细胞化学染色ppt课件

细胞化学染色Cytochemical stain概 念细胞化学染色是以 细胞形态学为基础，结合运用 化学反应 的原理对血细胞内的各种 化学物质 （糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作 定性、定位、半定量 分析的方法。细胞原位的化学反应细胞原位的化学反应临床应用n辅助判断急性白血病的细胞类型n辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断（ Fe、 NAP等）FABALL（急性淋巴细胞白血病） L1、 L2、 L3AML（急性髓细胞白血病）M0 急性粒细胞白血病（微分化型）M1 急性粒细胞白血病（未成熟型）M2 急性粒细胞白血病（部分成熟型）M3 急性早幼粒细胞白血病M4 急性粒单核细胞白血病M5 急性单核细胞白血病M6 急性红白血病M7 急性巨核细胞白血病细胞化学染色的基本步骤固定显示复染保持细胞结构及化学成分不变，并使血膜在染色、冲洗过程中不易脱落损坏形成稳定的有色沉淀，显示出被检测的化学物质既能显示细胞结构又能清楚地看出细胞化学染色结果细胞化学染色的种类n过氧化物酶染色（ POX)、苏丹黑染色（SBB)n过碘酸 -雪夫反应（ PAS）又称糖原染色n酯酶染色n酸性磷酸酶染色（ ACP)n铁染色n中性粒细胞碱性磷酸酶染色（ NAP）过氧化物酶染色Peroxidase stain, POX染色原理（四甲基联苯胺法）H2O2 溶酶体颗粒 中的 H2O O2四甲基联苯胺 O2 联苯胺蓝联苯胺蓝亚硝基铁氰化钠 O2 蓝色物质 （沉淀） 正常血细胞的染色反应粒细胞系统原粒（可为阴性） 分叶（阳性程度逐渐增强）嗜酸阳性最强嗜碱阴性单核细胞系统 阴性或弱阳性（颗粒少而细）其他血细胞 阴性临床意义1.ALL：原始细胞的 POX阳性 3%2.AML：原始细胞的阳性：原始细胞的阳性 3%在多数的 M1、绝大部分 M2和 M3中，原始细胞的阳性率大于 85%， M3呈强阳性；M4和 M5时，原单有时可呈弱阳性，但绝大多数的原单是 POX阴性。M6，原粒和幼稚粒细胞是 POX阳性，幼红细胞是 POX阴性。M7，血小板 POX的活性只能在超微结构上证实。POX染色的临床应用 POX染色是辅助诊断急性白血病细胞类型 首选、最重要 的细胞化学染色，主要用于急性白血病的鉴别诊断。 急性粒细胞白血病时，其原、幼细胞呈阳性反应，以 APL 反应最强 ;急性单核细胞白血病时，原幼细胞呈弱阳性反应 ALL时呈阴性反应用途：用途： 鉴别鉴别 急性淋巴系急性淋巴系 与与 非淋巴系非淋巴系 白血病白血病结果：结果： 粒系粒系 (+)；单核系；单核系 () ； 淋巴系淋巴系 ()原粒单核 淋巴早幼 晚幼中幼过氧化物酶染色 ( peroxidase， POX ) 苏丹黑染色Sudan black, SBB苏丹黑染色 原理： SBB能溶解于细胞内的含脂结构，使脂类物质显示出来，呈棕黑色或深黑色。 正常细胞的染色反应 同 POX染色。 临床评价POX染色特异性高于 SBB染色SBB染色敏感性高于 POX染色过碘酸 -雪夫反应 (糖原染色）Periodic acid-Schiff reaction, PAS染色原理（ PAS）乙二醇基（多糖类物质中）过碘酸双醛基无色品红紫红色化合物正常血细胞的染色反应粒细胞系统原粒（可为阴性） 分叶（阳性 程度逐渐增强）嗜酸胞质呈红色，颗粒不着色嗜碱反之红细胞系统 阴性单核细胞系统 原单（可为阴性），其他阳性正常血细胞的染色反应淋巴细胞系统大多数阴性，少数阳性。巨核细胞系统 巨核细胞和血小板阳性，阳性反应的程度随细胞的发育成熟而增强。临床意义 红细胞系统疾病红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中幼红细胞可阳性（均匀红色或块状）；某些红系良性疾病如缺铁贫、巨幼贫等阴性。 白细胞系统疾病ALL：（原幼淋细胞阳性率升高，呈粗颗粒或块状）急粒：少数原粒呈阳性，阳性细颗粒状急单：可呈阳