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文档简介

1、 LCMS # #有机色素孔雀石绿用作观赏魚的白点病或烂尾病的治疗药物（抗菌剂），但在日本国内不允许用于养殖鱼。2004年12月16日，日本厚生劳动省颁发了食安监发第1216002号关于养殖鱼的孔雀石绿分析法的通知，定量试验采用HPLC法，确认试验中采用LCMS法。另一方面，孔雀石绿在体内代谢为隐性孔雀石绿，因此，需要对这2种成分进行同时分析。本文介绍了孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的LC-MS同时定量法。孔雀石绿具有铵离子基团，隐性孔雀石绿具有二甲胺基,因此离子化采用正离子ESI法。在这些化合物的分析中，流动相的pH值很重要，对于离子化效率、谱图模式以及保留时间都有影响。本文中采用流动相为5mM甲

2、酸铵（pH3.0）/乙腈=20/80。并且，隐性孔雀石绿会因紫外线照射而使离子化效率下降，对检测和定量造成不良影响，因此，在分析时不通过UV检测器。本分析条件高灵敏度地检测出0.8ppb的孔雀石绿以及隐性孔雀石绿，两个成分在0.8-40ppb范围内线性良好。 # 胡曲|10：.ODll.O：孔雀石绿MalachitegreenpptE时隐性孔雀石绿|1孔雀石绿1|11J隐性孔雀石绿11111111111111111111(COOIii血貼曲ILDC:Mala:hitegreenC.8pptead图1L孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的SIM色谱图kJCOTalschile:reen|5I1131111

3、1.1_15叫.0：0) 2.01.51.0Imen.i/-000：00i2血chitegre5r心壮赴*E)(adMass:S2S.20：.01二InTjen.i/-000：00i1.75-：LIT|mn|17芒氏：22:2:0迁30：:迓回迂皿邀4:0抚陀匚七1.501.2o图2孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的正离子ESI质谱图 # #面积硫II.OCO.Offli面积00；0Cj 1.0131.41.31.21.1.0叨C.714C.3C.2浓度1.?1.51.511.31.21/1.C.3图3孔雀石绿以及隐f性孔LtU：oniEilactitegreenY叮備.曲-21画吧刃壬浓度L雀石绿的工作曲线 #?henomenexSynqrgi4u1FusionPR1二35亞:(Ph3.0)/乙腈色谱柱80AE（2.0mmI：D.l50mmL?）流动相：5mM甲酸铵缓冲液=20/80流速：0.2mL/min进样体积：2mL柱温：40C电压：+4.5kV(ESI-Negativemode)CDL温度：250C雾I化匕气流速lll.5L/minpI；干燥气压力:0.1MPaCDL温度：250C山恂加热块温度：200CCDL,Qarray电压：默认值扫

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