(2025年)病理科免疫组化真题及答案

(2025年)病理科免疫组化练习题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分）1.以下哪种抗体常用于检测乳腺癌中的雌激素受体（ER）？A.CK（细胞角蛋白）B.ER（雌激素受体）C.PR（孕激素受体）D.HER-2（人表皮生长因子受体2）答案：B。雌激素受体（ER）检测使用针对ER的特异性抗体，用于评估乳腺癌患者的激素受体状态，对指导内分泌治疗有重要意义。CK主要用于上皮源性肿瘤的诊断和鉴别诊断；PR用于检测孕激素受体；HER-2用于评估乳腺癌的预后和指导靶向治疗。2.在恶性黑色素瘤的免疫组化诊断中，具有较高特异性的标志物是：A.S-100B.HMB-45C.vimentin（波形蛋白）D.CD34答案：B。HMB-45是恶性黑色素瘤相对特异的标志物，在黑色素瘤细胞中呈阳性表达。S-100虽然在黑色素瘤中也常阳性，但特异性不强，在许多神经源性肿瘤等也可表达。vimentin是间叶组织来源肿瘤的标志物；CD34常用于血管源性肿瘤等的诊断。3.对于判断淋巴瘤细胞的来源，以下哪种抗体组合最有价值？A.CD3、CD20B.CK、EMA（上皮膜抗原）C.vimentin、desmin（结蛋白）D.PSA（前列腺特异性抗原）、PAP（前列腺酸性磷酸酶）答案：A。CD3是T淋巴细胞的标志物，CD20是B淋巴细胞的标志物，通过检测CD3和CD20可以判断淋巴瘤细胞是来源于T细胞还是B细胞。CK和EMA主要用于上皮性肿瘤的诊断；vimentin和desmin用于间叶组织肿瘤的鉴别；PSA和PAP用于前列腺癌的诊断。4.以下哪种免疫组化标志物可用于鉴别平滑肌瘤和平滑肌肉瘤？A.SMA（平滑肌肌动蛋白）B.desminC.Ki-67D.CD31答案：C。Ki-67是一种细胞增殖相关的核抗原，其阳性表达率可以反映肿瘤细胞的增殖活性。在平滑肌瘤和平滑肌肉瘤的鉴别中，平滑肌肉瘤的Ki-67阳性率通常较高。SMA和desmin是平滑肌细胞的标志物，在平滑肌瘤和平滑肌肉瘤中均可阳性表达；CD31主要用于血管内皮细胞的标记。5.甲状腺乳头状癌具有诊断意义的免疫组化标志物是：A.TTF-1（甲状腺转录因子-1）B.thyroglobulin（甲状腺球蛋白）C.CK19D.alloftheabove（以上都是）答案：D。TTF-1在甲状腺滤泡上皮细胞和甲状腺癌中表达，对甲状腺癌的诊断有一定帮助；甲状腺球蛋白是甲状腺滤泡上皮细胞合成和分泌的特异性蛋白，在甲状腺乳头状癌中可阳性表达；CK19在甲状腺乳头状癌中也常呈阳性表达，且具有一定的特征性，三者联合应用对甲状腺乳头状癌的诊断具有重要意义。6.用于检测胃肠道间质瘤（GIST）的关键免疫组化标志物是：A.CD117B.DOG1C.SMAD.AandB（A和B）答案：D。CD117（c-kit）和DOG1是胃肠道间质瘤的重要诊断标志物，大多数GIST病例CD117和DOG1呈阳性表达。SMA主要用于平滑肌来源肿瘤的标记，在GIST中一般不用于主要诊断。7.神经内分泌肿瘤常用的免疫组化标志物不包括：A.ChromograninA（嗜铬粒蛋白A）B.Synaptophysin（突触素）C.CD56D.CD20答案：D。ChromograninA、Synaptophysin和CD56都是神经内分泌肿瘤常用的标志物，可用于神经内分泌肿瘤的诊断和鉴别诊断。