高效液相色谱仪器维护和保养

1、高效液相色谱仪的维护和溶剂过滤头的清洗。取下过滤头，将其放入装有硝酸溶液(1:4，体积/体积)的烧杯中，超声清洗15分钟；2.取出后，用蒸馏水超声清洗10分钟；3.用吸球吹出过滤头中的液体；4.用蒸馏水超声清洗10分钟；5.用吸球吹掉过滤头中的水；6.将过滤头重新插入溶剂瓶(注意在正常相系统中干燥过滤头)、过程、何时使用在线脱气器以及脱气器的操作。标准脱气器每个通道的容积为12毫升。建议以5毫升/分钟的速度排出液体6分钟以上。微脱气器各通道容积为1毫升，建议以2毫升/分钟的速度排液5分钟。千万不要用5毫升/分钟来排出液体。注意当使用在线脱气器时，棕色溶剂玻璃瓶将避免藻类生长。务必过滤溶剂，防止

2、其中的颗粒永久堵塞毛细管。避免使用下列可能腐蚀钢材的溶剂：碱金属卤化物及其酸性溶液(如碘化锂、氯化钾等)。)。高浓度无机酸，如硝酸和硫酸。可能含有过氧化物的色谱纯醚(如THF醚、二恶烷和二丙醚)。使用前必须用干氧化铝过滤以除去过氧化物。含有强络合剂(如乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸)的溶液。四氯化碳和2-异丙醇或四氢呋喃的混合溶液。防止溶剂或溶剂瓶内的藻类生长堵塞溶剂过滤器的污染将缩短溶剂过滤器的使用寿命并影响泵的运行。在水性溶剂或磷酸盐缓冲液(pH4至7)中尤其如此。以下建议将延长溶剂过滤器的使用寿命，并保持泵运行。使用无菌溶剂瓶减缓藻类生长。建议使用新制备的流动相，尤其是水溶剂或盐缓冲液，时间

3、不超过两天。如果应用允许，在溶剂中加入0.00010.001M叠氮化钠。避免将溶剂瓶暴露在阳光直射下。用氩气替换流动相中的空气。在线除气器的日常维护和故障诊断，在线除气器的日常维护和故障诊断，检查溶剂过滤器是否拧开除气器的出口或比例阀的入口管道，并使液位高于出口30cm。此时，溶剂将由于重力而流出。当脱气器或溶剂过滤头堵塞时，溶剂将不会顺利流出。检查过滤器是否变色，暂时取下过滤器，检查色谱柱前的压力是否正常，清洗溶剂过滤器，从瓶头组件上取下堵塞的溶剂过滤器。用水冲洗残留溶剂，然后将过滤器浸泡在含有浓硝酸(35)的烧杯中一小时。用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不要使用超声波清洗机进行清洗。重新安

4、装过滤器。建议定期清洗溶剂过滤器和溶剂瓶，至少每三个月清洗一次。注意：不要使用没有溶剂过滤器的系统，这可能会严重堵塞系统。在线除气器的日常维护。1.如何简单判断脱气器脱气是否正常？2.如何简单判断脱气腔或溶剂过滤头是否堵塞？在线除气器的日常维护，问题？1.如何简单判断脱气器脱气是否正常？打开清洗阀，将泵的流量设定为2毫升/分钟，短时间提升当前使用的溶剂瓶中的溶剂过滤头，此时，溶剂输送管中会产生一个短气泡。放下过滤头，让气泡通过除气器。如果除气器正常，气泡应该消失或收缩。2.如何简单判断脱气腔或溶剂过滤头是否堵塞？关闭泵，旋下脱气器出口管或比例阀入口管。此时，溶剂将由于重力而流出。当脱气器或溶剂

5、过滤头堵塞时，溶剂将不会顺利流出。安捷伦1100泵头结构图，带密封清洗的泵头结构图，如何更换溶剂出口过滤器，安捷伦四元二元/单元泵的日常维护，严重污染的溶剂出口过滤器，安捷伦四元二元/单元泵的日常维护，如何更换活塞杆密封圈，安捷伦qu的日常维护但是在梯度阀的混合点，重力会导致盐粒沉淀。通常，阀门的A通道用于水相/盐溶液，而泵的B通道用于有机溶剂。如果使用这种配置，盐将会回落到盐溶液中并被溶解。当泵在不同的配置中使用时(例如，D-盐溶液、A-有机溶剂)，盐可能会落入有机溶剂中，从而导致问题。当在Agilent 1100四元泵中使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液连接到下部端口，将有机溶剂连接到上

