免移虫蜂王浆喷浆喷施系统的研究

免移虫蜂王浆喷浆喷施系统的研究

为了改变蜂王浆生产的手工生产状况，实现中国的蜂王浆生产机械化，自20世纪80年代以来，方文福、杨多福和金堂东进行了大量积极有效的研究工作，为实现蜂王浆生产机械化奠定了良好的基础。但目前我国仍然是靠人工移虫生产蜂王浆,分析其原因,主要是研究成果与养蜂生产实际应用还有一定的差距,致使蜂王浆生产机械化仍无法实现。显然实现蜂王浆生产机械化,解决人工移虫难题成为了关键问题。人工移虫是靠手工操作,用移虫针,从巢房中将小幼虫从巢房中取出,然后放入王台中,这种人工移虫生产蜂王浆方法,不但劳动强度大,费时费力,而且受到虫源和视力的限制,生产效率低,同时也严重限制了蜂场的蜂王浆生产规模。针对这一现状,我们模仿蜜蜂生物学特性,设计了一种免移虫蜂王浆生产器,即让蜂王直接产卵于台基条中,把固定有台基条的产浆框放入产浆的蜂群中,供生产蜂王浆使用。免移虫生产蜂王浆技术,不要移虫,蜂王直接把卵产在王台中,大大地减少了人工移虫劳动强度,也减少了工作时间,对提高养蜂生产效益和经济效益都具有重要意义。1材料和方法1.1实验蜜蜂组实验蜂群为饲养在江西农业大学蜜蜂研究所院内的意大利蜜蜂(Apismelliferaligustica)。1.2巢房上套王台的安装我们设计的免移虫蜂王浆生产器,包括人工巢脾、隔王栅及王台(图1),巢房设置在人工巢脾内,人工巢脾的正面设有隔王栅,隔王栅上开有蜂王放入口及工蜂进出栅孔,人工巢脾背面的巢房上套有带连体座的王台,带连体座的王台可从巢房上取出。使用免移虫蜂王浆生产器时,在人工巢脾正面盖上隔王栅,把带连体座的王台套入人工巢脾背面的巢房上,从隔王栅上的蜂王放入口放入蜂王,再盖住蜂王放入口;把人工模仿的蜂王产卵巢脾放入蜂群中央位置,让蜂王在成排的王台中产卵(图2),过12h或24h,取出人工模仿的蜂王产卵巢脾,从人工巢脾背面取出成排的王台,并把成排的王台固定在产浆框上,根据蜂群群势,每个产浆框上放3~5排王台,然后把产浆框放入产浆的蜂群中,供生产蜂王浆使用。1.3u3000仪器岛津SPD-20A型高效液相色谱仪;JK-50B型超声波清洗器;台式离心机;SK-1型快速混匀器;岛津AUY120型分析天平;DZF-0型真空干燥箱;海尔冰箱;放大镜台灯。1.4实验方法1.4.1实际样品的调整将免移虫蜂王浆生产器上的王台台基条依次标号为1~12号(每个王台台基条上有14个王台),在1、5、9号台基条上王台内涂上薄薄一层蜂蜜,2、6、10号台基条上王台内涂上薄薄一层王浆,3、7、11号台基条上王台内涂上薄薄一层蜂蜡,4、8、12号台基条为空白对照组,实验重复时调换处理次序。将处理好的王台按编号放入免移虫蜂王浆生产器中,从隔王栅上的蜂王放入口放入一只产卵力强的蜂王,限王产卵12h放出蜂王,在放大镜台灯下分别统计各组王台内的产卵量,计算蜂王产卵率,蜂王产卵率(%)=产卵量/王台总数×100%。1.4.2蜂王台接受情况实验时,在免移虫蜂王浆生产器中把王台套入人工巢脾背面的巢房上,盖上隔王栅和盖板,放入蜂群中央位置,让蜜蜂清理1d,并在次日6:30从隔王栅上的蜂王放入口放入一只产卵力强的蜂王,限王产卵12h,当日18:30取出具卵王台固定于产浆框上,插入继箱群继续孵化,统计王台的接受情况(图3)。取浆时分5.5、6.0、6.5、7.0d四个不同的时间段,用电子分析天平分别称量单个王台中王浆量(即台王浆重)。每组保留5g样品于离心管中用于检测蜂王浆中的10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)含量和水分含量。实验蜂群2群,重复4次。1.4.3蜂群王台接受率和台王浆重具卵台基条的准备与“1.4.2”相同。将具卵的台基条固定于产浆框上,每个产浆框3排台基条,每排台基条有28个王台。待免移虫产浆台基条在蜂群中孵化3天后,在同一群同时插入一个免移虫产浆框和一个传统人工移虫产浆框,这两个产浆框王台数相同。72h小时取浆,记录每个产浆框上王台接受率、每个王台中平均王浆重(即台王浆重)和群王浆重。接受率(%)=(接受个数/移虫个数)×100%;台王浆重(g)=群王浆重/接受个数。