2026届新高考生物冲刺复习微生物的培养技术及应用

2026届新高考生物冲刺复习微生物的培养技术及应用考点一培养基考点二无菌技术考点三微生物的纯培养考点四

微生物的数量测定培养基【P309】011.培养基的概念：人们按照微生物对

的不同需求，配制出供其

的营养基质。2.培养基的用途：用以

、

、

、

微生物或

。营养物质生长繁殖培养分离鉴定保存分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。菌落积累其代谢物【扩展】鉴定菌种的重要依据：菌落的大小、形状、颜色、透明度、光泽度等。培养基【P309】013.种类：划分标准培养基种类特点用途物理性质.

.培养基不加凝固剂。常用于

；.

.培养基加凝固剂，如琼脂。微生物的

、

，活菌

，菌种

；用途.

.培养基允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。富集、分离出特定的微生物.

.培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品，用以鉴别不同种类的微生物。鉴别不同的微生物液体固体分离鉴定计数保藏工业生产琼脂：是一种从红藻中提取的多糖，在98℃以上融化，在44℃以下凝固，琼脂仅作凝固剂，不提供能量和营养。选择鉴别【素养提升】选择培养基的具体实例01具体处理原理目的固氮菌能利用空气中的N2分离固氮菌自养型微生物能利用空气中的CO2分离自养型微生物大部分微生物不能利用石油中的能量分离石油分解菌金黄色葡萄球菌具有独特的耐盐性分离金黄色葡萄球青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用分离酵母菌、霉菌等真菌大部分微生物不耐高温分离水生栖热菌不加氮源不加碳源以石油为唯一碳源加高浓度食盐加入青霉素高温环境培养【素养提升】鉴别培养基的具体实例01具体处理原理目的尿素被分解产生氨，培养基呈碱性，使酚红指示剂变红。鉴别尿素分解菌刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。鉴别纤维素分解菌在伊红-亚甲蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽。鉴别大肠杆菌酚红培养基刚果红培养基伊红-亚甲蓝培养基刚果红培养基鉴别纤维素分解菌伊红-亚甲蓝培养基鉴别大肠杆菌酚红培养基鉴别尿素分解菌培养基【P309】014.培养基的营养构成：①主要营养物质：基本成分举例作用碳源

碳源CO2、CO32-、HCO3-为

微生物提供碳元素

碳源牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖等为

微生物提供碳元素氮源

氮源NH4＋、NO3-、NH3等是微生物合成

、

等物质所必需的。

氮源牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等K2HPO4、MgSO4、FeSO4、Ca(NO3)2、NaCl等①调节

平衡；②调节

平衡，等；水--①良好的

；②参与

反应，等；自养异养注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源蛋白质核酸无机有机无机有机酸碱渗透压溶剂生物化学无机盐培养基【P309】014.培养基的营养构成：②其他条件：pH、

、氧气。特殊营养物质【扩展】特殊营养物质指一类调节微生物正常生长代谢所必需，但不能用简单的碳源、氮源自行合成的有机物。如：维生素、氨基酸、碱基、卟啉、胺类等。微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊需求添加.

.pH调至.

.pH调至.

..

.维生素酸性中性或弱碱性无氧注：牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。培养基01常见的细菌培养基配方探究·实践【资料】1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g碳源、氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水【思考1】牛肉膏蛋白胨培养基是

培养基，

判断的依据是

。【思考2】牛肉膏蛋白胨培养基中能为细菌同时提供碳源和氮源的物质

是

。液体培养基中未加凝固剂牛肉膏和蛋白胨牛肉膏蛋白胨提示：不一定。例如，培养自养型微生物时，一般不需要添加

，原因：

；培养固氮微生物时，一般不需要添加

，原因：

。光合细菌固氮菌(根瘤菌)培养基01常见的细菌培养基配方探究·实践【思考3】培养微生物时，培养基中是否必须有碳源和氮源？碳源微生物可以利用空气中的CO2氮源微生物可以利用空气中的N2蓝细菌-光合作用硝化细菌-化能合成作用固氮菌的同化类型是：异养型，需要有机碳源；考向

围绕微生物的选择培育，考查科学探究【P313】1.（2023·广东卷）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（）A.A点时取样、尿素氮源培养基B.B点时取样、角蛋白氮源培养基C.B点时取样、蛋白胨氮源培养基D.C点时取样、角蛋白氮源培养基D012.厨房中的厨余垃圾多为湿垃圾，湿垃圾处理的有效方法之一是用微生物对其进行降解。如图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。下列有关叙述错误的是（）A.配制培养基后需进行灭菌处理，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法B.菌落①与菌落②周围产生了透明圈，说明菌落①与菌落②能产生淀粉酶C.培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个甚至几个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形态特征考向

