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文档简介

第2节基因工程及其应用

[学习目标I1,说出基因工程的概念。2.说出基因工程的基本工

具。(重点)3.阐述基因工程的基本操作。(重点)4.举例说明基因工程的

应用。

知识点1基因工程的原理

请仔细阅读教材第102〜103页,完成下面的问题。

1.概念:基因工程,又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。

通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,

加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗

传性状。

2.原理:基因重组。

3.操作水平:DNA分子水平:操作环境:体外。

4.基本工具

(1)基因的“剪刀”一限制性核酸内切酶倘称限制酶)。

①特点:一种限制酶只能识别一种特定的核甘酸序列。

②作用位点:磷酸二酯键。

③产物:a.黏性末端:b.平末端。

④实例:大肠杆菌的一种限制酶能识别GAATTC序列,并在G

和A之间切割,产生两个带有黏性末端的DNA片段,如图所示:

⑵基因的“针线”DNA连接酶。

①作用对象:两个具有相同末端的DNA分子。

②作用位置:脱氧核糖与磷酸之间的缺口。

③产物:形成重组DNA分子。

⑶基因的运载体

①作用:将外源基因送入受体细胞。

③运载体必须具备的条件

a.能在受体细胞中复制,并稳定保存。

h.具有二个或芟个限制酶切点,便于外源基因插入。

C.具有标记基因,如:抗性基因,便于进行筛选。

5.操作步骤

知识点2基因工程的应用及其安全性

请仔细阅读教材第104〜106页,完成下面的问题。

1.基因工程的应用

(1)作物育种

①现状:近几年来,人们利用基因工程的方法,获得了高左、稳

产和具有优良品质的农作物,培育出具有各种抗逆性的作物新品种。

②实例:抗棉铃虫的转基因抗虫棉

抗虫基因来自苏云金芽胞杆菌,该基因能够指导合成一种毒性很

强的蛋白质晶体,使棉铃虫等害虫死亡。科学家将编码这个蛋白质的

基因导入作物,使作物自身具有抵御虫害的能力。

③意义:抗虫基因作物的使用,不仅减少了农药的用量,而且大

大隆低了生产成本°

(2)药物研制

①现状:在药品生产中,有些药品由于受原料来源的限制,价格

十分昂贵。用基因工程的方法能够高效率地生产出各种高质量、低成

本的药品,如胰岛素、干扰素、乙肝疫苗。

②实例:胰岛素

科学家将人体内能够产生胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子

重组,并在大肠杆菌内获得成功表达。

③意义:大大降低了药品生产的成本,

(3)环境保护

利用转基因细菌降解有毒有害的化合物,吸收环境中的重金属,

分解泄漏的石油,处理工业废水等。

2.转基因生物及转基因食品的安全性

目前对转基因生物和转基因食品的安全性问题存在两个观点

(1)转基因生物和转基因食品是安全的,应该大范围推广。

(2)转基因生物和转基因食品是不安全的,应该严格控制。态度:

要理性看待科学技术,在看到转基因技术的应用前景非常广阔的同时,

也要正视转基因技术带来的安全性问题,要趋利避害,而不能因噎废

食。

要点一基因工程的原理和操作过程1.基因工程的概念

基因工程的

基因拼接技术或DNA重组技术

别名

实质基因重组

操作环境生物体外

操作对象基因

操作水平DNA分子水平

基本过程剪切一拼接一导入一表达

定向改造生物的遗传性状,获得人类需要的基因产

结果

物或生物新品种

2.基因工程的基本步骤

3.构建基因表达载体的过程及工具酶的应用

⑴基因表达载体的构建过程

图示解说

⑵选择限制酶的注意事项

①根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类

a.应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择PstIo

b.不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择

SmaIo

C.为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不

同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用PstI和七coRI

两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。

②根据质粒的特点确定限制酶的种类

a.所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致,以确保具有

相同的黏性末端。

b.质粒作为运载体必须具备标记基因等,所以所选择的限制酶

尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶5〃皿I会破坏标记基因;