CD20是B淋巴细胞的标志物，与神经内分泌肿瘤无关。8.在肾细胞癌的免疫组化诊断中，有助于鉴别透明细胞肾细胞癌和嫌色细胞肾细胞癌的标志物是：A.CAIX（碳酸酐酶IX）B.CK7C.PAX8D.AandB（A和B）答案：D。CAIX在透明细胞肾细胞癌中高表达，而在嫌色细胞肾细胞癌中低表达或不表达；CK7在嫌色细胞肾细胞癌中常呈阳性表达，而在透明细胞肾细胞癌中多为阴性。PAX8在大多数肾细胞癌中均有表达，对鉴别这两种类型的肾细胞癌意义不大。9.以下哪种免疫组化结果提示乳腺癌预后较差？A.ER（+）、PR（+）、HER-2（-）B.ER（-）、PR（-）、HER-2（+）C.ER（+）、PR（+）、HER-2（+）D.ER（-）、PR（-）、HER-2（-）答案：B。ER和PR阳性提示乳腺癌细胞对内分泌治疗敏感，预后相对较好；HER-2阳性提示肿瘤细胞增殖活性高、侵袭性强，预后较差。ER（-）、PR（-）、HER-2（+）的乳腺癌患者既不能从内分泌治疗中获益，又具有较高的侵袭性，预后相对较差。ER（-）、PR（-）、HER-2（-）的三阴乳腺癌预后也较差，但HER-2阳性的患者在靶向治疗应用前预后更差。10.骨肉瘤的免疫组化标志物中，具有一定诊断价值的是：A.Osteocalcin（骨钙素）B.vimentinC.CD99D.ALK（间变性淋巴瘤激酶）答案：A。骨钙素是成骨细胞合成和分泌的一种非胶原蛋白，在骨肉瘤细胞中可表达，对骨肉瘤的诊断有一定的提示作用。vimentin是间叶组织来源肿瘤的通用标志物；CD99主要用于尤因肉瘤/原始神经外胚层肿瘤的诊断；ALK主要用于间变性大细胞淋巴瘤等的诊断。11.免疫组化染色中，内源性过氧化物酶的阻断剂通常是：A.3%过氧化氢B.0.1%TritonX-100C.10%正常山羊血清D.DAB（3,3'-二氨基联苯胺）答案：A。3%过氧化氢可以阻断内源性过氧化物酶的活性，防止其与免疫组化染色中的过氧化物酶底物反应，从而减少非特异性染色。0.1%TritonX-100常用于增加细胞膜的通透性；10%正常山羊血清用于封闭非特异性结合位点；DAB是免疫组化染色中的显色剂。12.在免疫组化结果判断中，阳性对照的作用是：A.验证抗体的有效性B.排除非特异性染色C.确定染色的强度D.以上都是答案：D。阳性对照使用已知阳性的组织切片进行免疫组化染色，其作用包括验证抗体的有效性，确保抗体能够与相应的抗原结合；排除非特异性染色，因为如果阳性对照出现异常染色，则可能存在操作问题或试剂问题；同时也可以帮助确定染色的强度，作为判断待测组织染色结果的参考。13.以下哪种情况可能导致免疫组化结果出现假阴性？A.抗体浓度过高B.抗原修复不充分C.孵育时间过长D.显色时间过长答案：B。抗原修复不充分会导致组织中的抗原不能充分暴露，使得抗体无法与抗原有效结合，从而出现假阴性结果。抗体浓度过高可能导致非特异性染色增加，出现假阳性；孵育时间过长可能会增加非特异性结合和背景染色；显色时间过长也会导致背景染色加深，出现假阳性。14.免疫组化染色中，苏木精复染的目的是：A.使细胞核更清晰B.增强阳性染色的对比度C.显示组织的形态结构D.alloftheabove（以上都是）答案：D。苏木精是一种常用的细胞核染料，在免疫组化染色中复染细胞核可以使细胞核更清晰，便于观察细胞的形态和数量；同时可以增强阳性染色与细胞核的对比度，使阳性信号更加突出；还可以显示组织的整体形态结构，有助于病理医生对病变的全面判断。