D.红细胞凝集于孔边缘，中央有沉底16.采集血液样品用于血清学检测时，应使用下列哪种采血管（）A.肝素抗凝管B.EDTA抗凝管C.促凝管（分离胶管）D.草酸盐抗凝管17.细菌的芽孢属于（）A.繁殖器官B.休眠结构C.营养结构D.运动器官18.下列哪种消毒方法不能杀灭细菌芽孢（）A.高压蒸汽灭菌法B.干热灭菌法C.巴氏消毒法D.环氧乙烷熏蒸法19.琼脂免疫扩散试验属于下列哪种血清学反应类型（）A.凝集反应B.沉淀反应C.补体结合反应D.中和反应20.尿比重升高最常见于下列哪种情况（）A.尿崩症B.脱水C.慢性肾衰竭D.等渗尿21.BSL-2实验室操作感染性材料时，应在下列哪种设备中进行（）A.超净工作台B.Ⅱ级生物安全柜C.通风橱D.普通实验台22.下列哪种病毒可以凝集鸡红细胞（）A.猪瘟病毒B.新城疫病毒C.猪蓝耳病病毒D.口蹄疫病毒23.下列关于细菌在液体培养基中生长现象的描述，不属于的是（）A.均匀混浊生长B.沉淀生长C.菌膜生长D.绒毛状生长24.鸡球虫病的实验室诊断常用的粪便检查方法是（）A.直接涂片法B.饱和盐水漂浮法C.沉淀法D.幼虫分离法25.从事动物病原微生物实验活动的单位，必须取得下列哪种证件（）A.动物防疫条件合格证B.动物病原微生物实验室资格证书C.兽药经营许可证D.动物诊疗许可证【参考答案】1.B2.A3.C4.B5.B6.C7.B8.B9.B10.C11.A12.B13.B14.B15.C16.C17.B18.C19.B20.B21.B22.B23.D24.B25.B二、多项选择题（共10题，每题2分，总计20分）1.下列属于革兰氏阳性菌的有（）A.金黄色葡萄球菌B.炭疽芽孢杆菌C.猪链球菌D.大肠杆菌E.沙门氏菌2.下列属于血清学试验的有（）A.血凝抑制试验B.酶联免疫吸附试验C.聚合酶链反应D.琼脂免疫扩散试验E.补体结合试验3.BSL-2实验室必备的设施设备包括（）A.Ⅱ级生物安全柜B.高压蒸汽灭菌器C.应急洗眼装置D.正压防护服E.门禁系统4.粪便寄生虫检查的常用方法有（）A.直接涂片法B.饱和盐水漂浮法C.沉淀集卵法D.幼虫培养法E.血凝抑制试验5.下列关于移液器使用的描述，正确的有（）A.吸液时将按钮按至第一停点，缓慢松开吸入液体B.排液时先按至第一停点，再按至第二停点排尽液体C.不同量程的移液器可通用吸头D.吸取强腐蚀性液体后应及时拆解清洗E.使用完毕后应将量程调至最大值，竖直放置6.下列属于ELISA试验常用类型的有（）A.间接法B.双抗体夹心法C.竞争法D.捕获法E.免疫印迹法7.下列能引起血清总蛋白降低的疾病有（）A.严重脱水B.营养不良C.肝硬化D.肾病综合征E.大面积烧伤8.病毒分离培养的常用方法有（）A.鸡胚接种法B.细胞培养法C.实验动物接种法D.普通肉汤培养法E.组织块培养法9.下列关于血凝试验的描述，正确的有（）A.利用病毒血凝素凝集红细胞的特性B.可用于测定病毒的血凝效价C.反应必须在37℃条件下进行D.常用1%鸡红细胞悬液E.血凝效价为能使红细胞完全凝集的最高病毒稀释度的倒数10.实验室感染性废弃物处理的原则包括（）A.分类收集，标识明确B.高压灭菌后再转运处理C.锐器放入利器盒，防止刺伤D.可与生活垃圾混合处置E.建立处理记录，全程可追溯【参考答案】1.ABC2.ABDE3.ABCE4.ABCD5.ABDE6.ABCD7.BCDE8.ABCE9.ABDE10.ABCE三、判断题（共15题，每题1分，总计15分）1.革兰氏染色中使用的脱色剂为75%乙醇。（）2.饱和盐水漂浮法适用于所有寄生虫虫卵的检查。（）3.BSL-2实验室可以操作所有一类动物病原微生物。（）4.血凝抑制试验中，红细胞对照孔应出现完全凝集现象。（）5.细菌的菌落形态是细菌分类鉴定的重要依据之一。（）6.采集发病动物组织样品用于病毒分离时，若24小时内不能送检，应置于-20℃冰箱保存。