如果所选酶的切点不是一个,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢

失的片段含复制起点,则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主

复制。

(3)与核酸有关的几种酶的比较

①限制性核酸内切酶(限制酶):一种限制酶只能识别一种特定的

核昔酸序列,并且能在特定的位点上切割DNA分子,基因工程中常

被用来切割目的基因和运载体。

②DNA连接酶:主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键,起

连接作用,在基因工程中常被用来构建基因表达载体。

③DNA聚合酶;主要是连接DNA片段与单个脱氧核甘酸之间

的磷酸二酯键,在DNA复制中起作用;DNA聚合酶只能将单个核

昔酸加到已有的核酸片段上,而DNA连接酶是在两个DNA片段之

间形成磷酸二酯键。DNA聚合酶在DNA复制时发挥作用,DNA连

接酶常被用于基因工程。

④RNA聚合酶:RNA聚合酶是合成RNA分子时发挥催化作用

的酶,在RNA复制和转录中起作用。

⑤逆转录酶:催化逆转录过程所需要的酶,基因工程中人工合成

目的基因时需要逆转录酶发挥作用。

4.基因工程成功的基础

【典例1】基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和

质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是

-GGATCC-,限制酶II的识别序列和切点是一'GATC—。据图

判断下列操作正确的是()

A.目的基因和质粒均用限制酶n切割

B.目的基因和质粒均用限制酶I切割

c.质粒用限制酶n切割,目的基因用限制酶I切割

D.质粒用限制酶I切割,目的基因用限制酶n切割

I解析]依据题干信息,注意所给的两种限制酶所识别的两个核

着酸序列,其产生的黏性末端是相同的,又由于限制酶n所识别的核

甘酸序列,有一部分与限制酶I所识别的一致,因此目的基因用限制

酶n切割;而质粒用限制酶I切割,可保证质粒上保留一个标记基因

(GeneI)。

I解析]D

[针对训练1]如图所示为一项重要生物技术的关键步骤,X是

获得外源基因并能够表达的细胞。下列有关说法不正确的是()

A.X是能合成胰岛素的细菌细胞

B.质粒具有多个标记基因和多个限制酶切点

C.外源基因与运载体的重组只需要DNA连接酶

D.该细菌的性状被定向改造

[解析]根据图示,重组质粒导入的是细菌细胞,所以X是能合

成胰岛素的细菌细胞。质粒作为运载体需要有多个限制酶切点以便转

运多种目的基因,同时具有标记基因以便检测目的基因是否导入受体

细胞内。基因与运载体的重组需要限制酶和DNA连接酶。基因工程

的特点是能够定向改造生物的性状。

I答案]C

要点二基因工程和基因重组的比较

1.基因工程与基因重组的区别

2.不同类型的基因重组的比较

同源染色体上非非同源染色体上人为导致基因重

重组的类型

姐妹染色单体的非等位基因间的组(DNA重组技

交叉互换重组术)

目的基因与运载

减数第一次分裂减数第一次分裂体重组以及将其

发生的时间

四分体时期后期导入受体细胞内

进行增殖和表达

同源染色体非姐同源染色体分

目的基因经运载

妹染色单体之间开,等位基因分

体导入受体细

发生的机制交叉互换,导致离,非同源染色

胞,导致受体细

染色单体上的基体上非等位基因

胞中基因重组

因重新组合间的自由组合

图像示意

重纸质粒受体郡胞

为生物变异提供了极其丰富的来源,是形成生物多样

意义

性的重要原因之一

【典例2】下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是

()

①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻②我国科

学家将苏云金杆菌的某些基因移植到棉花体内,培育出抗虫棉③我

国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒

A.①B.①②

C.①②③D.②③

[解析]杂交育种的原理是基因重组,①符合;基因工程的原理

是基因重组,②符合;太空椒是诱变育种的成果,原理是基因突变,

③不符合;故选B。

I答案IB

[针对训练2]下列关于基因工程的叙述,错误的是()