围绕微生物的选择培育，考查科学探究【P313】D01培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，√；淀粉遇到碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，因此会形成透明圈，√；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，√；用肉眼观察菌落的形态特征,即可初步判断培养基上菌种的类型，×；4.（2024·江西卷）聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制备

培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有

、

、

等营养物质。(2)方法2采用

技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要

、

、

等“分子工具”。考向

围绕微生物的选择培育，考查科学探究【P314】01选择氮源水无机盐转基因(重组DNA/基因工程)限制酶DNA连接酶载体(3)除了上述2种方法之外，还可以通过

技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。(4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂）平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是:

。考向

围绕微生物的选择培育，考查科学探究【P314】01诱变育种培养基的卵黄磷脂的含量、pH和灭菌是否彻底等都会影响水解圈的大小无菌技术【P309】021.目的：获得

。2.关键：

。3.常用方法：①

：对操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②

：将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；防止杂菌污染纯净的微生物培养物消毒灭菌无菌技术·消毒02项目主要方法应用范围

消毒法①

℃消毒30min；②

℃处理15s；③

℃处理10～15s；牛奶、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体

消毒法100℃煮沸

min；家庭餐具等生活用品

消毒紫外灯照射

min；适量喷洒

或

可加强效果；接种室、接种箱或超净工作台

消毒用体积分数为

；擦拭实验者双手

水源1.概念：指使用较为

的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部

微生物。2.常用方法：温和一部分巴氏63-6572-7680-85煮沸5-6紫外线30化学药物70%的酒精氯气扩展：生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。苯酚煤酚皂无菌技术·消毒02牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是什么？思考提示：在达到

目的的同时，

损失较少。消毒用的酒精是不是浓度越高越好？思考提示：不是，若酒精浓度过高，菌体表面

过快而凝固成一层保护膜，酒精不能渗入其中；但若酒精浓度过低，

。杀菌能力减弱消毒营养物质蛋白质变性无菌技术·灭菌021.概念：指使用

的理化方法杀死物体内外

的微生物，包括

和

。强烈所有芽孢孢子芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。孢子：细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞，能直接发育成新个体。注：芽孢和孢子具有高度的耐热性，可抗化学药物和抗辐射。无菌技术·灭菌022.常用方法：项目主要方法应用范围

灭菌直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧微生物的接种工具、接种时用的试管口或瓶口等。

灭菌干热灭菌箱中，160～170℃加热2～3h耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等。

灭菌高压蒸汽灭菌效果最好：高压蒸汽灭菌锅内，100kPa，温度121℃,15～30min培养基、培养皿、无菌水等，生产和实验室常用。灼烧干热湿热无菌技术·小结02类型理化因素作用强度消灭微生物数量芽孢和孢子能否被消灭消毒灭菌

1.比较消毒和灭菌对微生物作用效果的差异：较为温和强烈部分微生物全部微生物一般不能能2.无菌操作过程中，应注意：①避免已经灭菌处理的材料用具与

.相接触。②实验操作应在

上并在

.火焰附近进行。周围物品超净工作台酒精灯无菌技术·小结02无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？思考无菌技术还能有效避免污染环境以及操作者自身被微生物感染。注意：①实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，

以防止被微生物感染。②使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。微生物的纯培养【P310】03接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。由单一个体繁殖所获得的微生物群体。获得纯培养物的过程。培养物纯培养物纯培养注：分散的微生物在适宜的

表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有

的子细胞群体叫作菌落。【扩展】鉴定菌种的重要依据：菌落的大小、形状、颜色等。固体培养基一定形态结构微生物的纯培养【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践一、实验原理：采用

法和

法将单个微生物分散在

培养基上，之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的

。平板划线稀释涂布平板固体纯培养物即分离纯化稀释涂布平板法：一系列的梯度稀释、涂布固体培养基(平板)；平板划线法:接种环在固体培养基(平板)表面连续划线；微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践二、方法步骤：1.制备培养基：①

→②

→③

。配置培养基灭菌倒平板①配置培养基：称取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、

，用蒸馏水定容至1000ml。→根据物理性质划分：

培养基。固体15～20琼脂微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践②灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min。将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h。→培养基灭菌：

；→培养皿灭菌：

；湿热灭菌法干热灭菌法注：调节pH应在定容完成之后，灭菌之前进行操作。微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践③倒平板：a.温度：

左右；b.操作：在

附近。(1)拔出锥形瓶的棉塞。(2)将瓶口迅速通过火焰。(3)用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基(10~20mL)倒入培养皿，立即盖上皿盖。(4)等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。→目的：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基;→注：不能完全打开皿盖，避免杂菌污染培养基;→目的：防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染；避免培养基的水分过快的挥发。50℃酒精灯火焰→倒平板过程用到的灭菌方法是：

