（临床兽医学专业论文）犬用伊曲康唑凝胶剂的研制.pdf

hq，q j | | i i iiiil uli iiiiii iu i y 17 8 7 13 1 目录 目录 中文摘要i 英文摘要i i l 前言1 1 1 皮肤真菌病概述。l 1 1 1 致病性真菌1 1 1 2 致病机理3 1 1 3 临床症状及流行特点3 1 2 抗真菌药物4 1 3 伊曲康唑5 1 3 1 伊曲康唑简介5 1 3 2 伊曲康唑剂型研究进展6 1 3 3 环糊精包合技术在伊曲康唑制剂中的应用6 1 3 4 伊曲康唑凝胶剂研制的意义7 1 4 实验研究目的和意义8 2 材料与方法9 2 1 实验材料9 2 1 1 主要实验器材9 2 1 2 药品及试剂9 2 1 3 试验用试剂配制1 0 2 1 4 实验动物1o 2 2 实验方法1 1 2 2 1 高效液相色谱测定伊曲康唑含量的分析方法建立1 l 2 2 2 伊曲康唑包合物溶液的制备1 3 2 2 3 犬用伊曲康唑凝胶的制备1 6 2 2 4 犬用伊曲康唑凝胶剂的体外皮肤渗透性及离体皮肤中伊曲康唑滞留量的研究2 0 2 2 5 犬用伊曲康唑凝胶剂的皮肤毒理实验研究2 2 2 2 6 犬用伊曲康唑凝胶剂的临床疗效研究2 3 3 实验结果2 5 3 1 高效液相色谱测定伊曲康唑含量的方法建立2 5 3 1 1 检测波长的选择2 5 3 1 2 高效液相色谱图及标准曲线2 6 3 1 3 方法专属性考察2 7 3 1 4 回收率考察结果2 8 3 1 5 精密度实验结果2 8 3 1 5 最小检测限( l o d ) 2 9 3 1 6 伊曲康唑甲醇溶液高温、低温及强光照射稳定性试验结果2 9 3 2 伊曲康唑包合物溶液的制备2 9 3 2 1 伊曲康唑溶解度及油，水分配系数结果2 9 东北农业大学农学硕上学位论文 3 2 2 溶解一定量伊曲康唑时盐酸的用量选择3 0 3 2 3 包合物溶液制备工艺最优条件3 0 3 2 4 包合物鉴定结果31 3 3 犬用伊曲康唑凝胶剂的制备3 2 3 3 1 犬用伊曲康唑凝胶剂处方单因素实验结果3 2 3 3 2 凝胶剂体外的释放试验标准曲线绘制3 3 3 3 3 伊曲康唑凝胶剂的处方筛选3 3 3 3 4 伊曲康唑凝胶剂质量考察结果3 5 3 3 5 伊曲康唑凝胶剂稳定性实验结果。3 5 3 4 体外皮肤渗透性及离体皮肤中伊曲康唑滞留量的实验结果3 6 3 4 1 体外经皮渗透测定方法专属性结果3 6 3 4 2 体外经皮渗透测定方法的标准曲线结果3 7 3 4 3 体外经皮渗透测定方法精密度试验结果3 8 3 4 4 体外经皮渗透测定方法回收率实验结果3 9 3 4 5 伊曲康唑凝胶剂体外经皮渗透试验累积释药量结果3 9 3 4 6 伊曲康唑凝胶剂离体皮肤滞留量的测定方法专属性考察结果3 9 3 4 7 伊曲康唑凝胶剂离体皮肤滞留量标准曲线的绘制4 0 3 4 8 伊曲康唑凝胶剂离体皮肤滞留量方法精密度实验结果4 l 3 4 9 伊曲康唑凝胶剂离体皮肤滞留量方法回收率实验4 l 3 4 1 0 伊曲康唑凝胶剂离体皮肤药物累积滞留量结果4 2 3 5 犬用伊曲康唑凝胶剂的皮肤毒理实验研究4 2 3 5 1 大鼠皮肤急性毒性试验结果4 2 3 5 2 家兔皮肤刺激试验结果4 3 3 5 3 豚鼠皮肤致敏试验4 4 3 6 犬用伊曲康唑凝胶剂的临床疗效结果4 5 4 讨论4 9 4 1 伊曲康唑含量的检测方法分析4 9 4 2 关于伊曲康唑包合物4 9 4 3 犬用伊曲康唑凝胶处方5 0 4 3 1 单因素对犬用伊曲康唑凝胶的制备的影响5 0 4 3 2 伊曲康唑凝胶剂的处方优化5 l 4 4 伊曲康唑凝胶剂体外经皮渗透性的探讨。5 2 4 5 犬用伊曲康唑凝胶剂的使用安全性初步分析5 2 4 6 犬用伊曲康唑凝胶剂临床疗效的观察5 3 5 结论5 4 致 射5 5 参考文献。5 6 攻读学位期间发表的学术论文。6 l 警 r 一 月 c o n t e n t s c o n t e n t s c h i n e s ea b s t r a c t 1 e n g l i s ha b s t r a c t i i 1i n t r o d u c t i o n 1 1 1t h es u m m a r yo fd e r m a t o m y c o s i s 一l 1 1 1p a t h o g e n i cf u n g u s 1 1 1 2p a t h o g e n e s i s 3 1 1 3c l i n i c a ls y m p t o ma n de p i d e m i o l o g i c a lc h a r a c t e r i s t i c s 3 1 2a n t i m y c o t i cd r u g 4 1 3i t r a c o n a z o l e 5 1 3 1t h es u m