15.对于软组织肉瘤的诊断和鉴别诊断，以下哪种免疫组化标志物组合较为常用？A.vimentin、SMA、desmin、CD34B.CK、EMA、TTF-1、thyroglobulinC.CD3、CD20、CD56、ChromograninAD.PSA、PAP、ER、PR答案：A。vimentin是间叶组织来源肿瘤的通用标志物，SMA和desmin用于平滑肌来源肿瘤的标记，CD34用于血管源性肿瘤等的标记，这几种标志物组合可用于软组织肉瘤的诊断和不同类型软组织肉瘤的鉴别。CK和EMA用于上皮性肿瘤的诊断；TTF-1和甲状腺球蛋白用于甲状腺肿瘤的诊断；CD3、CD20、CD56、ChromograninA用于淋巴瘤和神经内分泌肿瘤的诊断；PSA、PAP、ER、PR用于前列腺癌和乳腺癌的诊断。16.以下哪种肿瘤的免疫组化特征为CD30（+）、ALK（+）？A.间变性大细胞淋巴瘤B.弥漫大B细胞淋巴瘤C.霍奇金淋巴瘤D.滤泡性淋巴瘤答案：A。间变性大细胞淋巴瘤常表现为CD30阳性，且部分病例ALK阳性。弥漫大B细胞淋巴瘤主要表达CD20等B细胞标志物；霍奇金淋巴瘤典型的R-S细胞表达CD30、CD15等；滤泡性淋巴瘤主要表达CD20、Bcl-2等。17.免疫组化染色中，二抗的选择通常取决于：A.一抗的种属来源B.抗原的性质C.组织的类型D.染色的方法答案：A。二抗是针对一抗的抗体，其选择通常取决于一抗的种属来源。例如，如果一抗是兔来源的抗体，则需要选择抗兔的二抗。抗原的性质、组织的类型和染色的方法对二抗的选择影响较小。18.用于鉴别上皮性肿瘤和间叶性肿瘤的免疫组化标志物是：A.CK和vimentinB.CD3和CD20C.ChromograninA和SynaptophysinD.PSA和PAP答案：A。CK是上皮细胞的标志物，vimentin是间叶组织细胞的标志物，通过检测CK和vimentin可以鉴别上皮性肿瘤和间叶性肿瘤。CD3和CD20用于鉴别T细胞和B细胞来源的淋巴瘤；ChromograninA和Synaptophysin用于神经内分泌肿瘤的诊断；PSA和PAP用于前列腺癌的诊断。19.在免疫组化结果判断中，阴性对照的作用是：A.验证抗体的特异性B.排除内源性过氧化物酶的干扰C.确定染色的背景强度D.以上都是答案：D。阴性对照使用已知阴性的组织切片或不加一抗进行免疫组化染色，其作用包括验证抗体的特异性，如果阴性对照出现阳性染色，则可能存在抗体的非特异性结合；排除内源性过氧化物酶的干扰，因为如果阴性对照出现显色反应，可能是内源性过氧化物酶未被有效阻断；同时也可以确定染色的背景强度，作为判断待测组织染色结果是否为特异性染色的参考。20.以下哪种免疫组化标志物在肝癌中具有相对特异性？A.HepPar1（肝细胞抗原1）B.CK18C.AFP（甲胎蛋白）D.AandC（A和C）答案：D。HepPar1是肝细胞的相对特异性标志物，在大多数肝癌细胞中呈阳性表达；AFP是肝癌的重要血清标志物，在肝癌组织中也可阳性表达，两者联合应用对肝癌的诊断有重要意义。CK18在多种上皮组织中均可表达，特异性不强。21.免疫组化染色中，抗原修复的方法不包括：A.高压加热法B.微波加热法C.酶消化法D.冷冻切片法答案：D。高压加热法、微波加热法和酶消化法都是常见的抗原修复方法，用于暴露组织切片中的抗原表位，提高免疫组化染色的敏感性。冷冻切片法是一种组织制片方法，不是抗原修复方法。22.