（）7.ELISA试验中，底物溶液应现配现用。（）8.高压蒸汽灭菌时，需排尽灭菌器内的冷空气才能达到预期灭菌效果。（）9.显微镜的总放大倍数等于物镜放大倍数加上目镜放大倍数。（）10.琼脂扩散试验中，抗原和抗体在琼脂中扩散，比例合适处形成沉淀线。（）11.尿蛋白阳性仅见于肾脏疾病。（）12.所有细菌都具有细胞壁结构。（）13.补体结合试验中，溶血系统的作用是指示补体是否被消耗。（）14.从事兽医实验室检测的人员，无需进行生物安全培训即可上岗。（）15.IMViC试验中，大肠杆菌的典型结果为++--。（）【参考答案】1.×2.×3.×4.×5.√6.×7.√8.√9.×10.√11.×12.×13.√14.×15.√四、简答题（共4题，每题5分，总计20分）1.简述革兰氏染色的原理及操作步骤。2.简述新城疫血凝抑制试验（HI）的原理及96孔V型板法操作步骤。3.简述饱和盐水漂浮法的操作步骤及适用范围。4.简述BSL-2兽医实验室的基本生物安全要求。【参考答案】1.原理（2分）：革兰氏染色的原理与细菌细胞壁结构和组成相关。革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖层厚（15-50层）、交联度高、脂质含量低，经95%乙醇脱色时，肽聚糖层脱水收缩，孔径缩小，结晶紫-碘复合物被滞留在细胞壁内，不易被洗脱，最终呈紫色；革兰氏阴性菌细胞壁肽聚糖层薄（1-2层）、交联度低、脂质含量高，乙醇脱色时脂质被溶解，细胞壁通透性增加，结晶紫-碘复合物易被洗脱，经沙黄复染后呈红色。操作步骤（3分）：①涂片：取洁净载玻片，滴加1滴无菌生理盐水，用接种环挑取少量菌落/菌液混匀，涂成直径约1cm的薄而均匀的菌膜；②干燥固定：自然干燥后，载玻片菌膜朝上快速通过火焰3次固定；③初染：结晶紫染液覆盖菌膜染色1分钟，水洗至水流无色；④媒染：碘液染色1分钟，水洗；⑤脱色：滴加95%乙醇，边滴边摇动，至流出液无色（约30-60秒）后立即水洗；⑥复染：沙黄染液染色1分钟，水洗；⑦干燥后油镜观察。2.原理（2分）：新城疫病毒囊膜表面的血凝素能与鸡红细胞表面的受体结合，引起红细胞凝集（血凝现象）；当血清中存在新城疫特异性抗体时，抗体与病毒血凝素结合，阻断血凝素与红细胞受体的结合，从而抑制红细胞凝集，该现象称为血凝抑制，可用于检测血清中特异性抗体水平或鉴定病毒。操作步骤（3分）：①加样稀释：在96孔V型板每孔加入25μLpH7.2PBS缓冲液，第1孔加入25μL被检血清，吹打混匀后吸取25μL至第2孔，依次倍比稀释至第11孔，弃去第11孔多余25μL液体；第12孔设为红细胞对照，不加血清。②加抗原：第1-11孔每孔加入25μL4个血凝单位（HAU）的新城疫抗原，第12孔加入25μLPBS，轻晃混匀后37℃感作15-20分钟。③加红细胞：每孔加入25μL1%SPF鸡红细胞悬液，轻晃混匀后37℃静置20-30分钟，观察结果。3.操作步骤（3分）：①样品处理：取1-2g新鲜粪便置于烧杯中，加入少量饱和盐水（比重1.20），用玻璃棒充分捣碎搅匀，再加入10-15倍量饱和盐水混合；②过滤：用双层纱布或60目铜筛过滤，弃去粪渣；③漂浮：将滤液倒入洁净试管/青霉素瓶中，使液面略凸出于管口（不溢出），盖上干净盖玻片，确保无气泡、与液面完全接触，静置15-20分钟；④镜检：垂直提起盖玻片，快速翻转后置于载玻片上，显微镜下观察。适用范围（2分）：适用于检查比重小于饱和盐水的寄生虫虫卵和卵囊，包括大多数胃肠道线虫卵（猪蛔虫卵、鸡蛔虫卵、猪鞭虫卵等）、球虫卵囊、圆叶目绦虫卵；不适用于比重较大的虫卵，如吸虫卵（肝片吸虫、姜片吸虫）、棘头虫卵，此类虫卵需采用沉淀集卵法检查。