m a r yo fi 仃a c o n a z o l e 5 1 - 3 2t h er e s e a r c ho fi t r a e o n a z o l ed o s a g ef o r m 6 1 3 3t h et e c h n o l o g yo fu s i n gc y c l o d e x t r i nc l a t h r a t i o no nl t r a e o n a z o l ep r a e p a r a t u m 6 1 3 4t h es i g n i f i c a n c eo fs t u d i e sa n dp r e p a r a t i o no nl t r a e o n a z o l eg e l s 7 1 4o b j e c t i v ea n ds i g n i f i c a n c e 8 2m a t e r i a l sa n dm e t h o d s 9 2 1m a t e r i a l s 9 2 1 1e x p e r i m e n t a li n s t r u m e n t s 9 2 1 2e x p e r i m e n t a la g e n t 9 2 1 3e x p e r i m e n t a la g e n tp r e p a r a t i o n 1 0 2 1 4e x p e r i m e n t a la n i m a l s 1 ( 1 2 2e x p e r i m e n tm e t h o d ll 2 2 1e s t a b l i s ht h em e t h o dw i t hh p l cf o ra n a l y s i si t r a c o n a z o l ec o n t e n t 1 l 2 2 2p r e p a r e di t r a c o n a z o l ei n c l u s i o nc o m p l e xs o l u t i o n 13 2 2 3p r e p a r e di t r a c o n a z o l eg e l s 1 6 2 2 4t h es t u d yo fi nv i t r op e r c u t a n e o u sp e n e t r a t i o nr a ts k i na n da c c u m u l a t i v ea m o u n t si ns k i n w i t hi t r a c o n a z o l eg e l s 。2 0 2 2 5e x p e r i m e n t a ls t u d yo nd e r m a t o t o x i c o l o g yo t t h ei t r a c o n a z o l eg e l s 2 2 2 2 6c l i n i c a lc u r a t i v ee f f e c t 2 3 3r e s u l t s ：! ! ； 3 1e s t a b l i s ht h em e t h o dw i t hh p l cf o ra n a l y s i si t r a c o n a z o l ec o n t e n t 。2 5 3 1 1d e t e c t i o nw a v e l e n g t h ：! ! ； 3 1 2h p l cf i g u r ea n ds t a n d a r dc u r v e 2 6 3 1 3m e t h o ds p e c i f i c i t ys t u d y ：1 7 ：；1 4r e s t u l t so f r e c o v e r yt e s t ：! ； 3 1 5r e s t u l t so f p r e c i s i o nt e s t ：1 8 3 1 5l o d 2 9 3 1 6t h er e s u l t so fs t a b i l i t yt e s tf o ri t r a c o n a z o l em e t h a n o la l c o h o l i cs o l u t i o n 2 9 ：；2p r e p a r e di t r a c o n a z o l ei n c l u s i o nc o m p l e xs o l u t i o n 2 9 r ， 4 1t h ea n a l y s i so r e s t a b l i s ht h em e t h o dw i t hh p l cf o ra n a l y s i si t r a c o n a z o l ec o n t e n t 4 9 4 2p r e p a