；灼烧灭菌法视频：倒平板03分离纯化方法：平板划线法微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践2.接种和分离酵母菌：通过

在固体培养基（平板）表面

的操作，将聚集的菌种逐步

到培养基表面。经数次划线后培养，可以分离得到由单个微生物繁殖而形成的

。连续划线法分区划线法接种环连续划线稀释分散单菌落微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践具体操作：(1)将接种环放在火焰上

，直到接种环的金属丝烧红；(2)在

冷却接种环。同时，拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞；(4)在火焰附近用接种环蘸取一环菌液；(3)试管口通过

；火焰旁→防止接种环温度过高杀死菌种;火焰→注：仅蘸取一次；灼烧微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践具体操作：(6)在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划3-5条

，盖上皿盖；(5)将试管口通过火焰，并塞上

；(7)灼烧接种环，待其冷却后，从

划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。棉塞→注：不要划破培养基；→注：不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。→接种过程用到的灭菌方法是：

；灼烧灭菌法平行线第一次微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践为什么最后一次的划线与第一次的划线不能相连？思考12345图中共划了5个区域，在每次划线前后均需要对接种环灼烧灭菌，因此共需要灼烧接种环多少次？思考最后一次的划线已经将微生物稀释成单个的细胞，如果与第一次的划线相连则增加了微生物的数目，得不到纯化的效果。6次。灼烧时期目的取菌种前避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。每次划线前杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线的菌种均来自

，从而使每次划线时菌种数目逐渐

，直至得到

；接种结束后杀死接种环上残留的菌种，避免微生物

；微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践第1区划线接种环灭菌（灼烧）第2区划线接种环灭菌（灼烧）接种环灭菌（灼烧）第5区划线接种环灭菌（灼烧）污染环境和感染操作者【核心归纳】不同时期灼烧接种环的目的：上次划线的末端减少单个细胞视频：接种和分离（平板划线法）03微生物的纯培养·平板划线法【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践3.培养酵母菌：完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将

的平板和一个

的平板倒置，放入

℃左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的

中培养24-48h。接种后未接种28恒温培养箱设置未接种平板组的意义是什么？思考对照组，通过观察未接种平板是否有菌落存在以确定培养基

或

。是否被污染灭菌是否彻底三、实验结果与分析：1.在未接种的培养基表面是否有

生长；

注：若有菌落生长，则说明

。2.在接种酵母菌的培养基上，是否有单菌落。

这些单菌落的

、

和

是否一致，

注：酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。3.若在培养基中观察到不同形态的菌落，

原因可能是

。微生物的纯培养【P310】03酵母菌的纯培养探究·实践菌液不纯，混入其他杂菌，或在实验操作过程中被杂菌污染颜色培养基被污染，应该重新制备菌落形态大小结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维【P311】1.（2024·湖南卷）微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（）A.①②⑤⑥B.③④⑥⑦C.①②⑦⑧

D.①③④⑤D03②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧中平板应倒置培养结合培养基的配制和无菌技术，考查科学思维【P311】2.分散的微生物在适宜的固体培养基表面繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，称为菌落。由单个微生物在固体培养基表面繁殖形成的单菌落就是纯培养物，获取纯培养物的常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的说法，错误的是（）A.这两种方法的关键都是要防止杂菌污染以保证获得培养物的纯度B.这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C.接种环和涂布器均需要在火焰上灼烧，且涂布器灼烧前需用酒精引燃D.用稀释涂布平板法统计菌落数目时，所获得的数据往往比实际值大D03获得纯培养物的关键是防止杂菌污染，√；为验证培养基是否被污染及灭菌是否彻底，题述两种方法均需，√；接种过程中使用灼烧灭菌法，√；稀释涂布平板法进行微生物的计数时，所获得的数据往往比实际值小，×；考向

围绕微生物的纯培养，考查科学探究【P311】3.（2020·江苏卷）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（）A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色B03倒平板后无需间歇晃动，×；Ⅲ区的细菌数量较少，可从Ⅲ区挑取单菌落，√；Ⅲ区中存在单菌落，该实验结果能达到菌种纯化的目的，×；菌落周围的纤维素被降解后，会形成透明圈，×；考向

