2025年检验科微生物检验处理流程考核试题及答案解析

2025年检验科微生物检验处理流程考核试题及答案解析一、单项选择题（每题2分，共20分）1.关于血培养标本采集，以下操作符合规范的是：A.发热高峰期采集1套（需氧+厌氧）B.成人每瓶采血量5mlC.皮肤消毒顺序：碘酊→75%酒精→碘伏D.怀疑导管相关血流感染时，同时采集外周血与导管血2.痰标本微生物检验前需进行质量评估，合格痰标本的标准是：A.鳞状上皮细胞＞25个/低倍视野（LPF）B.中性粒细胞＜10个/LPFC.鳞状上皮细胞＜10个/LPF且中性粒细胞＞25个/LPFD.仅需革兰染色见单一优势菌3.运送疑似霍乱患者粪便标本时，首选的培养基是：A.血琼脂培养基B.CaryBlair运送培养基C.巧克力琼脂培养基D.SS琼脂培养基4.进行尿培养时，中段尿标本的细菌计数≥10⁵CFU/ml提示：A.污染可能B.尿路感染C.需重复检测D.无需处理5.厌氧培养箱的气体环境应为：A.80%N₂+10%H₂+10%CO₂B.90%O₂+10%CO₂C.70%N₂+20%O₂+10%CO₂D.50%N₂+30%H₂+20%CO₂6.鉴定肠杆菌科细菌时，最常用的生化试验组合是：A.氧化酶试验+触酶试验B.凝固酶试验+β内酰胺酶试验C.吲哚试验+甲基红试验+VP试验+枸橼酸盐利用试验（IMViC）D.尿素酶试验+苯丙氨酸脱氨酶试验7.关于微生物检验质量控制，以下描述错误的是：A.每批培养基需做无菌试验B.药敏纸片需在20℃以下保存C.革兰染色需用标准菌株（如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌）做阳性对照D.血培养仪每日需进行温度校准8.处理疑似结核分枝杆菌标本时，需在几级生物安全实验室（BSL）中操作？A.BSL1B.BSL2C.BSL3D.BSL49.进行真菌镜检时，常用的透明剂是：A.0.9%氯化钠溶液B.10%氢氧化钾溶液C.95%酒精D.吉姆萨染液10.以下哪种标本无需进行厌氧培养？A.深部脓肿穿刺液B.胸腔积液C.痰液D.坏疽组织二、多项选择题（每题3分，共15分，少选、错选均不得分）1.影响血培养阳性率的关键因素包括：A.采集时间（寒战/发热初期）B.采血量（成人810ml/瓶）C.皮肤消毒是否彻底（碘伏消毒待干30秒）D.培养瓶类型（需氧+厌氧）2.痰标本微生物检验前需排除污染，常见污染菌包括：A.草绿色链球菌B.表皮葡萄球菌C.肺炎链球菌D.白色念珠菌3.关于微生物检验报告规范，正确的是：A.直接镜检结果需描述“找到革兰阳性球菌”，而非“检出金黄色葡萄球菌”B.培养阴性报告需注明“经×天培养无细菌生长”C.药敏结果需标注“敏感（S）”“中介（I）”“耐药（R）”D.真菌培养阳性时，需同时报告菌种名称和药敏结果4.生物安全柜使用时需遵守的规范包括：A.操作前用75%酒精擦拭台面B.柜内物品摆放需避免遮挡出风口C.操作时手臂频繁进出柜口D.操作结束后需运行紫外线灯30分钟5.以下属于快速微生物检测技术的是：A.基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）B.16SrRNA基因测序C.血培养瓶自动检测系统D.传统手工生化鉴定三、填空题（每空1分，共20分）1.血液标本采集时，成人需氧瓶与厌氧瓶的采血量分别为______ml和______ml；儿童需减少至______ml/瓶。2.痰标本革兰染色镜检时，合格标本的鳞状上皮细胞应＜______个/低倍视野，中性粒细胞应＞______个/低倍视野。3.粪便标本接种肠道选择培养基（如SS琼脂）前，需用______（试剂）进行涂片镜检，观察是否有______（形态描述）。4.厌氧培养箱的温度应控制在______℃，湿度需维持在______%以上。5.真菌培养常用的培养基是______，需孵育______天（深部真菌）或______天（浅部真菌）。6.药敏试验中，KB法（纸片扩散法）的培养基是______，接种菌液浓度需调整至______麦氏单位（相当于______CFU/ml）。7.