r e dl t r a c o n a z o l ei n c l u s i o nc o m p l e xs o l u t i o n 4 9 4 3p r e p a r e di t r a c o n a z o l eg e lw h i c hi s1 1 5 0f o rc a n i s 一5 0 4 3 1s t u d yo nl t r a c o n a z o l eg e l sp r e s c r i p t i o no fs i n g l ef a c t o r 5 0 4 3 2o r t h o g o n a lt e s tf o rs e l e c t e dl t r a c o n a z o l eg e l sp r e s c r i p t i o n ：。5l 4 4s t u d yo fi nv i t r op e r c u t a n e o u sp e n e t r a t i o na n da c c u m u l a t i v ea m o u n t e d 5 2 4 5s t u d yo fe x p e r i m e n t a ls t u d yo nd e r m a t o t o x i c o l o g yo f t h ei t r a c o n a z o l eg e l s 5 2 4 6c l i n i c a lc u r a t i v ee f f e c t i o nw i t hl t r a c o n a z o l eg e l s 5 3 5c o n c l u s i o n s 5 4 a c k n o w l e g m e n t 5 5 r e f e r e n c e s 5 6 p u b l i s h e da r t i c l ed u r i n gs p e c i a l i z i n gt h ed e g r e eo fm a s t e r 5 6 譬 一： -，o赋，； 研究生学位论文独创声明和使用授权书 独创声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得 ( 洼! 翅遗直甚丝盖噩挂别重盟的：奎拦亘窒2 或其他教育机构的学位或证 书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作 了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名。 拜 日期：yt 戽6 月舌日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。 本人授权学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。( 保密的学位论文在解 密后适用本授权书) 学位论文作者签名： 髂哦 日期：7 p f 侔臼多日 导师 签名：o 、- 。1 岛日期：么卯9 年名日 1 i ，r 摘要 摘要 犬皮肤真菌病为一种兽医临床常见多发疾病，该病不仅侵袭犬，同时也危害着人类的健 康。现在对于犬皮肤真菌病的治疗，临床上可选的药物有限，并且在治疗过程中，存在用药 量大，毒副作用明显等缺点。本实验尝试将广谱抗真菌药伊曲康唑设计为外用剂型，旨在降 低给药剂量，减少毒副作用，并有针对性的治疗真菌性皮肤感病。 本实验建立高效液相色谱法( h p l c ) 测定伊曲康唑的含量，该方法在给出特定浓度范 围内线性关系良好、回收率及精密度的相对标准偏差( r s d ) 均小于2 符合要求，最小检 测限量( l o d ) 为o 0 1l ag m l ，方法灵敏度较高符合检测要求。对伊曲康唑稳定性进行评定， 结果表明其对光不稳定，需避光保存，对高温及低温稳定。 应用h p l c 法测定伊曲康唑以正辛醇为油相的油水分配系数，可知其极难溶于水，易溶 于脂类，采用羟丙基b 环糊精( h p b - c d ) 包合技术包合伊曲康唑。以包合率为指标，设 计4 因素3 水平正交试验，确定最优包合条件：伊曲康唑与h p b c d 用量比( 1 ：3 5 ) 、包 合温度( 4 0 ) 、包合时间( 2 4 h ) 、滴加时f 司( 2 0 m i n ) 。 通过单因素考察及以8 h 累计释药百分率为指标，设计3 因素3 水平的正交试验，优化 犬用伊曲康唑凝胶剂的处方：伊曲康唑1 5 ( 药物有效浓度) ，浓盐酸0 3 ，无水乙醇5 0 ， h p b c d5 2 5 ，卡波姆9 4 01 5 ，聚乙二醇4 0 0 ( p e g 4 0 0 ) 1 0 o ，尼泊金乙酯0 1 ， 蒸馏水适量，三乙醇胺适量调节p h 值至5 0 ，标示量1 5 0 m g g ；考察犬用伊曲康唑凝胶剂含 量及稳定性，结果表明胶体呈淡黄色，透明均匀，性状稳定，符合标准，对温度稳定，对光 不稳定需用避光包装。 