A.基因工程的生物学原理是基因重组

B.通过基因工程技术能够定向改造生物的遗传性状

C.整个过程都需要酶的催化

D.基因工程属于分子水平的操作

[解析]目的基因的导入及目的基因的检测与鉴定等步骤可以

不需要酶的催化。

[答案]C

要点三转基因生物和转基因食品的安全性1.在转基因过程中,

目的基因可以整合到细胞核中的染色体上,也可能整合到线粒体或叶

绿体DNA上。若整合到细胞核中染色体上随染色体遗传,若整合到

线粒体或叶绿体DNA上,则会随着细胞质遗传而遗传,可以避免环

境污染。

2.有关转基因生物安全性的讨论

要运用唯物辩证法的思想进行客观公正地评价,要一分为二,不

能以偏概全。

转基因技术已在生产、生活中得到广泛应用,如超级细菌的培养

和抗虫棉的培育。但同时转基因生物和转基因食品也存在一些安全隐

患,如新产生的转基因生物可能会破坏生态系统的稳定性等。因此,

可以说转基因技术是把双刃剑,使用时应注意趋利避害。

【典例3]下列关于基因工程及转基因食品的安全性的叙述,

正确的是()

A.基因工程常以抗生素抗性基因为目的基因

B.通过转基因技术可获得抗虫粮食作物,从而增加粮食产量,

减少农药使用

C.通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA,用

另一种限制性核酸内切酶处理运载体

D.若转入甘蔗中的外源基因来源于自然界,则生产出来的甘蔗

不存在安全性问题

I解析]基因工程常以抗生素抗性基因作为标记基因,A错误;

在基因工程的实际操作中一般用同一种限制性核酸内切酶来处理含

目的基因的DNA和运载体,使它们产生相同的末端,C错误;转基

因甘蔗中的外源基因来源于自然界,仍可能存在食品安全、环境安全

等安全性问题,D错误。

[答案IB

[针对训练3]转基因成果令人叹为观止,下列不是转基因成果

的一项是()

A.抗虫棉花

B.能清除石油污染的假单胞杆菌

C.我国奶牛的主要品种——中国荷斯坦奶牛

D.抗除草剂玉米

I答案]C

课堂归纳小结

[网络构建]

自我校对:作物育种药物研制环境保护运载体受体细胞

检测与鉴定限制酶DNA连接酶运载体

[拓展阅读]

超级稻计划

2014年9月24日,在由中国科学院谢华安院士担任组长的专家

组现场监督下,农民在试验田里进行人工收割。由湖南杂交水稻研究

中心牵头的国家十二五863计划课题“超高产水稻分子育种与品种

创制”最近取得重大突破:袁隆平团队与创世纪种业合作研究的最新

成果“Y两优900”湖南隆回百亩高产示范区,经以中科院院士谢华

安为组长的专家组现场测产,按算术平均计算方法,平均亩产达公斤,

首次实现了超级稻百亩过千公斤的目标。

我国“超级稻计划”始于1996年。当时袁隆平院士提议,该提

议被国家有关部门采纳,作为“超级杂交稻选育”立项,进入“863”

计划。超级稻计划的“姊妹计划”——“水稻基因组测序和重要农艺

性状功能基因组研究”。以中国科学院院士张启发为主的科研团队提

出了“绿色超级稻”的设想和计划。其基本思路是:将品种资源研究、

基因组研究和分子技术育种紧密结合,加强重要性状生物学的基础研

究和基因发掘,进行品种改良,培育大批抗病、抗虫、抗逆、营养高

效、高产、优质的新品种。

超级稻研究,将有助于中国最终形成“少种、多收、高效、环境

友好”的水稻生产新格局,达到促进农业结构调整、提高稻作产出与

投入比、合理利用自然资源、减少环境污染和增加稻农经济收入的目

的。

超级稻研究用到了什么技术?研究超级稻有什么意义?