处理分枝杆菌标本时，需用______（试剂）进行前处理以杀灭杂菌，常用的培养基是______。四、简答题（共30分）1.简述粪便标本微生物检验的完整处理流程（8分）。2.列举3种常见的微生物检验质量控制措施，并说明其意义（8分）。3.某患者痰培养结果回报“正常口腔菌群”，可能的原因有哪些？需如何改进标本采集（7分）。4.开放性问题：如何通过优化检验流程降低微生物标本的污染率？请结合实际工作提出3条具体措施（7分）。五、案例分析题（共15分）案例：患者男性，56岁，因“高热、寒战3天”入院，临床怀疑败血症。检验科接收2份血培养标本（采集时间间隔2小时），记录显示：第1份标本采集时，护士仅用75%酒精消毒皮肤10秒；第2份标本采血量为6ml/瓶（需氧瓶），未采集厌氧瓶。培养48小时后，2份标本均报阳性，涂片见革兰阳性球菌，呈葡萄状排列。问题：1.分析该血培养操作中的不规范之处（5分）。2.针对革兰阳性葡萄状球菌，需进一步进行哪些鉴定与药敏试验？请列出具体步骤（5分）。3.若最终鉴定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），报告时需注意哪些要点（5分）。答案及解析一、单项选择题1.答案：D解析：怀疑导管相关血流感染时，应同时采集外周静脉血与导管血（时间差＜5分钟），以提高诊断准确性（WS/T2252018）。血培养应在寒战/发热初期采集23套（每套需氧+厌氧），成人采血量810ml/瓶，皮肤消毒需用碘伏或碘酊（待干30秒以上）。2.答案：C解析：合格痰标本的标准为鳞状上皮细胞＜10个/LPF且中性粒细胞＞25个/LPF（WS/T2252018），提示标本来源于下呼吸道，污染少。3.答案：B解析：霍乱弧菌对运输条件敏感，需用CaryBlair运送培养基（含缓冲剂，保持中性环境），避免粪便pH变化导致细菌死亡。4.答案：B解析：中段尿培养细菌计数≥10⁵CFU/ml为尿路感染的诊断标准（≥10⁴CFU/ml提示可能感染，需结合临床；＜10⁴CFU/ml多为污染）。5.答案：A解析：厌氧培养箱需维持无氧环境，常用气体成分为80%N₂+10%H₂+10%CO₂（H₂与残余O₂在催化剂作用下生成水，彻底除氧）。6.答案：C解析：肠杆菌科细菌氧化酶阴性，IMViC试验（吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐利用）是其经典鉴定组合，可区分大肠埃希菌（++）与产气肠杆菌（++）等。7.答案：B解析：药敏纸片需在20℃以下冷冻保存（非冷藏），使用前需平衡至室温；每批培养基需做无菌试验（35℃孵育24小时无细菌生长）；革兰染色需用标准菌株（如大肠埃希菌G、金葡菌G+）做对照。8.答案：C解析：结核分枝杆菌为BSL3级病原微生物，操作其标本（如痰涂片、培养）需在BSL3实验室中进行。9.答案：B解析：10%氢氧化钾溶液可溶解标本中的角质蛋白等杂质，使真菌菌丝/孢子更清晰，是真菌镜检的常用透明剂。10.答案：C解析：痰液易被口腔正常菌群污染（含大量兼性厌氧菌），通常无需厌氧培养；深部脓肿、胸腔积液、坏疽组织等与外界隔离的标本需做厌氧培养。二、多项选择题1.答案：ABCD解析：血培养阳性率受采集时间（寒战/发热初期菌量最高）、采血量（成人810ml/瓶可覆盖95%菌血症）、消毒（碘伏待干30秒以上防皮肤菌污染）、培养瓶类型（需氧+厌氧覆盖需氧/厌氧菌）共同影响。2.答案：ABD解析：草绿色链球菌（口腔正常菌）、表皮葡萄球菌（皮肤正常菌）、白色念珠菌（口腔条件致病菌）均为痰标本常见污染菌；肺炎链球菌为下呼吸道感染常见致病菌，非污染菌。3.答案：ABC解析：直接镜检仅能观察细菌形态（如革兰阳性球菌），无法确定具体菌种；培养阴性需注明培养时间（如“经5天培养无细菌生长”）；药敏结果需标注S/I/R；真菌培养阳性时，深部真菌需报告菌种和药敏，浅部真菌（如皮肤癣菌）通常无需药敏。4.答案：ABD解析：生物安全柜操作时手臂应缓慢进出，避免扰乱气流；操作前需用75%酒精擦拭台面，物品摆放避免遮挡出风口（保证气流循环）；结束后运行紫外线灯30分钟消毒。