对于卵巢浆液性癌和黏液性癌的鉴别，有帮助的免疫组化标志物是：A.CK7、CK20B.ER、PRC.CA125D.WT1答案：A。CK7和CK20的表达模式在卵巢浆液性癌和黏液性癌中有一定差异。卵巢浆液性癌通常CK7阳性、CK20阴性；卵巢黏液性癌CK7可阴性或阳性，CK20常阳性。ER和PR主要用于评估卵巢癌的激素受体状态；CA125是卵巢癌的血清标志物，在免疫组化中应用较少；WT1在卵巢浆液性癌中常阳性，但对鉴别浆液性癌和黏液性癌的特异性不强。23.以下哪种免疫组化结果支持神经鞘瘤的诊断？A.S-100（+）、EMA（-）、CD34（-）B.S-100（-）、EMA（+）、CD34（+）C.S-100（+）、EMA（+）、CD34（+）D.S-100（-）、EMA（-）、CD34（-）答案：A。神经鞘瘤起源于神经鞘膜细胞，S-100通常呈阳性表达；EMA是上皮膜抗原，神经鞘瘤为间叶组织来源肿瘤，EMA一般为阴性；CD34主要用于血管源性肿瘤等的诊断，神经鞘瘤CD34通常为阴性。24.免疫组化染色中，显色剂DAB的特点不包括：A.显色为棕色B.灵敏度高C.稳定性好D.具有致癌性答案：C。DAB显色后的颜色为棕色，灵敏度较高，是免疫组化染色中常用的显色剂。但DAB具有一定的致癌性，且其稳定性较差，需要现用现配。25.在肺腺癌的诊断中，具有重要诊断价值的免疫组化标志物是：A.TTF-1、NapsinAB.CK5/6、p63C.CD56、ChromograninAD.CD3、CD20答案：A。TTF-1和NapsinA在肺腺癌中常呈阳性表达，对肺腺癌的诊断有重要价值。CK5/6和p63主要用于鳞状细胞癌的诊断；CD56和ChromograninA用于神经内分泌肿瘤的诊断；CD3和CD20用于淋巴瘤的诊断。26.以下哪种肿瘤的免疫组化特征为CD2（+）、CD3（+）、CD5（+）？A.T细胞淋巴瘤B.B细胞淋巴瘤C.霍奇金淋巴瘤D.浆细胞瘤答案：A。CD2、CD3和CD5是T淋巴细胞的标志物，CD2（+）、CD3（+）、CD5（+）支持T细胞淋巴瘤的诊断。B细胞淋巴瘤主要表达CD20等B细胞标志物；霍奇金淋巴瘤典型的R-S细胞表达CD30、CD15等；浆细胞瘤主要表达CD138等。27.免疫组化染色中，封闭非特异性结合位点常用的试剂是：A.10%正常山羊血清B.3%过氧化氢C.DABD.苏木精答案：A。10%正常山羊血清可以封闭组织切片中的非特异性结合位点，减少抗体的非特异性结合，降低背景染色。3%过氧化氢用于阻断内源性过氧化物酶；DAB是显色剂；苏木精用于细胞核复染。28.对于子宫内膜癌的诊断和鉴别诊断，有意义的免疫组化标志物是：A.ER、PR、p53B.CK7、CK20C.CD34、SMAD.ChromograninA、Synaptophysin答案：A。ER和PR可以评估子宫内膜癌的激素受体状态，对指导内分泌治疗有重要意义；p53基因的异常表达与子宫内膜癌的发生、发展和预后相关。CK7和CK20主要用于鉴别不同类型的上皮性肿瘤；CD34和SMA用于间叶组织肿瘤的诊断；ChromograninA和Synaptophysin用于神经内分泌肿瘤的诊断。29.以下哪种免疫组化标志物在横纹肌肉瘤中具有诊断价值？A.MyoD1、MyogeninB.CD99C.ALKD.CD117答案：A。MyoD1和Myogenin是横纹肌特异性的转录因子，在横纹肌肉瘤中呈阳性表达，对横纹肌肉瘤的诊断有重要价值。