人工授精完整版

1、 采精 精液品质检查 精液稀释 精液保存 输精 人工授精时间 正确的位置，正确的时间！ 卵子是在奶牛发情的后10到14小时从卵巢中释放 出 来 在未受精之前只能存活6到12小时 奶牛的精子在生殖系统中可以存活24小时 “早-晚”原_法（8-12小时) 奶牛在早晨被发现有发情行为，在当天晚上进行 人工授精 奶牛在下午被发现有发情行为，在第二天早晨进 行人工授精 受孕率低的原因 与人工授精有关的问题 -种公牛的繁殖能力差 -人工授精技术使用不正确 -精液质量差 奶牛的因素： -生殖系统的传染疾病 -荷尔蒙失调 -输卵管堵塞 -生理缺陷 -早期胚胎死亡 与营养有关的因素 采精的准备 场地：宽敞、明亮

2、、安静、清结，有消毒 设施和保护栏。 台畜：活台畜、假台畜。 假阴道：安装调试后具备适宜的温度、压 力、和润滑度。 公畜：具备良好的繁殖体况；经过训练； 采精前进行充分的性准备。 假阴道法: 手握法：电刺激法: 按摩法： 采精操作 公畜的采精频率 公牛：每周两天，每天两次。 公猪、马：宜隔日一次，如果连续两天釆 精，要休息2-3天。 公羊：每天数次，连续数周。 精液的品质检查 外观检查 精子活力检查 精子密度检查 精 子畸形率检查 其他检查 精液的外观检查 精液量 精液色泽 精液气味 云雾状 精子活力检查 平板压片法 悬滴法 精子活力检查的程存 精子密度检查 估测法 血细胞计计数法 精子密度仪

3、测定 估测法 密：在整个视野中，精子间空隙不明显， 看不清 单个精子运动。10亿/ml。 中：在整个视野中，精子间空隙明显，可 容纳1 一 2个精子，310亿/ ml 稀：在整个视野中，精子间空隙较大，可 容纳数 不精子，1 3亿/ ml。 (二)血细胞计数法: 在显微镜看清血细胞计数板上的方格： 稀释精液：用移液管吸取精液50微升置于小试管 中， 再吸取3%NaCI溶液450或950微升与精液混 匀。 镜检：在400倍的显微镜下找出具有代表性的五 个 中方格，四角和中间一个或对角线五个，用计数 器计 数其中的精子数。 计算：1毫升原精液精子数=5*5*10*1000*稀 释倍数 精子密度仪

4、畸形率的检查 畸形精子：头部畸形、颈部畸形、尾部畸 形 精子畸形率：精液中畸形精子占总精子数 的百分率。 优质精液精子畸形率应小于：牛18%、羊 15%、猪18。/。、马 12% 畸形率的检查 取一滴原精液，均匀的涂在载玻片上，干 燥12分钟。 用96%以上酒精固定23分钟。 用美蓝或墨水染色12分钟。 用蒸馈水轻轻冲洗。 干燥后镜检， 其他检查 顶体异常率 精子生存时间和生存指数的测定 PH测定 美蓝褪色试验 果糖分解试验 精子耗氧量测定 顶体异常率的检查 取鲜精适量，在37C下用生理盐水稀释。 涂片，干燥，用5%福尔马林固定10分钟。 姬姆萨液染色1.52小时。 干燥后用树脂封闭，制成标本

5、。 400600倍镜检，数5001000个精子， 计算项体异常率。 精子生存时间和生存指数的测定 精子生存时间：指精子在某温度下在体外 的总的生存时间。 生存指数：将精液在某温度下，每隔812 小时检查一次精子活力，直至无活动精子 为止，相邻两次检查的平均活力与间隔时 间的积之和为生存指数。 PH测定 正常精液PH: 牛、羊6.56.9、猪、 马 7.47.5 同种精液PH偏低的，品质较好，PH偏高的 受精率、生活力和保存效果都显著降低 精液稀释 稀释的目的 稀释液的成分及作用 稀释液 的配制方法 稀释倍数的确定 稀释方法 稀释液的成分及作用 稀释剂：单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCI、5

6、%葡萄糖。 营养剂：主要提供营养，以补充精子在代谢过程中消耗营养。 奶类：奶粉(脱脂、速溶)112。/。；鲜奶经消毒加入1020ml。 卵黄，通常加入20%。 糖类，3%葡萄糖，11%蔗糖。 保护剂：主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。 非电解质或弱电解质：降低精液电解质浓度，常用糖类、氨基 乙酸。 缓冲物质：维持精液的PH，常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷 酸二氢 钾和三羟甲基氨基甲烷（tris)等。 防冷物质：防止精子发生冷休克，常用卵黄、奶类。 抗冻物质：甘油、二甲基亚砜(DMSO)。 抗菌物质：青霉素、链霉素、氨基苯磺胺。 其他添加剂：激素类、维生素、酶类、染料类、有机酸、精氨酸等