5.答案：ABC解析：MALDITOFMS（快速鉴定菌种）、16SrRNA测序（分子鉴定）、血培养自动检测系统（快速报阳）均为快速检测技术；传统手工生化鉴定需12天，不属于快速技术。三、填空题1.810；810；152.10；253.生理盐水；异常形态菌群（如大量白细胞、脓细胞或优势菌）4.3537；605.沙保弱培养基；46；126.MH琼脂（MuellerHinton琼脂）；0.5；1.5×10⁸7.4%氢氧化钠（NaOH）；罗氏培养基（LowensteinJensen培养基）四、简答题1.粪便标本微生物检验的完整处理流程：①标本接收与初步观察：核对标识，观察外观（稀便/脓血便/黏液便），记录是否有异常气味（如霍乱米泔水样便）。②直接镜检：取黏液/脓血部分，用生理盐水涂片，高倍镜观察白细胞、红细胞及细菌形态（如霍乱弧菌呈鱼群样排列）；怀疑阿米巴时需保温镜检。③增菌培养（必要时）：怀疑沙门菌/志贺菌时，接种四硫磺酸钠增菌液（35℃孵育68小时）。④分离培养：接种选择培养基（SS琼脂、麦康凯琼脂）和鉴别培养基（伊红美蓝琼脂），35℃孵育1824小时。⑤菌落观察与纯培养：挑取可疑菌落（如SS琼脂上无色半透明菌落提示沙门菌/志贺菌），转种血琼脂平板纯化。⑥生化鉴定：通过三糖铁（TSI）、IMViC试验等鉴定菌种。⑦药敏试验：对致病菌（如志贺菌）进行KB法药敏试验。⑧描述直接镜检结果，回报培养及药敏结果（如“检出宋内志贺菌，对左氧氟沙星敏感”）。2.常见微生物检验质量控制措施及意义：①培养基质量控制：每批新制/购入的培养基需做无菌试验（35℃孵育24小时无细菌生长）和性能验证（用标准菌株测试生长情况，如大肠埃希菌在麦康凯琼脂上应形成红色菌落）。意义：确保培养基营养成分与选择/鉴别能力符合要求，避免假阴性/假阳性。②药敏纸片质量控制：每周用标准菌株（如ATCC25922大肠埃希菌、ATCC25923金黄色葡萄球菌）进行药敏试验，监测纸片效价。意义：保证药敏结果的准确性，避免因纸片失效导致耐药性误判。③仪器校准：血培养仪每日监测温度（3537℃）、CO₂浓度（510%）；全自动鉴定仪定期用标准菌株校准。意义：确保仪器参数稳定，避免因温度/气体偏差影响细菌生长与鉴定结果。3.痰培养回报“正常口腔菌群”的可能原因及改进措施：可能原因：①标本采集不规范（如未深咳，仅留取唾液）；②标本运输延迟（超过2小时未处理，口腔菌过度生长）；③患者长期使用抗生素（抑制致病菌，正常菌占优势）；④标本本身为上呼吸道分泌物（如鼻后滴漏）。改进措施：①指导患者正确留痰（清水漱口3次，深咳获取下呼吸道痰液）；②标本采集后2小时内送检（4℃保存不超过24小时）；③采集前评估患者是否使用抗生素（必要时停药后复查）；④镜检筛选不合格标本（鳞状上皮细胞＞10个/LPF时拒收，要求重采）。4.降低微生物标本污染率的具体措施：①加强临床医护培训：通过讲座/操作视频规范标本采集（如血培养皮肤消毒需碘伏待干30秒，中段尿采集前清洁会阴并弃去前段尿）。②优化标本标识与运输：使用专用容器（如带防漏盖的无菌痰杯），注明采集时间（避免超过2小时），拒收标识不清或运输延迟的标本。③建立污染预警机制：对同一患者多次培养出污染菌（如表皮葡萄球菌）的标本，反馈临床并建议重采；统计各科室污染率，定期通报并整改。五、案例分析题1.血培养操作中的不规范之处：①皮肤消毒不彻底：仅用75%酒精消毒10秒（规范需用碘伏或碘酊消毒，待干30秒以上），可能导致皮肤正常菌（如表皮葡萄球菌）污染。②采血量不足：成人需氧瓶采血量应为810ml/瓶（仅6ml可能降低阳性率）。③未采集厌氧瓶：败血症可能由厌氧菌引起（如脆弱拟杆菌），需同时采集需氧+厌氧瓶。④采集套数不足：应在23个不同时间点采集23套（每套2瓶），仅采集2份（间隔2小时）可能影响结果判读。2.革兰阳性葡萄状球菌的鉴定与药敏步骤：①初步鉴定：触酶试验（葡萄球菌阳性，链球菌阴性）；凝固酶试验（金葡菌阳性，凝固酶阴性葡萄球菌阴性）。②进一步鉴定：若凝固酶阳性，需检测β内酰胺酶（判断对青霉素类耐药性）；若凝固酶阴性，需做生化鉴定（如API