CD99主要用于尤因肉瘤/原始神经外胚层肿瘤的诊断；ALK主要用于间变性大细胞淋巴瘤等的诊断；CD117主要用于胃肠道间质瘤的诊断。30.免疫组化结果的判断需要结合：A.组织学形态B.临床资料C.其他辅助检查结果D.alloftheabove（以上都是）答案：D。免疫组化结果的判断不能孤立进行，需要结合组织学形态，因为免疫组化染色只是一种辅助诊断方法，组织学形态仍然是诊断的基础；同时要结合临床资料，如患者的症状、体征、病史等；还需要参考其他辅助检查结果，如影像学检查、实验室检查等，综合判断才能得出准确的诊断。二、多项选择题（每题2分，共20分）1.以下哪些免疫组化标志物可用于诊断神经内分泌肿瘤？A.ChromograninAB.SynaptophysinC.CD56D.PSAE.PAP答案：ABC。ChromograninA、Synaptophysin和CD56是神经内分泌肿瘤常用的标志物，可用于神经内分泌肿瘤的诊断和鉴别诊断。PSA和PAP是前列腺癌的标志物，与神经内分泌肿瘤无关。2.免疫组化染色中，可能影响染色结果的因素有：A.抗体的质量B.抗原修复的方法和程度C.孵育的温度和时间D.显色剂的浓度和显色时间E.组织的固定和处理答案：ABCDE。抗体的质量直接影响抗体与抗原的结合能力，高质量的抗体才能获得准确的染色结果；抗原修复的方法和程度决定了抗原表位的暴露情况，影响抗体与抗原的结合；孵育的温度和时间会影响抗体与抗原的反应速度和结合程度；显色剂的浓度和显色时间会影响染色的强度和对比度；组织的固定和处理不当会导致抗原的丢失或变性，影响免疫组化染色的效果。3.在乳腺癌的免疫组化诊断中，以下哪些标志物具有重要意义？A.ERB.PRC.HER-2D.Ki-67E.CK答案：ABCD。ER和PR用于评估乳腺癌的激素受体状态，指导内分泌治疗；HER-2用于判断乳腺癌是否适合靶向治疗，且与预后相关；Ki-67反映肿瘤细胞的增殖活性，对预后评估有重要意义。CK虽然在乳腺癌中也可表达，但对乳腺癌的特异性诊断和治疗指导意义相对较小。4.以下哪些免疫组化标志物可用于鉴别癌和肉瘤？A.CKB.vimentinC.EMAD.desminE.CD34答案：ABC。CK是上皮细胞的标志物，vimentin是间叶组织细胞的标志物，EMA是上皮膜抗原，通过检测CK、vimentin和EMA可以鉴别癌（上皮性肿瘤）和肉瘤（间叶性肿瘤）。desmin主要用于平滑肌来源肿瘤的标记；CD34主要用于血管源性肿瘤等的诊断。5.免疫组化染色中，阳性对照和阴性对照的作用包括：A.验证抗体的有效性和特异性B.排除非特异性染色C.确定染色的强度和背景D.评估实验操作的准确性E.指导临床治疗答案：ABCD。阳性对照和阴性对照可以验证抗体的有效性和特异性，确保抗体能够与相应的抗原结合且无非特异性结合；排除非特异性染色，通过观察对照切片的染色情况判断是否存在操作问题或试剂问题；确定染色的强度和背景，为判断待测组织染色结果提供参考；评估实验操作的准确性，保证实验结果的可靠性。阳性对照和阴性对照主要用于实验过程的质量控制，不能直接指导临床治疗。6.对于甲状腺肿瘤的诊断和鉴别诊断，有帮助的免疫组化标志物有：A.TTF-1B.thyroglobulinC.CK19D.CD56E.HMB-45答案：ABC。TTF-1、thyroglobulin和CK19在甲状腺肿瘤的诊断和鉴别诊断中具有重要意义。