4.BSL-2兽医实验室的基本要求从4个维度明确：①设施设备要求（1.5分）：实验室入口设门禁及生物安全级别警示标识；配备Ⅱ级生物安全柜用于感染性材料操作；配备高压蒸汽灭菌器用于感染性废弃物灭菌；设独立洗手池、应急洗眼装置，台面耐腐蚀、易消毒；通风系统保证气流从清洁区流向污染区，空气不循环使用。②人员要求（1.5分）：所有人员经生物安全培训、考核合格后持证上岗；定期健康体检，必要时接种相关疫苗；操作感染性材料时穿戴背开式工作服、一次性手套、医用外科口罩，必要时佩戴护目镜/防护面罩。③操作要求（1分）：感染性材料操作尽量在生物安全柜内进行，无法在柜内操作时采取物理屏障防护；严禁口吸移液，使用移液器操作；实验废弃物分类收集，感染性废弃物经高压灭菌后处置；实验结束后消毒台面及设备，离开前脱卸防护装备并洗手。④管理要求（1分）：建立生物安全管理体系，制定生物安全手册及操作规程；设专职生物安全管理员；制定应急处置预案并定期演练；建立人员健康、实验活动、废弃物处理等记录档案。五、综合实操题（共2题，每题10分，总计20分）1.某规模化猪场1-3日龄仔猪出现剧烈腹泻，排黄色浆状稀粪，发病率达40%，死亡率达90%，剖检可见十二指肠黏膜充血、出血，肠腔内充满黄色液体，肝脏有散在坏死点。现采集病死仔猪的十二指肠内容物、肝脏、脾脏样品，需通过实验室诊断确诊是否为致病性大肠杆菌感染，请写出完整的检验流程及结果判定标准。2.某蛋鸡场200日龄鸡群出现呼吸道症状，表现为咳嗽、甩头、呼吸困难，产蛋率从92%下降至68%，剖检可见腺胃乳头点状出血，肠道淋巴滤泡肿胀、枣核样出血，疑似新城疫感染。现采集发病鸡的喉气管拭子、血清样品，请分别写出病原检测和抗体检测的常用方法，并分析血凝抑制试验检测血清抗体时出现假阳性的常见原因。【参考答案】1.检验流程及结果判定标准如下：（1）样品预处理（1分）：无菌操作取肝脏、脾脏深层组织小块，直接划线接种于麦康凯琼脂平板、伊红美蓝琼脂平板；十二指肠内容物加入5倍量灭菌生理盐水振荡混匀，取上清液接种普通肉汤增菌，37℃培养6-8小时后再划线接种上述两种平板。（2）分离培养与形态观察（2分）：将平板置于37℃恒温培养箱培养18-24小时，观察菌落形态：典型大肠杆菌在麦康凯平板上呈鲜红色、圆形隆起、表面光滑湿润的中等大小菌落；在伊红美蓝平板上呈紫黑色、带有金属光泽的菌落。挑取可疑菌落进行革兰氏染色镜检，若为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌，单个或成对排列，可初步判定为大肠杆菌。（3）生化鉴定（3分）：挑取单个可疑菌落接种系列生化管，37℃培养24小时后观察结果。典型大肠杆菌生化特征为：发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇，产酸产气；IMViC试验（吲哚试验阳性、甲基红试验阳性、VP试验阴性、枸橼酸盐利用试验阴性）结果为++--；不分解尿素，不产生硫化氢，多数菌株动力试验阳性。符合上述特征可确定为大肠杆菌。（4）致病性验证（3分）：将分离菌株接种普通肉汤，37℃振荡培养18小时，调整菌液浓度为1×10^8CFU/mL，取0.2mL腹腔接种18-20g健康小白鼠5只，另设5只注射等量灭菌生理盐水作为对照。观察72小时，若试验组小鼠全部死亡，对照组无异常，且从死亡小鼠肝脏、脾脏中分离到相同的大肠杆菌，可判定为致病性大肠杆菌。（5）血清型鉴定（1分）：必要时采用大肠杆菌标准O、K抗血清进行玻片凝集试验，鉴定致病血清型，为后续疫苗防控提供依据。2.（1）病原检测常用方法（3分）：①病毒分离鉴定：喉气管拭子用含双抗的PBS处理后，接种9-11日龄SPF鸡胚尿囊腔，每胚0.2mL，37℃孵育72-96小时，收集死亡鸡胚尿囊液做血凝试验（HA）；HA阳性者用新城疫标准阳性血清做血凝抑制试验（HI），HI阳性即可确诊。②分子生物学检测：采用RT-