实验采用改进的f r a n z 扩散池为药物渗透及释放装置，进行体外皮肤渗透性及离体皮肤 中伊曲康唑滞留量的研究，结果表明犬用伊曲康唑凝胶剂药物渗透效果良好，皮肤内药物含 量较高，利于治疗皮肤真菌病。 通过皮肤急性毒性试验、皮肤刺激性试验及皮肤致敏性试验进行皮肤毒理研究，以单剂 量给药的方法，将低、中、高三种浓度的伊曲康唑凝胶剂涂抹于大鼠完整皮肤及破损皮肤， 观察结果：大鼠皮肤无急性毒性反应；通过单剂量及多剂量给药方法，将伊曲康唑凝胶剂涂 抹于家兔完整皮肤及破损皮肤，家兔皮肤刺激反应平均分值小于0 5 ，属于无刺激药物；用 伊曲康唑凝胶剂、空白凝胶及阳性致敏物涂抹于豚鼠完整皮肤，犬用伊曲康唑凝胶对豚鼠皮 肤过敏反应分值为0 ，致敏率为0 ，具有弱致敏性，结果表明研制的犬用伊曲康唑凝胶剂无 刺激、无毒、弱致敏，用于治疗犬皮肤真菌病安全无毒。 临床疗效观察：治疗l o 只就诊于兽医院门诊患真菌性皮肤病的犬，分别在病犬患处涂 抹犬用伊曲康i 唑凝胶( 1 5 m g g ) ，厚度约为2 m m ，连续给药4 周后，进行实验室检查，结果 显示治疗组治愈率为9 0 ，表明犬用伊曲康唑凝胶剂治疗犬皮肤真菌病治愈率较高，初步证 明该制剂具有良好的临床应用效果。 关键词犬；真菌性皮肤病；伊曲康唑；凝胶剂 ， i p ， ，r 丝蓄鬻 k i a b s t r a c t d e b e l o p m e n to f t h ei t r a c o n a z o l eg e l sf o rc a n i n e d e r m a t o p h y t o s i s r a b s t r a c t c a n i n ed e r m a t o p h y t o s i si sac o m m o nd i s e a s et h a to c c h r sf r e q u e n t l yi nv e t e r i n a r yc l i n i c t h i s d i s e a s en o to n l ya t t a c k sd o g s ，b u ta l s oh a r m sh u m a nb e i n g sh e a l t h n o w a d a y sl i m i t e dd r u g sa r e a v a i l a b l ef o rt r e a t m e n tt h ec a n i n ed e r m a t o p h y t o s i si nv e t e r i n a r yc l i n i c a n dt h el a r g ed o s a g el e a d s t os i g n i f i c a n ts i d e - e f f e c t si nt h ec u r r e n tt r e a t m e n t i no r d e rt or e d u c et h ed o s ea n ds i d ee f f e c t si n t h i ss t u d y , t h eb r o a d - s p e c t r u ma n t i f u n g a li t r a c o n a z o l e ，w a sd e s i g n e da sa ng e ld o s a g ef o r mf o r t a r g e t e dt r e a t m e n to fc a n i n es u p e r f i c i a lf u n g a li n f e c t i o n s d e r m a t o p h y t o s i s i np h a r m a c e u t i c a lf o r m u l a t i o ns t u d i e s ，h i g hp e r f o r m a n c el i q u i d c h r o m a t o g r a p h ym e t h o d ( h p l c ) w a se s t a b l i s h e df o rt h ed e t e r m i n a t i o no fi t r a c o n a z o l eq u a n t i f i c a t i o n t h i sm e t h o dh a s g o o dl i n e a r i t yi nt h er a n g eo fas p e c i f i cc o n c e n t r a t i o n ，a n db o t ht h er e l a t i v es t a n d a r dd e v i a t i o n s ( r s d ) o fr e c o