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文档简介
1、,1,特定蛋白质的免疫测定及林爽意义。2,特定蛋白质的免疫测定法,基本原理:免疫沉淀反应免疫渗透比浊免疫散射比浊,3,免疫沉淀反应的发展历史,1897年,Kraus发现细菌培养液和相应的抗血清混合后肉眼可见的沉淀反应1902年Ascoli建立了环沉淀试验。1905年贝氏体将抗体混合溶解在明胶中,然后在上面添加相应的特异性抗原,抗原抗体的特异性结合可能会沉淀在明胶中。1946年,欧丁报道了试管单向免疫扩散试验。(1965年,Mancini还推出了声誉单向免疫扩散测试。)Grabar和Williams在1953年报道了免疫电泳。(对流免疫电泳、火箭免疫电泳及免疫固定电泳)以上经典的免疫沉淀试验开发
2、阶段,测量范围小(10 100 g/ml),灵敏度低,麻烦,时间长,无法自动化。4,免疫沉淀反应发展史,1959年舒尔茨等报道了透射比浊法。1967年,里奇等人报道了散射器(nephelometry)。1977年,斯特恩伯格确立了速度散射比浊法。免疫浊度测定法比免疫沉淀法灵敏度高,重复性好,测定范围广,用于林爽体液特定蛋白质含量的测定,目前有多种自动检测仪器应用于林爽检测,特别是免疫散射浊度的测定。5,免疫透射率浊度,基本原理:当特定波长的光通过抗原抗体反应混合物时,被其中的免疫复合物(IC)反射、遮蔽、吸收,减弱。在一定范围内透射的光被吸收的量与相应抗原及抗体的量成正比,与免疫复合物的量成正
3、比。抗体量是一定的量,从标准曲线可以知道抗原的量。该方法具有足够的抗原抗体复合体数,颗粒必须足够大(35100nm),因此测量灵敏度和准确度比较低。缺点:6,免疫散射浊度,基本原理:当光通过检查溶液时,被包含在其中的抗原抗体复合体折射,部分折射,产生散射光。根据瑞利散射公式,在一定条件下,透射光与粒子浓度成正比,散射光与粒子浓度成反比。散射浊度可分为端点和速度散射浊度两种。光源荧光:高压汞灯发射,入射光波长355纳米,散射角度90激光:氦氖灯,=663纳米,=1535碘钨灯:碘钨灯,=40500纳米,=70,7、免疫散射浊度计、Deling、Beckman等美国THE BIDING SITE
4、MINIPEPH德国mechuang-D-dimer无限精灵深圳国家比赛,特定蛋白质测定的林爽意义,D- dimer (D、9、cystatin C、10,特定蛋白质测定的林爽意义,血液中含有多种功能蛋白,例如载体蛋白、免疫球蛋白(抗体)、酶、凝血因子等,含量的变化通常与多种疾病密切相关。c反应蛋白(CRP)、免疫球蛋白和子类、补体C3和C4、抗链球溶血性O (ASO)、类风湿因子(RF)、前白蛋白(PreAlbumin)、白蛋白(Albumin),11,C反应蛋白(CRP)-高灵敏度CRP是用肝细胞合成的急性时间上反应蛋白,是在炎症和组织坏死疾病的急性阶段出现在患者血清中的糖蛋白,与肺炎球菌
5、的补菌成分C-多糖蛋白反应,被称为C-反应蛋白。激活补体,促进粒细胞和巨噬细胞的吞噬作用。正常值为800-8000g/L。CRP是非常敏感的指标,在急性心肌梗塞、创伤、感染、炎症、手术、肿瘤浸润时,血浆中的CRP浓度迅速增加到正常水平的2000倍。结合林爽兵力,有助于追踪经过。特别是在炎症过程中,可以利用CRP作为风湿病、全身红斑狼疮、白血病等追踪指标。细菌和病毒感染确认了细菌感染在急性时均有增加,病毒感染大部分保持不变。也有研究称,引起心脏病最强的危险因素CRP是血液中过度胆固醇的两倍。CRP含量高的人患高血压的危险比胆固醇高的人高一倍。如果炎症和过度的胆固醇同时出现,患心脏病和中风的危险率