同样每组保留5g样品于离心管中用于检测蜂王浆中的10-HDA含量和水分含量。实验蜂群4群,重复数3次。1.4.4蜂王浆中水分含量的测定取蜂王浆试样约0.5g,置于已干燥至恒量的称量瓶中,精密称定,摊平,放入真空干燥箱,在温度75℃,压力-0.095~-0.100MPa(-730~-760mmHg)下干燥4h后取出称量瓶,置干燥箱中,冷却30min后称量,反复干燥直至前后两次质量差不超过2mg,为恒量。蜂王浆中水分含量计算公式:X=(m1-m2)/(m1-m3)×100%;式中:X为蜂王浆中水分含量(%),m1为称量瓶和试样的质量,单位为克;m2为称量瓶和试样干燥至恒重后的质量,单位为克;m3为称量瓶的质量,单位为克。1.4.510-hda含量在蜂王浆中的测量1.4.5.超声波活化法样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀,取约0.5g,置于已称重的50mL容量瓶中,精密称定,加0.03mol/L盐酸1mL,水2mL,置快速混匀器上混合使试样溶解,加入无水乙醇30mL,边加入边轻轻摇动,再精密加入内标溶液10mL,并用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,立即置超声波浴中超声15min,取出,在3000r/min下离心10min后待测定。如不能及时测定,放在冰箱中冷藏待测。1.4.5.2.铬条件1.4.5.内标溶液配制精密吸取10-HDA标准溶液0.5、1、2、3、4、5mL至10mL容量瓶中。精密加入内标溶液2mL,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀。分别吸取此溶液2μL,注入色谱仪,用峰面积比值计算,应呈线性,求出校正因子F。1.4.5.蜂王浆中10-hda含量蜂王浆中10-HDA含量计算公式:X=F×(Ai/As)×(Ms/Mi)×100;式中X为蜂王浆中10-HDA含量(%);F为校正因子;Ai为试样中被测组分峰面积;As为试样中内标物峰面积;Ms为内标物质量,单位为克;Mi为试样质量,单位为克。1.5数据处理及分析实验数据采用StatView5.0的ANOVAandt-tests进行统计分析,各处理平均数间用ANOVAorANCO-VA进行差异显著性比较及相关分析。2结果与分析2.1两组不同时点蜂蜡组和对照组的比较从表1可知,在台基条上王台内涂上薄薄一层王浆,蜂王产卵率最高(90.1±7.3)%,显著或极显著高于对照组和蜂蜡组;王浆处理组与蜂蜜处理组差异不显著;蜂蜡处理的王台的蜂王产卵率最低,只有(71.0±10.8)%。显然对第一次用于蜂王产卵的台基条,为了提高蜂王产卵率,可以在台基条上王台内涂上薄薄一层王浆或蜂蜜。2.2蜂王浆与其他株幼虫的含量从表2可知:蜂王产卵后6.5d取浆,王台内王浆量最高,台王浆量平均达到(1.072±0.189)g,显著或极显著高于其他三组;以5.5d取得王浆中10-HDA含量最高,平均达到(1.59±0.22)%,显著高于其他三组;以5.5d和7.0d取浆时,蜂王浆中水分含量最低,显著或极显著低于6.0d和6.5d取浆,水分含量以6.0d取浆最高,平均达到(65.22±1.47)%。方文富等(2000)研究发现:采用2日龄(30~36h)幼虫产浆,在移虫后第54~66h台平均产浆量最多,说明84~102h幼虫时王浆量最高,与本文研究结果(84~96h幼虫时王浆量最高)一致。以5.5d取浆的蜂王浆中10-HDA含量最高,水分含量最低,其实验结果与陈世璧等(1992)相吻合。2.3王台王浆添加量从表3可知:尽管免移虫生产蜂王浆的王台接受率显著低于人工移虫接受率,但单个王台王浆量极显著的高于人工移虫的台王浆量,平均达到(0.985±0.233)g,群王浆总提高了32.6%;用免移虫与人工移虫生产蜂王浆中10-HDA含量和水分含量差异不显著,但免移虫生产蜂王浆中10-HDA含量有升高的趋势。2.4免移虫生产蜂王浆从表4可知:在蜂王浆生产过程中的寻找幼虫脾时间、每框寻找幼虫时间和每框移虫时间,免移虫生产蜂王浆与传统