脂蛋白相关磷脂酶Ａ２与动脉粥样硬化相关研究进展

1、脂蛋白相关磷脂酶与动脉粥样硬化相关研究进展【摘要】 血浆脂蛋白相关磷脂酶 A2(LP-PLA2)由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，又称血小板活化因子乙酰水解酶 (PAF-AH)，在血浆中主要与低密度脂蛋白结合。近年来，越来越多研究表明在动脉粥样硬化的发病机制及预防性治疗上，LP-PLA2是动脉粥样硬化中的一个新的炎性反应标志物，可能成为冠心病治疗的新靶点。【关键词】 脂蛋白相关性磷脂酶 A2；动脉粥样硬化；冠心病【Abstract】 Lipoplrotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2)，also named platelet- activati

2、ng factor，synthesized and secreted by ripe macrophage and lymphocyte，which are transported in human plasma mainly bound together with low-density lipoprotein.Research in rerent years indicates the necessity of studying Lp-PLA2 as a new inflammatory marker factor in pathogenesis and prophylactic trea

3、tment of atheroselerosis.and Lp-PLA2 may become an new therapeutic target of coronary heart disease.【Key words】 Lipoplotein-associated phospholipaseA2；Atheroselerosis；Coronary Heart Diseae动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是一种全身弥漫性的病理状态，可同时累及冠状动脉、颈动脉以及其他动脉，是冠心病、脑卒中以及其他阻塞性血管疾病的病理基础。在AS发病机制研究中，近年来最大的成就在于认识到了AS

4、是一炎性反应性疾病，在粥样斑块形成、进展和最终破裂的过程中均有炎性反应介质的参与，炎性反应细胞及其释放的产物已被认为是最主要的促动脉粥样硬化因素。基于此，已有多个研究开始着手研究探索炎性反应细胞与AS的联系。脂蛋白相关磷脂酶 A2(Lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)作为一个新近研究的炎性反应介质，近年来越来越多的证据表明其具有促进AS的作用，是AS中的一种新的炎性反应标志物。1 Lp-PLA2的来源、存在形式及分类Lp-PLA2是磷酯酶 A2 (phospholipase A2，PLA2)超家族中的一员，由441个氨基酸残基组成的一

5、种丝氨酸脂酶，相对分子质量为45.4kD。PLA2是一类能水解磷脂甘油支架Sn-2 位上的短链酰基的酶族。根据存在的部位、 底物特异性、 辅助因子的需求和生理学作用等，PLA2主要分为四类：分泌型；胞浆型；非钙离子依赖型；其他：以Lp-PLA2为代表。Lp-PLA2主要由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，并受炎性介质的调节，人循环中的Lp-PLA2以与脂蛋白颗粒结合的形式存在，其中2/3与低密度脂蛋白结合(low density lipoprotein，LDL)，1/3与高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)、极低密度脂蛋白VLDL(very low den

6、sity lipoprotein，VLDL)结合1。2 Lp-PLA2在AS中的作用机制Lp-PLA2作为一种新的炎性反应标志物，在AS的几个主要阶段中均起着作用。Lp-PLA2主要由巨噬细胞和淋巴细胞产生，在早期的关于Lp-PLA2与 AS的研究中2-3因 Lp-PLA2能水解致炎因子如血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)及结构相关的氧化磷脂，因此曾被认为能抑制炎性反应，甚至能抑制动脉粥样硬化的形成，故也被称为血小板活化因子乙酰水解酶 (platelet activating factor acetylhydrolase，PAF-AH)。但是近年来的

7、研究已证实Lp-PLA2更大的作用在于促进AS的发生与发展。Lavi等4的研究显示，在冠状动脉口和冠状窦同时采取血样检测Lp-PLA2浓度，在有明显动脉粥样硬化斑块的冠脉血管床处的血液中其Lp-PLA2水平明显升高。而当冠状动脉斑块不存在时，Lp-PLA2水平却明显降低了。这项研究还表明，被Lp-PLA2水解氧化LDL(Oxidized low density lipoprotein，oxLDL)而产生的溶血卵磷脂与冠脉的内皮功能紊乱高度相关。而在另一项冠心病猝死患者的冠脉Lp-PLA2表达的免疫组化研究中，Kolodgie等5发现在坏死中心、巨噬细胞及调亡的巨噬细胞、易损及破裂斑块的周围Lp