6、比正常人高9倍以上。这表明CRP含量高,与心脏病呈正相关。另外,最近的一项研究表明,高浓度的血液CRP是结肠癌发病的危险因素,CRP可能会早期兹盖日结肠癌。12,免疫球蛋白及子类,其浓度因年龄而异,在某些情况下,这些指标的浓度升高或降低,有诊断疾病的价值。IgG:正常情况下脐带血7.617gL,新生儿7.014.8gL,0.56月310.0gL,6月2岁512gL,26岁513gL,612岁716.5gL,1216岁715.5gL,成人616gL。慢性肝病、亚急性或慢性感染、结缔组织病、骨髓瘤、无症状单克罗恩病等增加;遗传性或后天性抗体缺乏症、混合免疫缺陷综合征、选择性缺乏综合症、蛋白质损失性
7、肠疾病、肾病综合征、强直性肌营养不良、免疫抑制剂治疗等减少。13,免疫球蛋白及子,IgA:正常情况下脐血050mgL,新生儿022mgL,0.56月3820mgL,7月2岁1401080mgL,26岁2301900mgL,612岁2902700mgL慢性肝病、亚急性或慢性感染性疾病(如结核病、真菌感染等)、自身免疫疾病(如类风湿性关节炎)、囊性纤维化、家族性中性粒细胞减少症、乳腺癌、肾病、骨髓瘤等;遗传性或后天抗体缺乏症、免疫缺乏症、选择性缺乏症、无球蛋白血症、蛋白质损失性肠病、烧伤等。抗抗体现象,免疫抑制剂治疗,妊娠后期等减少。14,免疫球蛋白及子,IgM:正常情况下脐血40240mgL,新
8、生儿50300mgL,0.56月1501090mgL,6月2岁4302390mgL,26岁5001990mgL,612岁500266胎儿宫内感染、新生儿群、慢性或亚急性感染、疟疾、传染性单核细胞增多症、支原体肺炎、肝病、结缔组织疾病、球蛋白血症、无症状单克罗恩病等。遗传性或后天抗体缺乏症、混合免疫缺陷综合症、选择性缺乏症、蛋白质损失性肠疾病、烧伤、抗抗体综合症(混合冷球蛋白血症)、免疫抑制剂治疗等减少。15、IgG和IgG子类,IgG有四个不同的子类,IgA有两个不同的子类。每个子种类的功能都不同,其含量太低、太高或缺陷会降低相应的免疫功能,从而导致相应的疾病。儿童常见的复发呼吸机感染、频繁腹
9、泻、发育不良等症状和许多经常发生的呼吸道疾病(如中耳炎、鼻窦炎、肺炎、支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、支气管扩张、哮喘等)往往与IgG或IgA subclass缺陷有关。16,补体C3和C4,正常情况下,C3(1C-球蛋白)8001550mgL,C4(1E-球蛋白)130370mgL,血液补体含量和活性在许多病理情况下发生变化。因此,应临床观察补体水平的变化。补体含量的减少不一定表示免疫功能障碍或免疫缺陷。缺血、凝血坏死、中毒性坏死时,组织释放更多的蛋白质分解酶,导致补体溶血活性及补体成分减少。血液补体浓度增加:在各种炎症性疾病和梗阻性黄疸、急性心肌梗塞、溃疡性结肠炎、糖尿病、急性痛风、急性和急性
10、甲状腺炎、急性风湿热、皮肌炎、多发性肌炎、混合结缔组织病、结节性动脉周围炎等中发现。,17,抗锁区溶血性o (aso),溶血性链球菌a群的代斯产物刺激身体产生的抗体。ASO增加见于感染性心内膜炎、扁桃体炎、风湿热、链球菌感染后急性肾小球肾炎等溶血性链球菌感染,以及感染后免疫反应引起的a组疾病。ASO在溶血性链球菌感染后一周达到最高点,可能持续几个月,因此ASO上升显示有溶血性链球菌感染,但不一定在不久的将来感染。链球菌感染后,ASO动态增加,CRP增加和血液沉淀阳性相结合,对风湿热诊断有好处。高胆固醇血症、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤患者、ASO也可能增加。18、类风湿因子(RF)、RF是以退行