提示:分子技术育种。意义:合理利用自然资源,减少环境污染,

增加经济收入。

I学业水平合格测试]

1.下列应用中不属于基因工程的是()

A.转基因抗虫棉的成功培育

B.利用工程菌生产胰岛素

C.用紫外线处理青霉菌以提高青霉素的产量

D.用奶牛生产人干扰素

[解析]用紫外线处理青霉菌提高青霉素产量属于基因突变。

I答案]C

2.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依

次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用

的正确顺序是()

A.①②③④B.①②④③

C.①④②③D.①④③②

[解析|限制性核酸内切酶用于切割DNA片段;而与之作用相

反的是DNA连接酶,用于连接DNA片段;DNA聚合酶用于DNA

的复制过程,它需要模板;解旋酶会使DNA双链解旋而分开,它作

用于碱基对之间的氢键。

I答案IC

3.下列有关基因工程和酶的相关叙述,正确的是()

A.同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒,因此不具

备专一性

B.运载体的化学本质与载体蛋白相同

C.限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸

D.DNA连接酶可催化游离的脱氧核昔酸连接成脱氧核昔酸链

[解析]限制酶能识别脱氧核普酸序列,并在特定的切点上切割

DNA分子,具备特异性,A错;运载体中的质粒的化学本质是环状

的DNA,而细胞膜上载体蛋白的化学本质是蛋白质,B错;限制酶

能识别并切割DNA分子,而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,C正

确;DNA连接酶可催化脱氧核甘酸链间形成磷酸二酯键,DNA聚合

酶可催化游离的脱氧核甘酸连接成脱氧核昔酸链,D错。

I答案]C

|学业水平等级测试]

4.下列有关质粒的说法,正确的是()

A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒中也具有

B.细菌的基因只存在于质粒中

C.质粒为小型的环状DNA分子,存在于拟核或细胞核外的细

胞质基质中

D.质粒是基因工程中重要的工具酶之一

[解析]质粒主要存在于细菌、酵母菌等生物中,病毒中没有质

粒,A错误;细菌的基因主要存在于拟核中,少量存在于质粒中,B

错误;质粒是拟核或细胞核外环状的DNA分子,具有自我复制能力,

C正确;质粒是基因工程中最常用的运载体,D错误。

I答案]C

5.下列实践活动包含基因工程技术的是()

A.水稻M花药经培养和染色体加倍,获得基因型纯合新品种

B.抗虫小麦与矮秆小麦杂交,通过基因重组获得抗虫矮秆小麦

C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞,经组织培养获得

抗病植株

D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变,获得种子性状发生

变异的大豆

[解析IA项为单倍体育种,原理是染色体变异;B项为杂交育

种,原理为基因重组;C项为基因工程育种,需要利用基因工程技术

将重组DNA分子导入受体细胞,原理为基因重组;D项为诱变育种,

原理为基因突变。

[答案IC

课后作业(二十)

[学业水平合格练]

1.科学家们经过多年的努力,创立了一种新兴生物技术——基

因工程,实施该工程的最终目的是()

A.定向提取生物体的DNA分子

B.定向地对DNA分子进行人工“剪切”

C.定向地改造生物的遗传性状

D.在生物体外对DNA分子进行改造

[解析]根据基因工程的概念可知,实施该工程的最终目的是定

向地改造生物的遗传性状。

[答案IC

2.基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段时,

需使用()

A.同种限制酶B.两种限制酶

C.同种DNA连接酶D.两种DNA连接酶

[解析I用同种限制酶切割运载体和含有目的基因的DNA片段,

可以使两者产生相同的黏性末端,可通过互补碱基的配对结合起来,

再用DNA连接酶使两条链上的缺口结合,就形成一个完整的重组

DNAo

I答案]A

3.在下列基因操作的四个基本步骤中,不需要进行碱基互补配

对的步骤是()