6、部梯度端口。优选地，有机溶剂通道在盐溶液通道的正上方。建议定期用水清洗所有MCGV管道，以清除阀门端口上可能的盐沉积物。定期维护四元二元/单元泵，并更好地使用四元泵将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上(或更高)。在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液连接到底部的梯度阀口，将有机溶剂连接到顶部的梯度阀口。有机通道优选在盐溶液通道上方。建议定期用水清洗所有MCGV水道，以去除可能在阀口沉淀的盐晶体。在操作泵之前，用至少两个容积冲洗真空脱气器(标准脱气器为30毫升，微型脱气器为10毫升)，特别是当泵关闭一段时间(例如，一夜)且通道中使用挥发性混合溶剂时。防止溶剂过滤器堵塞和滋生细菌。当过滤器表面有黑

7、色或黄色污染层时，表示过滤器堵塞。请立即清洗或更换。定期检查排水阀的滤芯。检查方法：拧开排水阀，以水为流动相，流速为5毫升/分钟，压力大于10巴时立即更换。四元二元/单元泵的日常维护、泵的使用说明、泵的更好使用当使用低流量(不高于0.2毫升/分钟)时，检查所有1/16英寸接头是否泄漏(通过压力测试或泄漏测试)。每当更换泵垫圈时，应更换排水阀的滤芯。更换活塞垫圈时，检查活塞杆上是否有划痕。刮伤的活塞会导致轻微泄漏，并降低垫片的使用寿命。刮伤的活塞应尽快更换。当使用缓冲溶液时，在关闭泵之前用水冲洗系统。当需要长时间使用浓度为0.1摩尔或更高的缓冲溶液时，最好使用垫片清洗附件，以减少垫片和活塞杆的磨

8、损。更换活塞垫片后，应按照垫片安装程序进行磨合，但磨合不适用于正相垫片。泵的使用，当泵头装有冲洗附件时，因为附件也有垫圈，这将增加活塞杆运动的阻力。因此，在启动泵之前，使用10异丙醇，并将其流速调节至约20滴/分钟，以使溶液流过冲洗装置。异丙醇有助于降低水的表面张力，并具有抗菌作用。不要使用其他溶剂。当泵头配有不带开口10异丙醇的冲洗附件时，垫圈和活塞杆的寿命将会缩短。泵的使用、垫片磨合运转：1。使用异丙醇作为溶剂，将其管道直接连接到主动阀。2.将阻尼管连接到排水阀的出口，并将阻尼管的另一端放入废液瓶。3.打开排水阀，用异丙醇以2毫升/分钟的流速冲洗系统10分钟。4.关闭排水阀，设定流量使压力

9、达到350巴，并保持系统在此压力下15分钟。5.关闭泵，慢慢打开排水阀释放压力，重新连接管道，然后冲洗系统中的异丙醇。请注意，该操作仅适用于反相垫片，而正相垫片只能承受200巴的压力，因此该操作会损坏垫片。5重新连接色谱柱，并设置合适的流速。当流动相流出色谱柱体积的约30倍且检测器基线平衡后，更换流动相，并更换可混溶的流动相。1.将新的流动相放入储液瓶中，2。打开排气阀，启动泵，使新的流动相从入口阀3的出口流出约20毫升。关闭排气阀，然后拆下进样阀和色谱柱之间的连接端，用小容器将其放在进样阀的出口处。4启动恒流泵，让流动相从进样阀出口流出约10毫升，用缓冲液替换流动相，1用水替换色谱系统中的缓

10、冲液，2用含量在10%范围内的溶剂清洗色谱柱中的盐，3用新的流动相替换水或清洗色谱柱溶剂，流程图，检测器使用和日常维护的注意事项，使用可变波长紫外检测器的注意事项。如果流动池被污染，可以通过以下方法处理。不连接色谱柱，用高纯水冲洗20分钟，然后用5硝酸冲洗2小时，最后用高纯水冲洗至流出液呈中性。如果上述方法失败，有必要更换流动池的检测窗口。上述处理方法也适用于流动池。检测器的注意事项和日常维护、荧光检测器的注意事项和日常维护。由于流动相在流动池中停留时间较长，藻类会生长，藻类会产生荧光，因此可以加入有机溶剂，如乙腈或甲醇。如果怀疑流动池被污染，可通过以下步骤进行清洁：1 .用双蒸水冲洗30分钟