8、-PLA2高度表达，最低剂量的Lp-PLA2主要出现在损害较轻的脂质池。这些反映出了Lp-PLA2在脂质水解中的主要作用。这些水解后的产物将会吸引循环中的单核细胞，同时参与巨噬细胞的活化。进一步支持了Lp-PLA2在动脉硬化中的作用。除此之外，该研究还表明Lp-PLA2与凋亡的巨噬细胞、巨噬细胞的凋亡及脂质中心的扩大有关。而高水平的Lp-PLA2也存在于破裂易斑块，这表明了Lp-PLA2是从这些斑块释放进入循环的。这些发现都揭示了Lp-PLA2在斑块的形成及破裂过程中也许是一种特别的标志物及潜在的介质。冠状动脉和颈动脉的组织染色表明Lp-PLA2在薄纤维帽或易损斑块的存在，但不是在斑块的早期阶

9、段6-7。更重要的是，冠状动脉和颈动脉组织的Lp-PLA2在薄的纤维帽粥样斑的易损边角的聚集度非常高。此外，组织病理学染色表明，Lp-PLA2在粥样硬化的冠状动脉和颈动脉斑块的分布区域与巨噬细胞及氧化的低密度脂蛋白是相同的。在CARDIA 研究中8，在冠脉风险发展过程中Lp-PLA2的浓度(非活性)与钙化的冠脉斑块(紧密)联系。这可能大体地反映出了Lp-PLA2与脂类物质生物学上的多样性。 Lp-PLA2 大部分被认为具有致AS作用，然而该酶也有部分抗AS作用。在体外Lp-PLA2降解PAF。尽管相同的活动不能在体内演示，Lp-PLA2能分解 VLDL以减少LDL的促进单核细胞趋化和黏附的能力

10、。总而言之，Lp-PLA2通过水解动脉内膜上的LDL上的氧化卵磷脂，从而生成溶血卵磷脂(Lysophosphatidylcholine，Lyso-PC) 和游离的氧化脂肪酸 (Oxidized Fattey Acid，ox-FA)，后二者是促炎介质，能刺激粘附因子和细胞因子的产生9，从而导致单核细胞由管腔向内膜聚集。单核细胞在内膜聚集后衍生为巨噬细胞，巨噬细胞吞噬oxLDL 变成凋亡的泡沫细胞。而这些活化的巨噬细胞和泡沫细胞会产生更多的Lp-PLA2重返至循环中4。凋亡的泡沫细胞聚集成动脉粥样硬化性斑块，斑块能释放细胞因子和蛋白酶，降解纤维帽的平滑肌细胞和胶原基质，使斑块变得脆弱、破裂，从而引

11、起AS的发生与发展，导致血栓形成和心血管事件的发生 1。3 Lp-PLA2与AS的临床流行病学研究3.1 Lp-PLA2与冠心病 流行病学研究和临床前瞻性研究发现，发生心血管事件者Lp-PLA2浓度或活性显著高于对照组 。血浆Lp-PLA2浓度或活性升高是心血管事件的独立危险因子，Lp-PLA2浓度、活性与心血管疾病风险正相关。WOCOPS10是一项评估普伐他汀在预防冠脉事件中的价值的试验，在中年男性苏格兰人中观察Lp-PLA2、hs-CRP、纤维蛋白原、白细胞计数等炎性反应标志物是否与冠脉事件有关。纳入了580例曾发生过冠状动脉事件(非致死性心肌梗死、心源性死亡或冠状动脉血运重建事件)的患者

12、，并从相同人群中纳入了未发生过冠状动脉事件者共1160例，再根据年龄与吸烟史分2组作为对照组。研究结果显示，Lp-PLA2、C反应蛋白(C- reactiveprotein，CRP)、纤维蛋白原和白细胞计数的水平可以作为冠状动脉事件强有力的预测因子，每个变量组中最高五分位数者与最低五分位数者相比，冠脉事件危险约增加一倍。但在包括年龄、收缩压、脂蛋白水平和炎性反应标志物在内的多变量模型分析中，CRP、纤维蛋白原和白细胞计数增高与冠脉事件无明显相关性，而Lp-PLA2的最高五分位数者与最低五分位数者相比，心血管事件危险增加约2倍 (RR=1.49，95%CI：0.95-2.33)。研究认为Lp-P