A.人工合成目的基因

B.将目的基因导入受体细胞

C.目的基因与运载体结合

D.目的基因的检测与鉴定

[解析]用人工方法使体外重组的DNA分子转移到受体细胞,

主要借助于细胞膜的流动性,此过程中不需要碱基互补配对。

[答案]B

4.人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,通过

转基因技术,可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是()

A.大肠杆菌B.酵母菌

C.Ti噬菌体D.质粒DNA

[解析]人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成,

故受体细胞内应有内质网和高尔基体,题干中只有酵母菌符合此条件。

[答案]B

5.你认为支持基因工程技术的理论有()

①遗传密码的通用性②不同基因可独立表达③不同基因表

达可互相影响④DNA作为遗传物质能够严格地自我复制

A.①②④B.②③④

C.①③D.①④

[解析I转基因之所以在不同种生物间可以进行是因为遗传密

码的通用性——同一基因在不同生物中表达产生的蛋白质(或性状)

相同;不同基因表达的独立性——在不同生物中基因的表达不受其他

基因的影响;DNA自我复制的严格性——从而保证遗传的稳定性。

[答案]A

6.下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是()

①利用杂交技术培育出超级水稻②通过返回式卫星搭载种子

培育出太空椒③通过体细胞克隆技术培养出克隆牛④将苏云金

杆菌的某些基因移植到棉花体内,培育出抗虫棉⑤将健康人的正常

基因植入病人体内治疗基因病⑥用一定浓度的生长素处理,获得无

子番茄

A.①③⑤B.①②④

C.①④⑤D.①②⑥

[解析]通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒属于太空育种,

其原理为基因突变;通过体细胞克隆技术培养出克隆牛属于无性生殖,

应用的原理是细胞核的全能性;用一定浓度的生长素处理,获得无子

番茄应用的是生长素的生理作用。

[答案]C

7.据图所示,有关工具酶功能的叙述不正确的是()

A.限制酶可以切断a处

B.DNA连接酶可以连接a处

C.解旋酶可以使b处解开

D.DNA连接酶可以连接b处

[解析I限制酶和DNA连接酶作用的部位是磷酸二酯键即a处,

解旋酶作用的部位是氢键即b处。

[答案]D

8.下图是应用基因工程技术获得转基因动物和植物的过程,相

关叙述不正确的是()

A.通过①过程形成重组质粒只需要两种工具

B.②是重组质粒导入受体细胞的过程

C.通过③过程产生的转基因牛的细胞中都含有人的生长激素基

D.通过④⑤过程培育的抗虫棉需要检测抗虫效果

[解析]①是目的基因与运载体结合的过程,既需要限制酶和

DNA连接酶,也需要载体质粒。

[答案]A

9.基因工程技术也称DNA重组技术,其实施时需要的四个必

要条件是()

A.目的基因、限制酶、运载体、体细胞

B.重组DNA、RNA聚合酶、内切酶、连接酶

C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞

D.工具酶、目的基因、运载体、受体细胞

[解析]基因工程必须用到限制酶、DNA连接酶等工具酶,需

要将目的基因与运载体结合,并导入受体细胞,所以基因工程实施时

需要的四个必要条件是工具酶、目的基因、运载体和受体细胞。

[答案]D

[学业水平等级练|

10.采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法

正确的是()

①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序

列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组后,

导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒

素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵

A.①②B.②③

C.③④D.①④

[解析1基因工程中,在导入目的基因前要将目的基因与运载体

结合,即与细菌质粒重组,之后再将含有目的基因的重组质粒导入受

体细胞,即棉的体纽胞或受精卵,目的基因导入受体细胞后,可随受

体细胞的繁殖而复制。若直接将毒素蛋白或编码毒素蛋白的DNA序

列注射到棉受精卵中,都很容易被相应的酶水解,不会被保留下来。

[答案IC

11.利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体(图乙)构建重组DNA。3

种酶、EcoRI和Sa*AI)在目的基因所在片段与P1噬菌体

上的切点均如图中箭头所示。下列分析错误的是()