v e r ya n dp r e c i s i o nw o r el e s st h a n2 w h i c hc a l la c c o r dw i t ht h ed e m a n d s t h el i m i t o fd e t e c t i o n ( l o d ) i so o li lg m la n dt h es e n s i t i v i t y , i sg o o df o rr e q u i r e m e n t s s t a b i l i t yo f i t r a c o n a z o l ew a sa s s e s s e di nt h i ss t u d y t h er e s u l t ss h o wt h a ti ti ss e n s i t i v et os u n l i g h ta n ds h o u l d b ep r e s e r v e di nd a r ka n di ti ss t a b i l i t yi nh i 曲o rl o wt e m p e r a t u r e 。 u s i n gt h eh p l cm e t h o dt od e t e r m i n et h eo c t a n o v w a t e rc o e f f i c i e n to fi t r a e o n a z o l ew i t h n - o c t y la l c o h o l 部o i lp h a s e ，t h er e s u l t ss h o wi ti sh a r dt od i s s o l v ei nw a t e rb u te a s i l ys o l u b l ei n i i p i d s t or a i s et h es o l u b i l i t yo fi t r a c o n a z o l ei nw a t e r , i ti si n c l u d e di nh p - 1 3 一c d t h eo r t h o g o n a l e x p e r i m e n tw a sd e s i g n e dw i t ht h ei n c l u s i o nr a t ea si n v e s t i g a t i o ni n d e x t h eb e s tc o n d i t i o n so ft h e i n c l u s i o nw a sc o n f i r m e dw i t hr a t i oo ft h em a t e r i a l ( 3 5 ：1 ) ，t e m p e r a t u r e ( 4 0 。c ) ，u s i n gt i m e ( 2 4 h ) a n d d r i p p i n gt i m e ( 2 0 m i n ) 3f a c t o r sa n d3l e v e l so r t h o g o n a le x p e r i m e n tw a sd e s i g n e db ys i n g l e - f a c t o rm e t h o dw i t ht h e c u m u l a t i v er e l e a s ep e r c e n t a g ei n8 ha si n d e x t h eo p t i m i z a t i o np r e s c r i p t i o no fc a n i n eu s e i t r a c o n a z o l eg e l sw a sf o l l o w s ：i t r a c o n a z o l eo f1 5 ( d r u ge f f e c t i v ec o n c e n t r a t i o n ) ，c o n c e n t r a t e d h y d r o c h l o r i ca c i do f0 3 ，e t h a n o lo f5 o ，h p b - c do f5 2 5 ，c a r b o m e r 9 4 0o f1 5 ，10 0 o fp e g - 4 0 0 ，e t h y l p a r a b e no fo 1 ，a m o u n to fd i s t i l l e dw a t e r t r i e t h a n o l a m i n ea p p r o p r i a t e a d j u s t m e n t st ot h ep ho f5 0 ，t h el a b e l e da m o u n t15 0 m g | g t h i si t r a c o n a z o l eg