11、性IgG为目标抗原的自身抗体,RF可分为IgM、IgG、IgA、IgE 4型。风湿性关节炎(RA)患者的阳性率为7080,特别是病变宽,状态严重,经过长,活动期和关节外疾病患者的阳性率高,滴度高,持续时间长。不仅是风湿病,还见于正常人,尤其是老年人、阳性率等正常人和其他疾病;各种感染性疾病,例如乙型肝炎、结核病、亚急性细菌性心内膜炎和慢性支气管炎;红斑狼疮、干燥综合征、皮炎、血管炎、硬皮病、疫苗接种后及某些恶性疾病等结缔组织疾病。这些疾病中阳性率可以达到。因此,在RA的诊断中,一般认为RF只有参考价值,而非特异性诊断价值。19、前白蛋白(Prealbumin)、用于肝内合成的糖蛋白,血液内半寿
12、命很短,因此可用作营养不良的诊断、检测和肝病的诊断。作为早期肝功能手术指南,比ALT特别,比白蛋白敏感。正常参考值范围:成人男性和女性为250-400mg/l;儿童125 - 200mg/L PA是负急性时相蛋白。在炎症和恶病质(恶性肿瘤等)中,CRP和酸性糖蛋白升高,可以看到PA急剧减少。如果前白蛋白继续保持低水平或进一步降低,则表明预后较差。肠或肾脏有蛋白质消耗性病变时,血清PA浓度也同时降低。据调查,霍奇金氏和青少年发育时期血清PA浓度较大。20,白蛋白,正常:35-55g/L高度:脱水和血液浓度。减少:白蛋白合成障碍:营养不良、肝病、慢性胃病。白蛋白过度消耗或丧失:消耗性疾病、恶病质、
13、肾病综合征、急性出血、严重烧伤、腹水形成等。其他:妊娠后期,遗传性白蛋白血症。21,2微球蛋白(2微球蛋白),2微球蛋白是细胞核细胞在体内生成的小分子球蛋白。正常人血液中2微球蛋白的浓度很低。血液上升:肾小球过滤功能下降。炎症或肿瘤。在尿液中增加:如果小管受损,2微球蛋白2微球蛋白的重吸收减少,尿液中2微球蛋白的排出增加,在测定时增加。22,1抗胰蛋白酶(1AT),1-抗胰蛋白酶是专门抑制丝氨酸蛋白水解酶的蛋白酶抑制剂。血液的正常值:23g/L。缺陷通常是遗传原因。浓度低于正常水平的30-40%,会明显出现与肝脏和肺部疾病相关的林爽方面(肝硬化、支气管扩张、胰腺纤维化)。儿童通常受到肝病的影响
14、,而成人有更多的肺病。可以减少宏观、甲状腺功能亢进及十二指肠溃疡等血液中的1AT。上升大部分是由于感染或炎症的急性期反应引起的。在这种情况下,1-抗胰蛋白酶浓度比正常高3倍。怀孕和口服避孕药后1-抗胰蛋白酶也可以增加。23,CER (Caeruloplasmin),2糖蛋白,氧化还原酶,也称为氧化铁酶,在肝脏合成,包含68个铜原子,蓝色,蓝绿色。怀孕、注射女性激素和甲状腺激素的人,有坏死、感染(最近感染的指标)。恶性肿瘤,矽肺等。CER是肺x线改变前尘肺最敏感的早期诊断指标。减少者包括肾综合征、低蛋白血症(营养不良、胃病)、急性肝炎、严重肝损害、多发性硬化等。肝豆状核变性(遗传性病变肝部窦变性
15、)明显减少。24,转铁蛋白(Tf),Tf是能够结合三价铁的糖蛋白。是血浆中主要的含铁蛋白质,代表身体的铁储存量。它的作用是运输消化道吸收的铁和红细胞释放的铁。正常:成人2.20-4.0g/l;新生儿1.30-2.75g/L减少包括以下障碍:急性肝炎(开始;后面;后面。)肝病(重症肝炎肝硬化慢性肝慢转移)、肾病综合征、蛋白质损失症、甲状腺疾病。肾脏可见于:妊娠,缺铁性贫血,急性肝初期。25,结合珠蛋白,也称为接触珠蛋白,结合珠蛋白主要在肝脏合成。减少:血管内溶血时球蛋白和红细胞溶解释放的血红蛋白结合,球蛋白/血红蛋白复合物很快从血液中去除,结合球蛋白浓度降低,严重溶血会消耗光联合球蛋白,多种溶血时血清结合球蛋白减少,是血管内溶血时最显着的
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