A.构建重组DNA时,可用和3Al切割目的基因所

在片段和P1噬菌体

B.构建重组DNA时,可用EcoRI和Sau3AI切割目的基因所

在片段和Pl噬菌体

C.图乙中的P1噬菌体只用EcoRI切割后,含有2个游离的磷

酸基团

D.用EcoRi切割目的基因所在片段和P1噬菌体,再用DNA

连接酶连接,只能产生一种重组DNA

[解析]由题图可知,Bglll、3Al及EcoRi三种酶在目的

基因所在片段和P1噬菌体上都有切点,故可用的/11和3AI或

EcoRI和3Al切割目的基因所在片段和Pl噬菌体;从图乙知

P1噬菌体为环状DNA,只用EcoRI切割后产生两条反向双螺旋链

状DNA,有2个游离的磷酸基团;用EcoRI切割目的基因所在片段

和P1噬菌体载体,再用DNA连接酶连接,能产生不止一种重组DNA。

[答案]D

12.由于乙肝病毒感染的宿主范围很窄,仅限于人和灵长类动物,

因此无法用细胞培养的方法生产疫苗,但可用基因工程的方法进行生

产,现已知乙肝病毒的核心蛋白和表面抗原蛋白的氨基酸序列,生产

示意图如下。下列相关说法不正确的是()

①②③

乙肝病毒一一->有关基因——>细菌一一->大量生产疫苗

分离导入发酵

A.生产乙肝疫苗的过程也达到了定向改造细菌的目的

B.在①②过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

C.用于生产疫苗的目的基因为编码核心蛋白的基因和表面抗原

蛋白基因

D.这种转基因的细菌一定是安全的,不用担心其扩散到自然界

[解析]题干中所述过程应用了基因工程技术,能定向改造生物

的遗传性状;在操作时要应用限制酶来获得目的基因,并用DNA连

接酶使之与运载体结合;该过程的目的基因为表面抗原蛋白基因和编

码核心蛋白的基因;转基因生物的安全性还存在争议,无法判断其安

全性,应避免其扩散进入自然界。

[答案]D

13.科学家通过基因工程,成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株

——抗虫棉,其过程大致如图所示:

(1)目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键

是目的基因是否插入受体细胞染色体DNA上,这需要通过检测才能

知道,检测采用的最好方法是_________________________________

_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(2)科学家预言,此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后,

将出现不抗虫的植株,此现象来源于

____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(3)利用基因工程技术培育抗虫棉,相比诱变育种和杂交育种,

具有目的性强和等突出的优点。

(4)有人担心种植上述转基因抗虫棉,它所携带的目的基因可以

通过花粉传递给近缘物种,造成“基因污染”,请提出你的解决方法:

[解析]由题图可知,目的基因是苏云金芽抱杆菌的毒蛋白基因,

与Ti质粒重组后,利用农杆菌导入植物组胞产生了抗虫棉植株。这

种育种方式能克服远缘杂交不亲和性,可用DNA分子杂交技术检测

目的基因是否整合到受体细胞染色体上。

[答案](l)DNA分子杂交技术

(2)基因突变

(3)克服远缘杂交不亲和性(或能有效地打破物种间的生殖隔离界

限)

(4)将目的基因导入叶绿体或线粒体基因组中

14.在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan〉常作

为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基

上生长。如图为获得抗虫棉的技术流程,请据图回答:

(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:提取目的基因、

、将目的基因导入受体细胞、。

(2)要使运载体与该抗虫基因连接,A过程中首先应使用

进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为

AATTC—

I

G—,则能与该运载体连接的抗虫基因分

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