13、LA2是一个强有力的、肯定的冠脉事件预测因子，且独立于其他炎性反应因子。ARIC研究11的结果显示Lp-PLA2与CRP在鉴别低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)不高的高危冠心病患者中可能具有互补性。其在为期6年的前瞻性队列研究中纳入12819名美国不同社区的健康中年人(包括男性和女性，白人和黑人)，结果发生冠心病事件的6 0 8例患者中Lp-PLA2、hs-CRP水平高于未发生冠心病事件的患者。在调整了年龄、性别与种族后，Lp-PLA2、hs-CRP最高三分位数( 422 ?g/L)者与最低三分位数者相比冠心病事件风险显著增

14、加(HR=1.78，95%CI：1.33 - 2.38)。尤其是当LDL-C130 mg/dl时，位于Lp-PLA2最高三分位数者与最低三分位数者相比冠心病事件风险显著增加(HR=1.99，95%CI：1.17-3.38)，在调整了包括hs-CRP的模型后相比，冠心病事件风险仍有显著增加(HR=2.08，95%CI：1.20-3.62)。Brilakis等12的研究旨在评价Lp-PLA2与冠状动脉疾病(coronary artery disease，CAD)危险因素、血管造影CAD严重程度以及主要不良事件发生率的关系，测量了接受有临床指征的冠状动脉造影的504例患者(年龄为 6011岁，且38

15、%为女性)的Lp-PLA2水平。单因素分析显示，Lp-PLA2水平与血管造影CAD病变范围相关，而多因素分析中无此相关性。在中位期4.0年的随访期间，所接触到的466例患者中有61例(13%)发生了共72项主要不良事件(20例死亡，14例心肌梗死，28例冠状动脉血运重建，10例卒中)。Lp-PLA2水平升高与不良事件的发生风险高相关：每标准差的风险比为 1.28(95%CI：1.06-1.54，P=0.009)，经校正了临床与血脂变量及CRP等后仍有意义。研究认为Lp-PLA2水平升高与随访期间主要不良事件发生率增高相关，而且该相关性独立于传统CAD危险因素和CRP。Oei等13利用鹿特丹研究

16、 (the Rotterdam Study)的样本进行了一项队列研究中，对包括308例CAD患者和1820例随机对照标本(年龄55岁，平均年龄70岁)平均随访了7.2年。采用 Cox风险比例回归模型分析，校正了年龄、性别、体质指数、收缩压、非HDL胆固醇、HDL胆固醇、糖尿病、吸烟、饮酒量、降胆固醇药物、白细胞计数和 hs-CRP水平后，与基线Lp-PLA2水平处于最低四分位数的个体相比，Lp-PLA2活性处于第2、第3和第4四分位数者的CHD风险分别增高 39%(HR=1.39，95%CI：0.922.10)、99%(HR=1.99，95%CI：1.32-3.00)和97% (HR=1.97

17、，95%CI：1.28-3.02)(Ptrend=0.01)。这些结果提示，无论是在非HDL胆固醇水平是高于中位数组还是在低于中位数组，Lp-PLA2水平与CAD和缺血性卒中的风险之问存在显著的相关性。进一步证明了Lp-PLA2是冠心病独立预测指标。Iribarren8作了一项关于年轻人群(年龄3345岁)Lp-PLA2浓度与活性和钙化的冠脉斑块的联系的研究，研究按性别和种族将266名经CT扫描证实无钙化(冠脉钙化评分=0)的冠脉斑块的对照组与266名病例组进行1：1配对，发现Lp-PLA2浓度与活性在病例组 (296101ng/mL，36.412.3nmol/(mlmin)显著高于对照组(2

18、6780ng/mL，32.911.8 nmol/mL /min)。在校正了年龄的逻辑回归分析中，Lp-PLA2 浓度、活性与钙化的冠脉斑块每1个标准差的OR增值分别为1.40(95%CI，1.171.67)，1.39(95% CI，1.14 1.70。在校正了LDL-C、HDL-C、三酰甘油、CRP等多因素复合变量后，在Lp-PLA2浓度上仍然有显著意义 (OR=1.28；95%CI，1.03-1.60)，而Lp-PLA2活性则无。没有证据发现在Lp-PLA2浓度与活性在作为钙化的冠脉斑块的预测因子中与LDL-C的相互作用。研究认为在年轻人群中Lp-PLA2浓度与存在的钙化的冠脉斑块独立相关，Lp-PLA2可以作为一个有用的亚临床心血管危险的标志物。Gerber等14的关于心梗后不良事件的风险及预后评估的研究进