TTF-1在甲状腺滤泡上皮细胞和甲状腺癌中表达；甲状腺球蛋白是甲状腺滤泡上皮细胞合成和分泌的特异性蛋白；CK19在甲状腺乳头状癌中常呈阳性表达。CD56主要用于神经内分泌肿瘤的诊断；HMB-45是恶性黑色素瘤的标志物。7.以下哪些免疫组化标志物在肾细胞癌中可能有表达？A.CAIXB.CK7C.PAX8D.CD10E.RCC（肾细胞癌抗原）答案：ABCDE。CAIX在透明细胞肾细胞癌中高表达；CK7在嫌色细胞肾细胞癌中常呈阳性表达；PAX8在大多数肾细胞癌中均有表达；CD10在肾细胞癌中也可表达；RCC是肾细胞癌的特异性抗原，在肾细胞癌中可阳性表达。8.免疫组化染色中，常用的抗原修复方法有：A.高压加热法B.微波加热法C.酶消化法D.低温冷藏法E.化学溶剂法答案：ABC。高压加热法、微波加热法和酶消化法是常用的抗原修复方法，通过加热或酶消化的方式暴露组织切片中的抗原表位。低温冷藏法是保存组织或标本的方法，不是抗原修复方法；化学溶剂法一般不用于抗原修复。9.在软组织肉瘤的诊断中，常用的免疫组化标志物组合包括：A.vimentin、SMA、desminB.CD34、CD99、ALKC.CK、EMA、TTF-1D.ChromograninA、Synaptophysin、CD56E.MyoD1、Myogenin答案：ABE。vimentin是间叶组织来源肿瘤的通用标志物；SMA和desmin用于平滑肌来源肿瘤的标记；CD34用于血管源性肿瘤等的诊断；CD99用于尤因肉瘤/原始神经外胚层肿瘤的诊断；ALK用于间变性大细胞淋巴瘤等的诊断；MyoD1和Myogenin用于横纹肌肉瘤的诊断。CK、EMA、TTF-1主要用于上皮性肿瘤和甲状腺肿瘤的诊断；ChromograninA、Synaptophysin、CD56用于神经内分泌肿瘤的诊断。10.对于淋巴瘤的诊断和分型，有重要意义的免疫组化标志物有：A.CD3B.CD20C.CD30D.CD15E.Bcl-2答案：ABCDE。CD3是T淋巴细胞的标志物，CD20是B淋巴细胞的标志物，通过检测CD3和CD20可以判断淋巴瘤细胞的来源。CD30在间变性大细胞淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤中常阳性表达；CD15在霍奇金淋巴瘤中典型的R-S细胞呈阳性表达；Bcl-2在滤泡性淋巴瘤等中常阳性表达，与肿瘤细胞的凋亡抑制有关。三、简答题（每题10分，共30分）1.简述免疫组化在肿瘤诊断中的作用。免疫组化在肿瘤诊断中具有多方面的重要作用：（1）肿瘤的诊断和鉴别诊断：可以通过检测肿瘤细胞中特定抗原的表达来确定肿瘤的来源和类型。例如，CK阳性提示上皮性肿瘤，vimentin阳性提示间叶性肿瘤，通过检测不同的标志物组合可以鉴别癌和肉瘤、不同类型的癌（如腺癌和鳞状细胞癌）等。对于一些形态学上难以区分的肿瘤，免疫组化可以提供重要的诊断依据。（2）判断肿瘤的分化程度：某些标志物的表达水平与肿瘤的分化程度相关。例如，在一些腺癌中，随着分化程度的降低，某些上皮标志物的表达可能减弱，而一些增殖相关标志物（如Ki-67）的表达可能增加。（3）指导肿瘤的治疗：免疫组化可以检测肿瘤细胞中的激素受体（如ER、PR）和靶向治疗相关标志物（如HER-2）。ER和PR阳性的乳腺癌患者可以接受内分泌治疗；HER-2阳性的乳腺癌患者可以使用针对HER-2的靶向治疗药物。（4）评估肿瘤的预后：一些免疫组化标志物的表达与肿瘤的预后相关。