7、。 稀释液的配制要求 药物原料应选用化学纯和分析纯制剂。 用具须洗净消毒。 药品用蒸馏水溶解后，要进行过滤和水浴 消毒。 蒸馏水要新鲜。 卵黄要取自新鲜鸡蛋。 最好现用现配，卵黄、奶类、抗生素现用 现加。 稀释倍数的确定 一头公牛一次采得鲜精12毫升，经检查精子活力 为0.7，密度先11?乙/毫升，如为母+输輪时要余 有效精子数不少于0.1亿，输精量为0.25毫升，本 次米得的精液可兔多少头_牟|俞? 每毫升原精液中有效精子数：11+0.7=7.7亿/ 毫升 稀释后每毫升精液中有效精子数：0.1/0.25 = 0.4 亿/毫升 稀释倍数：7.7/0.4 = 19.25 取 19倍 可配母牛头数

8、：12*19/0.25 = 912头 稀释方法 将精液精液与稀释液同处在30C的环境中。 检精液品质，确定稀释倍数。 稀释时，将稀释液沿着精液容器的壁慢慢 加入精液中，同时慢慢转动精液瓶，使之 混匀。 如需高倍稀释，应先做35倍的低倍稀释 查。 精液保存 常温保存：1525 C 低温保存：05C 冷冻保存：保存在液氮(-196C)或干冰(- 79C)中。 液氮及其容器 液氮的特性：超低温性、易挥发性、抑菌 性。 利用液氮：防冻伤、防窒息、防爆炸 液氮 罐： 精液的冷冻保存原理 玻璃化假说：稀溶液在冰晶化温区（0- 60 C)易形成冰晶，冰晶为分子有序排列 形态规则、颗粒较大的固体，可对精子产

9、生渗压和机械危害。如溶液快速降温，则 形成分子无序排列、颗粒较小的玻璃化固 体，对精子危害小，再以同样的方式升温， 精子即会恢复活力。 输精前的准备 母畜的准备：母畜经发情鉴定后，确定已到输精 时间，将 其适当保定，尾巴拉向一侧，清洗消毒 外阴。场地选择：在室外受精时，选择平坦，避 风处，以免尘土飞扬 保定方法：先将受配母牛保定在配种架内，将母 牛保定结实，再将尾巴系于一则。 清洗消毒：将手伸到直肠内清除宿粪，再用清水 冲洗外阴部，用清洁湿布擦净，再用2-3% 来苏液 消毒，然后用清洁干布擦干。 冻精准备与解冻 解冻方法：自然解冻、手槎解冻、温水解冻。 解冻温度：3842C (般控制在40 C

10、)。 注意:事项：1、取冻精时，冻精离开液氮的时间不要太长， 不超过1秒钟 且冻精不要超过瓶口。 2、 水温控制要控制好，输精解冻时水温稍低，检查时水 温可 稍高。 3、 解冻时间不要太长1015秒，并要轻轻摇晃细管冻精。 4、 解冻后要擦干细管上的水，并检查细管有无断裂和破 损。 jHNSAG2006/03/3000018 细管精液装枪 器械的准备与消毒 人工输精 开膣器（内窥镜）输精法 首肠把捤输精法 开膛器（内窥镜）输精法 直肠把握输精法 直肠把握子宫颈输精法胃 1、冻精的适宜解冻温度：3839C 2、母牛的输精时间：发情开始后812小时一次，隔812小时一次。 3、适宜的输精部位：子宫颈深部和子宫体内。 4、精液解冻后要尽快输精。 5、精液解冻后要保存在3436C下，温度不可波动过大。 6、细管装入枪内后，要检查一下精液是否能从套管外流出。 7、排出宿粪后，先擦洗牛外阴部，再插入输精器。 8、插入输精器时，先斜向上方前进1015cm，再水平插入。 9、向子宫颈插入输精器时，要注意两手协同操作。 10、 输精器与子宫颈方向要保持一致。 11、 注入精液困难时，要适当改变输精器方向或稍后拉，但切忌后退过多。 12、 注入精液要缓慢，一般为10秒。 13、 注入精液的同时要减缓母牛的努责，防止精液倒流