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文档简介

学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精开学第九课(检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质)主备人:熊宝芹审核:周康、冯洁学习目标:知道还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定原理和操作方法。关键词:婓林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、50%的酒精溶液、双缩脲试剂【学习内容】一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中还原性糖、脂肪和蛋白质二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。1.可溶性还原性糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。即Cu(OH)2被葡萄糖还原成Cu2O,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸.2.脂肪可以被染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。3.蛋白质与发生作用,产生紫色反应。三.实验材料1.做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨.2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。四、实验试剂斐林试剂(包括:质量浓度为0。1g/mL和质量浓度为0.05g/mL)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包括:质量浓度为0.1g/mLNaOH溶液和质量浓度为0.01g/mLCuSO4溶液)、体积分数为50%的,蒸馏水。五、方法步骤:(一)还原性糖的鉴定1.制备组织样液。(去皮、切块、研磨、过滤) 苹果或梨组织液必须临时制备。2。取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。 3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡。 4。试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中,加热约2分钟,观察.溶液颜色:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀) 最好用试管夹夹住试管上部,使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。(二)脂肪的鉴定1。切.花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片,将薄片放在载玻片的水滴中,用吸水纸吸去装片中的水。 2。染。在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色1分钟。 3。漂洗(洗去浮色)。用吸水纸吸去薄片周围染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。4。滴清水制片观察。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片。(三)蛋白质的鉴定1、制备组织样液。(黄豆浸泡、去皮研磨、过滤.)也可购新鲜豆浆以节约实验时间。2、鉴定。加样液约2ml于试管中,加入双缩脲试剂A,摇匀;再加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,溶液变。 (可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够,在实验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底,并且试管也不易洗干净。)【课堂检测】1.在过氧化氢酶溶液中加入双缩脲试剂,其结果应该是()A。产生气泡B.溶液呈蓝色C.溶液呈紫色D.产生砖红色沉淀2.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物鉴定实验中,以下操作错误的是()A.只有脂肪的鉴定需要使用显微镜B。用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热C。使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用D。可溶性还原糖的鉴定,可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀3。根据生物组织中的有机物与某些化学试剂相互作用能产生颜色反应的原理,可以鉴定生物组织中某些有机物的存在.填写下表中的空格。需鉴定的有机物用于鉴定的试剂反应产生的颜色砖红色双缩脲试剂蓝色苏丹III染液4.将小麦种子分别置于20℃和30℃培养箱中培养4天,依次取等量的萌发种子分别制成提取液I和提取液II。取3支试管甲、乙、丙,分别加入等量的淀粉液,然后按下图加

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