例如，Ki-67阳性表达率高提示肿瘤细胞增殖活跃，预后可能较差；p53基因的异常表达也与肿瘤的预后不良有关。（5）发现微小转移灶：免疫组化可以检测到常规病理检查难以发现的微小转移灶。例如，使用CK等标志物可以在淋巴结或其他组织中检测到上皮性肿瘤的微小转移细胞。2.请列举三种常见的免疫组化染色方法，并简述其原理。（1）酶免疫组织化学方法：最常用的是过氧化物酶-抗过氧化物酶法（PAP法）和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）。其原理是利用酶与底物的反应来显示抗原的存在。首先，用特异性的一抗与组织中的抗原结合，然后用二抗与一抗结合，二抗上标记有酶（如过氧化物酶）。加入酶的底物（如DAB）后，酶催化底物发生化学反应，产生有色产物，从而在显微镜下可以观察到抗原的分布位置。（2）免疫荧光法：原理是用荧光素标记抗体，当标记的抗体与组织中的抗原结合后，在荧光显微镜下可以观察到荧光信号，从而确定抗原的位置。常用的荧光素有异硫氰酸荧光素（FITC）和罗丹明等。免疫荧光法具有灵敏度高、特异性强的特点，但荧光容易淬灭，需要及时观察和拍照。（3）亲和组织化学方法：利用某些物质之间的高度亲和力来显示抗原。例如，生物素-抗生物素系统，生物素可以与抗体结合，而抗生物素可以与标记有酶或荧光素的生物素结合。先将生物素标记的一抗与组织中的抗原结合，然后加入抗生物素-酶复合物或抗生物素-荧光素复合物，通过酶催化底物显色或荧光观察来显示抗原的存在。3.简述免疫组化染色结果的判断原则。（1）阳性和阴性判断：首先要确定阳性和阴性染色的标准。阳性染色表现为细胞或组织中出现特定的颜色反应，阴性染色则无明显颜色变化。判断时要结合阳性对照和阴性对照的结果。阳性对照应出现预期的阳性染色，阴性对照应无染色或仅有极微弱的背景染色。如果阳性对照不显色或阴性对照显色，则可能存在实验操作问题或试剂问题，结果不可靠。（2）染色强度判断：染色强度可以分为弱、中、强阳性等不同级别。一般根据染色的深浅程度进行判断，通常使用显微镜下的主观观察结合半定量的方法。染色强度的判断有助于评估抗原的表达水平。（3）染色范围判断：观察阳性染色在组织中的分布范围，是局灶性染色还是弥漫性染色。局灶性染色可能提示肿瘤细胞的异质性或病变的早期阶段；弥漫性染色可能提示肿瘤细胞的广泛浸润或高表达状态。（4）结合组织学形态：免疫组化结果的判断必须结合组织学形态。免疫组化只是一种辅助诊断方法，组织学形态仍然是诊断的基础。例如，在判断免疫组化结果时，要考虑细胞的形态、组织结构等因素，综合分析才能得出准确的诊断。（5）综合临床资料：还需要结合患者的临床资料，如症状、体征、病史、影像学检查结果等。例如，某些标志物在不同的临床情况下可能有不同的意义，综合考虑临床信息可以提高诊断的准确性和可靠性。四、论述题（20分）论述免疫组化在胃肠道肿瘤诊断、鉴别诊断和治疗指导中的应用。免疫组化在胃肠道肿瘤的诊断、鉴别诊断和治疗指导中具有至关重要的作用，以下从这三个方面进行详细论述：（一）在胃肠道肿瘤诊断中的应用1.确定肿瘤的组织来源：胃肠道肿瘤来源多样，免疫组化可以帮助确定肿瘤是上皮性、间叶性还是神经内分泌性等。例如，CK阳性提示上皮性肿瘤，vimentin阳性提示间叶性肿瘤。对于胃肠道腺癌，CK7和CK20的表达模式有助于判断肿瘤的可能起源。一般来说，结直肠腺癌CK20阳性、CK7阴性；胃腺癌CK7和CK20可呈不同的表达模式。2.