e l so ft h eo p t i m a l f o r m u l a t i o na r ea m b e r , t r a n s p a r e n t ，h o m o g e n e o u sa n ds t a b l e t h eg e l sf i tt h er e g u l a t e do ng e l s r e q u i r e m e n t i nt h i st h e s i s ，t h et r a n s - d e r m a ld e l i v e r ya c r o s sr a ts k i no fi t r a c o n a z o l eg e l si ss t u d i e db yu s i n g h o r i z o n t a ld i f f u s i o nc e l l s t h er e s u l t ss h o wt h a tt h ep e r m e a b i l i t yi sg o o da n dt h er e t e n t i o ne f f e c t s a r eg r e a t i ti sa v a i l a b l et ot h et r e a t m e n to fd e r m a t o p h y t o s i s t h ee x p e r i m e n t sw e r ep e r f o r m e dt oe v a l u a t et h ed e r m a t o t o x i c o l o g yo fc a n i n e u s i n g i i r、 东北农业大学农学硕士学位论文 i t r a c o n a z o l eg e l s ，i n c l u d i n ga c u t et o x i c i t yt e s t ，s h i ns t i m u l u st e s ta n ds e n s i t i z a t i o nt e s t s p r e a da s i n g l ed o s eo fi t r a c o n a z o i eg e l sw i t ht h r e ec o n c e n t r a t i o n so nt h en o r m a lo rd a m a g e ds k i na n d o b s e r v et h ea c u t et o x i c i t yr e a c t i o no ft h es k i n r e s u l t s ：i n t r a c o n a z o l eg e lw a sn o n t o x i co nt h e w i s t a rr a ts k i na n dw a sn o n - s t i m u l a t i n go nt h er a b b i ts k i nw i t ht h ea v e r a g es c o r eo fi r r i t a n tr e a c t i o n i e s st h a n0 5 s e n s i t i z a t i o ne f f e c to nt h es k i no fg u i n e ap i gw a sn o tf o u n dw i t ht h es c o r eo f d e r m a t o 。a l l e r g i cr e a c t i o na n ds e n s i t i z a t i o nr a t ew e r e0 c o n c l u s i o n ：t h ei t r a c o n a z o l eg e l sw e r e n o n t o x i ea n ds a f ei nt r e a t i n gc a n i n ef u n g a ls k i nd i s e a s e c l i n i c a lc u r a t i v ee f f e c tt r i a lw a sd e s i g n e d ，10d o g sw h i c ha r ei n f e c t e dw i t h f u n g a l d e r m a t o p a t h y a p p l yi nt h ea f f e c t e da r e aw e r ed o g si t r a c o n a z o l eg e l s ( 15 m g g ) ，t h i c k n e s so fa b o u t 2 m m ，f o rc o n s e c u t i v e4w e e k s ，r e s u l t ss h o w e dt h a tt r e a t