生化实验试卷.doc

诚信考试 沉着应考 杜绝违纪浙江大学20082009学年夏学期 医学生物化学实验 课程期末考试试卷开课学院： 医学院 ，考试形式： 闭 卷，允许带_入场考试时间： 2009 年 6 月 27 日,所需时间： 60 分钟* 理论考试占总成绩60，平时实验成绩占总成绩40。一、 多项选择题 （每个2分，共20分）1. 下列方法中哪一种不能将谷氨酸和赖氨酸分开?A电泳 B阴离子交换层析 C阳离子交换层析 D凝胶过滤 2. 在什么情况下，一种蛋白质在电泳时既不向正级移动，也不向负极移动，而停留在原点？A发生蛋白质变性B电极缓冲液的pH正好与该蛋白质的pI相同C电极缓冲液的pH大于该蛋白质的pID电极缓冲液的pH小于该蛋白质的pI 3. 可用于蛋白质分子量测定的方法包括 A: SDSPAGE B: 亲和色谱 C: 排阻色谱 D: 透析4.分离纯化中可用于物质浓缩的方法包括A. 沉淀； B. 吸附 C. 超滤 D透析. 5. 用于分离纯化时其方法的原理与被分离物质的分子量有关的是A.SDS-PAGE B.离子交换色谱 C. 超滤 D 抽提6. 影响电泳的外界因素有：A.电泳介质的pH值 B.电场强度 C.缓冲溶液的离子强度 D.电渗作用7. 聚丙烯酰胺凝胶电泳具有下列哪些效应：A.浓缩效应 B 电荷效应 C 分子筛效应 D 扩散作用8. 提取核酸的方法有： A 苯酚法 B 氯仿-异戊醇法 C SDS法 D 核酸酶法9. 血清醋酸纤薄膜电泳结果的条带包括下列哪些蛋白： A 白蛋白 B 2-球蛋白 C -球蛋白 D -球蛋白10.测定核酸含量的方法有： A 定磷法 B 定糖法 C紫外分光光度法 D定碳法二、 单选题 （每个1分，共20分）1. 紫外法定量检测核酸选用的波长是A. 260nm B.280nm C.254nm D.230nm2. 下列不是用于蛋白质定量测定的方法是A.福林酚法 B.考马斯亮蓝法 C.定磷法 D.双缩脲法3. 下列方法与免疫学原理没有关系的是 .A.蛋白印迹技术 B.ELISA C.亲和色谱 D 超滤4. 考马斯亮兰能与蛋白质的哪个区域相结合？A 疏水区 B亲水区 C 肽键 D羧基末端5. 在DNA提取过程中，沉淀DNA用A 无水乙醇 B 乙醚 C 氯仿 D 戊醇6 SDS-PAGE时其迁移速率主要取决于蛋白质的 A 带电性 B 相对分子量 C 分子形状 D 生物活性7聚丙烯酰胺凝胶制备过程中使用的催化剂是 A TEMED B SDS C 过硫酸铵 D Tris-HCl8脂类薄层层析中使用的显色剂是 A 茚三酮 B考马斯亮兰 C 磷钨酸 D 磷钼酸 9离子交换层析分离混合氨基酸时，洗脱天冬氨酸用A pH 5.0, 0.1M 柠檬酸缓冲液 B 0.1M NaOH溶液C 2M HCl溶液 D pH 2.2,0.1M柠檬酸缓冲液10凝集素的制备过程中，洗脱凝集素用 A.NaCl溶液 B.葡萄糖溶液 C.蒸馏水 D. 磷酸缓冲液11. 下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是A马肝过氧化氢酶（分子量247,500）B肌红蛋白（分子量16,900）C血清清蛋白（分子量68,500）D牛b-乳球蛋白（分子量35,000）12. 有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3，电泳时欲使其中四种泳向正极，缓冲液的pH应是多少A4.0 B5.0 C6.0 D7.0 13. 从组织提取液沉淀活性蛋白而又不使之变性的方法是加入A硫酸铵 B三氯醋酸 C氯化汞 D1mol/L HCL14. 一酶促反应，1/V对1/S作图得一直线，在某一抑制剂存在时，得到第二条直线，它在1/S轴上与第一条直线相交。这说明：A该抑制是不可逆抑制B该抑制属非竞争性抑制CS和I（抑制剂）对酶分子的同一部分都有亲和力D如增加S，该抑制作用可被解除 三、 判断题 （每个1分，共20分）1. 在进行大分子分离纯化时，杂质是含量最高的那些组分，所以要去除。 2. 吸附色谱是分离生物大分子常用到的色谱方法。3. 抽提液中加入蔗糖、甘油、巯基乙醇等物质是为了改变溶液的极性。4. 核酸抽提中加入SDS、Triton X-100、Tween40有利于使膜蛋白和脂肪溶解。5. 沉淀法是将所需要的成分沉淀下来从而使其与杂质分离。6. 应用密度梯度离心技术可以将粗面内质网和滑面内质网彼此分离。7. 超速离心是指离心力达到100,000 g 的离心。8. 冷冻及抽真空装置是每台离心机必须具备的。9. 电泳法测定蛋白质分子量是一种最准确的方法。 10. 亲和色谱法是一种分离效果最好的极为理想的色谱方法。11. 用透析袋进行脱盐处理比用凝胶过滤法快而且样品损失少。12. 盐析法最常用的盐是硫酸铵。 13. 双向凝胶电泳方法是进行蛋白质组学研究的最理想的技术。14. 蛋白质分离纯化中最简便而且专一的检测方法是测定UV280。15. 同时采用用SDS-PAGE和凝胶过滤方法进行蛋白质分子量测定可以得到可靠结果。16. DNP和 RNP都能溶于1-2M的NaCl溶液中。17. 用260nm进行紫外分光光度测定，可以测出DNA的含量和纯度。18. 在纸层析过程中，谷氨酸的迁移速率比丙氨酸快。19. 从酶反应的进程曲线上，可以求出酶反应初速率的时间范围。3一 填空题（每格3分，共60分）1、实验中常用的浓缩方法有： 、 、等方法 2、核酸的含量可用 和 法来测定。蛋白质提取纯化中防止变性的基本防范措施是_及_。3、脂薄层层析中通常用 作为支持剂，用 _ 作显色剂4、凝胶层析法基本原理是 ，纸层析法一般以 为固定相，以 为流动相5、 亲和层析是 的一种层析术。固定相由 和 共价结合构亲和层析