11、以上；2.用注射器向流动池中注入65%硝酸，并在流动池中放置约1小时。(注意，为了防止过压，请慢慢注入。3)用双蒸水冲洗。高效液相色谱日常维护总结，定期清洗溶剂过滤头(将其浸泡在35%浓硝酸中1小时，不要使用超声波清洗)，并通过0.45um或更小孔径的过滤器过滤。如果使用过滤膜，请注意有机膜和水膜的区别(聚四氟乙烯可用于所有溶剂)。根据情况更换清洗阀中的在线过滤器头(清洗阀打开，纯水为5毫升/分钟，如果压力超过10巴，请更换。)注意清洗在线除气器和比例阀，特别是长时间使用水相或缓冲盐的通道。用纯水冲洗，然后用甲醇冲洗。您可以打开净化阀，使用5毫升/分钟的流速。当污染严重时，可以用异丙醇清洗。一

12、般过程，如a:缓冲液b:meoh c:水d:ch3cn分析：A:B:D=20:30:50清洗：C 100% 30分钟，B 100% 30分钟，如果安装了密封清洗组件，在启动泵之前，是否使用缓冲盐。当在正相色谱和反相色谱之间切换时，应使用IPA转换，并且正相应使用很长时间。最好在取样前过滤样品。如果样本量太小，可以适当升高注射针的位置。当流动相ph值大于9.5或小于2.3时，应使用tefzel转子密封圈更换进样阀。注意不同检测器流动池的耐压性，尽量避免使用pH9.5的流动相。为防止流动池的应时窗腐蚀，避免使用可能结晶的流动相，并防止流动池堵塞vwd 40 bardad 120 barwd 120

13、 barFLD 20 barrid5 brrid，fld将始终是最后一个注意不同制造商接头问题的检测器，以防止色谱柱和接头的泄漏或损坏，日常维护HPLC，HPLC的常见色谱柱接头，0.130英寸。、0.090英寸。0.170英寸。世伟洛克、沃特斯、帕克、Rheodyne、瓦尔科、紧张、0.01首先拧开排水阀，使用纯水作为流动相，并将流速设置为5ml/min。如果压力超过10巴，首先更换排水阀的滤芯。2如果排水阀的滤芯没有堵塞，取下色谱柱，然后用一个或两个端口更换色谱柱，以1毫升/分钟的流速用水作为流动相。通常，压力不会超过20巴，否则系统可能会堵塞。3如果上述压力超过20巴，我们可以遵循从后向

14、前的原则，也就是说，首先将连接管接头移至流通池中。泵启动后，如果压力正常，流动池被堵塞。如果仍然不正常，也可以将该管道的另一端拆除。泵启动后，观察压力。同样，我们可以找到堵塞物。易堵塞的地方：流通池的进水管；自动取样器的针和针座；柱温箱，高效液相色谱故障诊断，系统压力过低，不稳定或无流量。首先，拧开排水阀，设定流速为12毫升/分钟，然后启动泵，观察是否有液体流动。如果有，仔细观察液体流动是否有反吸现象。如果用量筒测量流量的准确度不确定。如果上面没有液体流动，或者流速不允许，大多数都是主动阀芯或主动阀故障，或者泵有严重的液体泄漏。如何粗略判断主动阀或其阀芯的故障？可采用以下方法：泵运行时，用手指

15、轻轻捏活动体，正常活动阀能感觉到节律性搏动；如果没有，则主动阀有问题。如果是，可以取出主动阀的阀芯进行超声波清洗；如果仍然有问题，可以更换阀芯。小心不要将整个主动阀置于超声波清洗中，否则会损坏主动阀。如果上述流量准确，但拧紧排水阀后压力不稳定，请仔细检查是否有泄漏。(通常，泄漏处：每个接口包括色谱柱、泵、进样阀等。)。高效液相色谱故障诊断，保留时间不稳定。首先，观察停留时间是否有规律地变化，同时观察压力是否稳定。如果压力稳定，保留时间有规律地变化，大多数色谱柱就不能很好地平衡，尤其是含有盐的流动相，需要很长时间才能平衡。如果压力稳定，停留时间变化不规律，请检查溶剂过滤头和真空室是否堵塞。重新平衡色谱柱足够长的时间。如果仍然不好，请用另一个色谱柱更换。如果压力不稳定，请检查导致压力不稳定的因素，如泄漏、排水时间不足、盐浓度过高导致盐析、主动阀比例阀内部泄漏等。高效液相色谱故障诊断，峰面积重现性不好。首先，观察压力是否稳定，峰面积是否有规律地变化。如果压力不稳定，请检查导致压力不稳定的因素，如泄漏、排水时间不足、盐