围绕微生物的纯培养，考查科学探究【P311】4.如图为实验室中酵母菌纯培养过程的部分操作步骤，下列说法正确的是（）C03A.微生物的纯培养物就是指不含代谢废物的微生物培养物B.步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至室温后开始倒平板C.步骤①使用的培养基制备过程是先调pH再灭菌D.③到④过程中，每次划线后都需要灼烧接种环并蘸取菌液由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，×；步骤①中，用手触摸估计培养基冷却至50℃左右时，开始倒平板，×；调pH的酸碱溶液中也可能存在杂菌，故需要先调pH，再灭菌，√；只需要在第一次划线前蘸取菌液，后面均不需要，×；微生物的数量测定·①显微镜直接计数法【P312】041.原理：利用特定的

板或

板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。2.特点：

，能观察微生物的形态特征。3.缺点：不能区分死菌与活菌而使计数结果偏

。细菌计数血细胞计数大【相关信息】细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。①血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。②细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。有什么方法可以帮助我们通过显微镜直接计数法统计活菌？思考加入台盼蓝染液(活菌-无色)；快速、直观微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】041.原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个

，来源于样品稀释液中的一个

。注：通过统计平板上的

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。活菌菌落数2.计数原则：①为了保证结果准确，一般选择菌落数为

的平板进行计数②在同一稀释度下，应至少对

个平板进行重复计数，然后求出

。30～3003平均值→重复实验的目的：减小实验误差，增强实验的说服力和准确性。107108√单菌落微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04通过稀释涂布平板法统计的菌落的数目就是活菌实际数目吗？是否存在误差？思考提示：统计的菌落数往往比活菌的实际数目

。原因：

.

。低两个或多个细胞连在一起，平板上观察到的只是一个菌落注：统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】043.方法步骤：(1)系列稀释操作①取1mL上清液加入盛有9mL

的试管中，依次

稀释。无菌水等比【表述】①稀释

倍的稀释液；②稀释

的稀释液；10n10-n微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】043.方法步骤：(2)涂布平板操作①取菌液：取

mL菌液，滴加到

。②涂布器消毒：将涂布器放在盛有

的烧杯中。③涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待

、涂布器

后，再进行涂布。④涂布平板：用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使

。微量移液器0.1培养基表面酒精酒精燃尽冷却涂布均匀微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】043.方法步骤：(3)培养待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板

，放入30～37℃的

.

中培养1～2d。在涂布有合适浓度菌液的培养基上就可以观察到分离的单菌落。恒温培养箱倒置恒温培养箱视频·稀释涂布平板法04微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】044.结果分析：取10g土样，求每克土壤中的活菌数。【思考】4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为

个。每克样品中的菌株数=某稀释度下平板上生长的平均菌落数涂布平板时所用的稀释液的体积×稀释倍数1.1×108101倍102倍103倍104倍105倍平均数：110个微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践1.实验原理：①土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成

。②配制以

为唯一氮源的选择培养基，能够在该培养基中生长的细菌就是能分解尿素的细菌。组分含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0gH2O定容至1000mL脲酶尿素微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践2.实验流程：①土壤取样：从酸碱度接近

且潮湿的土壤中取样。先铲去

，

在距地表约

的土壤层。②样品稀释：选用一定稀释范围的稀释液进行平板培养，

保证获得菌落数在

的平板进行计数。③培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养

和培养

。④观察：每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。⑤计算：计算单位体积中的菌落数。中性3～8cm表层土30～300温度时间微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践3.实验结果分析与评价：未接种以尿素为唯一氮源的选择培养基牛肉膏蛋白胨培养基1×1041×1051×106牛肉膏蛋白胨培养基中的菌落数大于选择培养基中的菌落数，说明

.

；该选择培养基有筛选作用未接种的培养基上无菌落的生长，说明：

；

；培养基没有被杂菌污染微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践【思考】甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果

(填“可靠”或“不可靠”)。若不可靠，应如何改进？

。(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理

(填“合理”或“不合理”)。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应.

。不可靠没有重复实验（至少涂布3个平板，统计结果后计算平均值）不合理分析实验过程中可能的影响因素，从操作是否规范、培养基配制是否合理等方面查找原因微生物的数量测定·②稀释涂布平板法【P312】04土壤中分解尿素的细菌的分离与计数探究·实践利用尿素作为唯一氮源的培养基分离出的微生物都是能分解尿素的微生物吗？并说明理由。思考不一定；因为有些微生物可以利用能分解尿素的细菌的代谢物进行生长繁殖。【拓展应用】04依据以上资料，思考如何对分离得到的微生物是否是分解尿素的细菌作进一步鉴定？思考【资料1】细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。【资料2】酸碱指示剂酚酞变色反应区段：8.2-10.0，无色→红色；酚红变色反应区段：6.8-8.0，黄色→红色；提示：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入

，

若菌落周围出现

，则可说明该菌种能够分解尿素。酚红指示剂(更灵敏)红色环带补充：红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越

。强考向

围绕微生物的分离与计数，考查科学探究【P313】3.养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是（）C04考