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文档简介
1、Quantity One应用讲义本讲义介绍Quantity One的两个重要分析功能:定量分析和分子量确定。Quantity One软件HelpàQuick Guide快捷指南提示如何实现一个功能,如定量分析(Volumes Quick Guide),电泳条带分析(Band Analysis),差显分析(Differential Display Analysis),克隆计数(Colony Counting Analysis)等。快捷指南下有1,2,3步骤,根据提示完成。二条带分析功能Band Analysis介绍用此功能对泳道内的所有条带进行分子量确定,相对浓度分析1,2,3同上4,
2、5,6确定泳道lane,并可对泳道进行各种调整(实际实验中泳道往往不是垂直的而出现各种变形。在软件的工具栏中有一Lane Tool图标,包含有更多泳道编辑工具。Band Tool条带编辑工具包Lane Tool泳道编辑工具包7Lane Background去除泳道背景,建议不做8Detect Band,检测泳道内的条带,打开出现如下窗口,一般可通过调节sensitivity灵敏度来调节检测出的条带,或通过人工编辑来增加/减少条带。打开工具栏中Band Tool条带编辑工具包可看到更多编辑工具(如上图)10. Standard输入分子量标准,软件自带有许多Bio-Rad的分子量标准,如你用的是自
3、己的标准,进入New Standard建立新的分子量标准,软件可以选择标准单位是MW(蛋白质)还是BP(核酸)等(左下图)。在Protein-Standard对话框中输入分子量数值,完成后单击赋值图标(右下图),回到图象文件上单击标准样品的泳道,软件自动将所输的分子量数值和泳道内的条带一一对应。赋值图标:告诉软件哪条是分子量标准样品的泳道输入分子量数值10. Band Attribute条带属性,在完成第9步以后,软件已自动计算出了其他未知条带的分子量,打开band attribute选择要报告的参数,这里我们选择Molecular Weight,图象上可以看到所有条带的分子量(红颜色标记),标准分子量为蓝色标记。11. Match,跳过不做12. Print Image打印图象13. All Lane Report所有泳道条带结果报告。打开窗口,选择要报告的参数,如Mol.Wt.(分子量,如左下图),软件将报告结果(右下图),在报告的右下脚有一报告输出工具,点击
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