2025年大学生物科学（生物实验技术）试题及答案

2025年大学生物科学（生物实验技术）试题及答案

（考试时间：90分钟满分100分）班级______姓名______第I卷（选择题共30分）答题要求：本卷共10小题，每小题3分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。请将正确答案的序号填在括号内。1.下列关于生物实验技术中常用仪器的说法，错误的是（）A.显微镜的目镜越长，放大倍数越大B.离心机可用于分离细胞和细胞器等C.移液器能精确移取一定体积的液体D.培养箱可提供细胞生长所需的适宜条件2.以下哪种染色剂常用于观察细胞中的DNA（）A.苏丹Ⅲ染液B.甲基绿染液C.健那绿染液D.吡罗红染液3.在蛋白质提取与分离实验中，常用的缓冲液成分不包括（）A.氯化钠B.氢氧化钠C.磷酸二氢钠D.甘氨酸4.关于PCR技术，下列叙述正确的是（）A.需要解旋酶解开DNA双链B.反应体系中需要加入核糖核苷酸C.扩增过程包括变性、退火、延伸D.只能扩增特定长度的DNA片段5.下列哪种技术可用于检测蛋白质的表达水平（）A.凝胶过滤层析B.蛋白质印迹法C.亲和层析D.离子交换层析6.细胞培养过程中，常用的培养基不包括（）A.RPMI1640培养基B.DMEM培养基C.伊红美蓝培养基D.MEM培养基7.用于核酸电泳的缓冲液是（）A.Tris-HCl缓冲液B.柠檬酸钠缓冲液C.醋酸缓冲液D.硼酸缓冲液8.下列关于酶标仪的说法，不正确的是（）A.可用于检测酶促反应的产物B.能对样品进行定量分析C.只能检测可见光范围内的信号D.可用于ELISA实验9.在基因克隆实验中，常用的载体不包括（）A.质粒载体B.噬菌体载体C.人工染色体载体D.核糖体载体10.下列哪种技术可用于细胞的转染（）A.电穿孔法B.离心法C.过滤法D.透析法第II卷（非选择题共70分）（一）填空题（共15分）答题要求：请在横线上填写合适的内容。1.生物实验技术中，常用的灭菌方法有______、______、______等。2.蛋白质的分离方法有______、______、______等。3.细胞计数常用的方法有______、______。4.核酸提取过程中，常用的裂解液成分有______、______、______等。5.基因表达载体通常包括______、______、______、______等元件。（二）简答题（共20分）答题要求：简要回答问题，条理清晰。1.简述PCR技术的原理及主要步骤。2.说明蛋白质印迹法的基本流程。3.细胞培养过程中需要注意哪些要点？4.核酸电泳的目的是什么？常用的核酸染料有哪些？（三）实验设计题（共15分）答题要求：根据给定的实验目的，设计合理的实验方案。现有一种未知的生物样本，需要确定其中是否含有某种特定的蛋白质。请设计一个实验方案来检测该蛋白质的存在。（四）材料分析题（共10分）材料：在一项关于细胞凋亡的研究中，研究人员使用了两种不同的细胞系A和B。他们分别用药物X处理细胞系A，用药物Y处理细胞系B，然后通过流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示，细胞系A在药物X处理后凋亡率明显升高，而细胞系B在药物Y处理后凋亡率没有明显变化。问题：1.请分析该实验中存在的不足之处。2.如何改进该实验以获得更可靠的结果？（五）综合应用题（共20分）材料：某研究小组想要研究一种新的基因对细胞生长的影响。他们构建了该基因的过表达载体，并将其转染到细胞中。然后通过MTT法检测细胞的增殖情况，同时用荧光定量PCR检测该基因及相关生长因子基因的表达水平。问题：1.请简述MTT法检测细胞增殖的原理。2.荧光定量PCR检测基因表达水平的结果如何分析？3.根据上述实验，你认为该新基因对细胞生长有怎样的影响？请说明理由。答案：1.A2.B3.B4.C5.B6.C7.A8.C9.D10.A填空题答案：1.高压蒸汽灭菌、干热灭菌、紫外线灭菌2.凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析3.血细胞计数板计数法、台盼蓝染色计数法4.SDS、蛋白酶K、Tris-HCl5.启动子、终止子、多克隆位点、标记基因简答题答案：1.PCR技术原理：以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5’末端和3’末端相互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。主要步骤：变性、退火、延伸。2.蛋白质印迹法基本流程：蛋白质样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移到固相载体（如硝酸纤维素膜或PVDF膜）上，然后用特异性抗体与膜上的目标蛋白质结合，再通过酶标二抗等方法检测抗体结合情况，从而确定目标蛋白质的存在及表达水平。3.细胞培养要点：合适的培养基及添加物；无菌操作；合适的温度、pH值、气体环境；定期传代；防止污染等。4.核酸电泳目的：分离、鉴定和纯化核酸。常用核酸染料：溴化乙锭、SYBRGreen等。实验设计题答案：可采用蛋白质印迹法。首先提取生物样本中的蛋白质，进行SDS电泳分离，然后将蛋白质转移到膜上，用针对该特定蛋白质的一抗孵育，再用二抗孵育，最后通过显色或发光等方法检测是否有特异性条带，若有则说明样本中含有该蛋白质。材料分析题答案：1.不足之处在于没有设置对照组，无法确定药物X和Y本身对细胞凋亡率有无影响，也无法对比两种细胞系在正常情况下的凋亡差异。2.改进方法：增加未处理的细胞系A和B作为空白对照，同时增加只加药物X的细胞系B和只加药物Y的细胞系A作为平行对照，以排除药物本身及细胞系差异对结果的干扰。综合应用题答案：1.MTT法检测细胞增殖原理：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶甲瓒并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值OD值，可间接反映活细胞数量。2.荧光定量PCR检测基因表达水平结果分析：通过比较实验组和对照组中目的基因及相关基因的荧光信号强度，计算出相对