m e n tg r o u p ，t h ec u r er a t ew a s9 0 t h e r e c o v e r yr a t ei sh i g h e rw h e nu s i n gt h ei t r a c o n a z o l eg e l st oc u r ec a n i n ed e r m a t o t o x i c o l o g y a n dt h e i t r a c o n a z o l eg e l sh a v eag o o dc l i n i c a le f f e c t k e y w o r d sd o g ；f u n g a ls k i nd i s e a s e ；i t r a c o n a z o l e ；g e l s i l i c a n d i d a t e ：c h e nx i s p e c i a l i t y ：v e t e r i n a r yc l i n i cs t u d i e s s u p e r v i s o r ：p r o f l i uy u n 1 _ 前言 1 前言 犬真菌性皮肤病具有病程较长、治愈率低、病情易反复等特点，犬患病后不但感染其他 犬，还可以传染给人类。已对动物及人类生存的公共卫生环境造成了威胁，该病倍受广大兽 医临床工作者的重视。 真菌感染可以分为两大类：浅部真菌感染和深部真菌感染，其中深部真菌感染又称为系 统性真菌感染，危害较大，但较少见( 顾有守，2 0 0 1 ) ：而浅部真菌感染很常见，具有较强 的传染性，虽然一般不危及生命，但给患病犬及畜主带来很多健康隐患。浅部真菌主要是指 皮肤丝状菌，或称皮肤真菌，侵犯人和动物的皮肤、毛发和指( 趾) 甲，引起癣病。当动物 患皮肤真菌病后，可随着病情发展引起局部皮肤性质与功能的变化，进而可能继发细菌感染， 是动物临床常见的传染性皮肤病之一。 i i 皮肤真菌病概述 自然界中真菌大约有2 5 万多种，分为：藻菌纲、子囊菌纲、担子菌纲及半知菌纲( g l e n n s b u l m e r ，郑岳臣，2 0 0 5 ) 。这其中已经报道的属有1 万以上，种也超过1 0 万，现今已知可 以引起人类疾病的真菌约有2 7 0 余种( 张文娟，2 0 0 1 ) ，可导致皮肤真菌病的致病菌有4 5 种， 其中一部分仅感染动物，比较公认对人类有致病作用的约有2 0 余种( 汪昭贤，2 0 0 4 ) 。 犬皮肤真菌病是指由致病真菌感染犬的表皮角质、毛发、指甲、爪、角质蛋白组织等部 位，并在体表大量繁殖，破坏体表正常微生态，从而引起一系列诸如脱毛、红疹、破溃等器 质性病变的疾病。犬皮肤真菌病是十分顽固的疾病，不但犬之间具有高度的接触传染性，同 时也感染人类，是一种人畜共患的疾病( 王阶玉等，2 0 0 7 ) 。 i 1 i 致病性真菌 常见人皮肤真菌病的致病真菌有红色毛癣菌、须癣毛癣菌、石膏样毛癣菌、絮状表皮癣 菌、羊毛状小抱子菌、紫色毛癣菌、铁锈色小包子菌、虎状小抱子菌、白念珠菌、非白念珠 菌、酵母菌、镰刀菌、霉菌等( 李飞，2 0 0 4 ) ，其中犬真菌病的主要致病菌为犬小孢子菌、 石膏状小孢子菌、须癣毛癣菌。 1 1 1 1 犬小孢子菌 犬小抱子菌( m i c r o s p o r u mc a n i s ) 由g r u b y 在1 8 4 3 年首次发现，是较为常见的致病性真 菌( 胡沙沙，2 0 0 5 ) 。犬小孢子菌又名羊毛状小孢子菌、犬齿小孢子菌、猴小孢子菌、肥胖小 孢子菌，属半知菌亚门，丝孢菌纲，丛梗孢目，丛梗孢科，小孢子菌属，为发内发外型、亲 石膏样小孢子菌感染动物后自身增殖，释放毒素及代谢物，刺激皮肤炎症反应，除此之 外，还报道其能产生外分泌性蛋白酶，使菌体更容易侵入皮肤角质，刺激皮肤发生炎症反应。 显微镜下观察可见其孢子壁薄呈梭形，一般含有4 巧个分隔，这是其特征，是鉴定石膏样小 孢子菌的主要依据之一。在沙堡弱培养基上生长加快，菌落扁平、淡褐色、表面呈粉末样外 观，有些菌株在菌落的中央呈现环状沟纹。 1 i 1 3 须癣毛癣菌 须癣毛癣菌( t r i c h o p h y t o nm e n t a g r o p h y t e s ) 又称石膏样毛癣菌，在微生物分类学上， 属于半知菌亚门丝孢菌纲丝孢目的丛梗孢科是一种较常见的皮肤癣菌。感染人后主要引起足 癣，还可以引起头癣、体癣、股癣等疾病，临床表现比较多样，造成皮肤的炎症反应也比较 明显。 2 | 前言 须癣毛癣菌有许多的变种及表型，一部分为亲人性另一部分为亲动物性，其中羊毛状、 紧密状和绒毛状居多，三个表型占7 0 多，其中绒毛状菌落为白色蓬松，呈绒毛状，主要是 亲人性，另一种颗粒型，菌落呈扁平，含有极少气生菌丝，呈颗粒样外观，为亲动物性，主 要感染动物( 李庆祥等，2 0 0 7 ) 。显微镜下观察，须癣毛癣菌可形成大量圆形的小